Tinciones PDF

Preview

Summary

Fundamento de las diferentes tinciones que se emplean en microbiologia...

Description

TINCIONES 1.- ¿Qué son los colorantes? Los colorantes son compuestos químicos que aumentan el contraste entre las estructuras, que contienen un cromóforo y un auxocromo en su estructura. Son sustancias capaces de dar color a células , tejidos , fibras , etcétera.De acuerdo con su origen, se pueden dividir en: colorantes naturales, los cuales son extraídos de plantas o animales, y colorantes artifi ciales, que son aquellos de minerales procesados y manipulados en el laboratorio. Químicamente, el colorante está constituido de un componente cromóforo y un auxocromo, cuando interacciona un colorante con una célula o un tejido, ocurren reacciones que dependen de grupos químicos funcionales denominados cromóforos y auxocromos. Los colorantes son sustancias que tienen la capacidad de teñir células, estructuras o tejidos; y de acuerdo con su origen, permiten hacer visibles los objetos microscópicos y transparentes, conocer su forma y tamaño, así como sus estructuras internas y externas. Los colorantes hacen parte de reacciones químicas específicas y de acuerdo con su origen, se pueden clasificar en naturales, aquellos que son extraídos de plantas o animales, y artificiales, los que se extraen de minerales y son procesados en el laboratorio. En cuanto a su estructura química los colorantes están constituidos por un grupo funcional cromóforo y un auxócromo Características : 1. Permiten hacer visibles a los objetos microscópicos y transparentes. 2. Revelan su forma y tamaño. 3. Muestran la presencia de estructuras internas y externas. 4. Producen reacciones químicas específicas. 2.- ¿Cuál es la función de las tinciones en Microbiología? Las tinciones son utilizadas en microbiología para:  Hacer pruebas microbiológicas.  Clasificar a los microorganismos .  Diagnóstico de enfermedades .  Estudiar estructuras celulares .

 Análisis en el laboratorio para la identificación presuntiva de agentes infecciosos.  Valoración inicial de muestras para análisis bacteriológico 3.- Escribe el nombre de tres tinciones que se utilizan en Bacteriología y para que se aplica cada una. La tinción de Gram se considera básica en la valoración inicial de muestras para análisis bacteriológico. es una tinción diferencial, ya que utiliza dos colorantes y clasifica a las bacterias en dos grandes grupos: bacterias Gram negativas y bacterias Gram positivas. La tinción de Ziehl-Neelsen es la técnica comúnmente usada en el diagnóstico rutinario de tuberculosis , permite diferenciar a las bacterias en dos grupos: aquellos que son capaces de resistir la decoloración con alcohol-ácido y aquellos que no lo son Tinción negativa La tinción negativa fue desarrollada originalmente para microscopia de luz con el fi n de rodear y delinear las bacterias no teñidas u otros materiales biológicos. tincion de tinta china Muchas células bacterianas se rodean con uno u otro tipo de gel hidrófilo. Con frecuencia esta capa es gruesa; comúnmente es más gruesa que el diámetro de la célula . nos permite observar características estructurales de la bacteria además de su morfolog fa. Esta se caracteriza por permitir visualizar sobre un fondo oscuro la forma de la bacteria adernas de la presencia de capsulas tincion de rojo Congo A diferencia de la tinciÓn de tinta china, en la tincion de rojo Congo se emplean dos reactivos, uno de ellos, el rojo Congo y el segundo es un mordente de capsula. Dicho colorante penetrara el cuerpo del bacilo sin lograr tenir la capsula, por lo que se observara en el microscopio como una zona de halo trasparente rodeado de color rojo del bacilo. Tincion de granulos metacromaticos Muchas bacterias, cuando crecen bajo determinadas condiciones de cultivo, son capaces de acumular dentro del citoplasma depósitos de materiales de reserva que se denominan inclusiones. Los gránulos metacromáticos son un ejemplo de estas inclusiones; constituyen acumulaciones de polifosfato y se conocen tambien como gránulos de volutina o cuerpos de Babes-Ernst .La volutina representa una reserva de fosfato inorgánico (polifosfato) que la célula puede utilizar para sintetizar ATP. Fundamento de la thick:on de azul de metileno o de Loeffler

Se emplea para la obseryacidin de los granulos metacromaticos en las bacterias, por lo que su fundamento es el mismo que el anterior mencionado, a diferencia de que el colorante que se utiliza es el azul de metileno en lugar del colorante de Albert, por lo que dichos granulos se observaran de color azul oscuro (59). Colorante: Azul de metileno El colorante tine los granulos metacromaticos de azul intenso y el resto de la celula de azul claro. Tinción de Schaeffer Fulton Las endosporas bacterianas son muy resistentes a los procedimientos tintoriales usuales. La aplicación de un solo colorante a una célula bacteriana que contiene una endoespora, solo tiñe la célula, pero la espora se mantiene incolora, para lograr introducir el colorante dentro de la espora es necesario aplicar calor. La tinción de Schaeffer y Fulton emplea verde malaquita como colorante primario, el cual es eliminado posteriormente del resto de la célula bacteriana, pero no de la espora, mediante un enjuague con agua. Como colorante de contraste se emplea safranina, la cual tiñe la célula vegetativa . Colorante primario: Verde de malaquita y calentamiento a emisión de vapores. Con el calentamiento, el colorante penetra las esporas y tiñe todas las células de verde

4.- ¿Qué es un frotis bacteriano? Se denomina frotis a la extensión que se realiza sobre un portaobjetos de una muestra o cultivo con objeto de separar lo más posible los microorganismos, ya que si aparecen agrupados en la preparación es muy difícil obtener una imagen clara y nítida. Este frotis debe ser posteriormente fijado al vidrio del portaobjetos para poder aplicar los métodos habituales de tinción que permiten la observación al microscopio de las bacterias sin que la muestra sea arrastrada en los sucesivos lavados. La fijación de una extensión bacteriana hace que las bacterias queden inactivadas y adheridas al vidrio alterando lo menos posible la morfología y bacteriana y las posibles agrupaciones de células que pudiera haber.

5.- Describe la tinción de Gram. Fundamento de la thick:on de Gram El cristal violeta (violeta de genciana) sirve como colorante primario y se une a la pared celular bacteriana luego de un tratamiento con una soluci6n debil de yodo, que sirve como mordiente para la union del colorante. Algunas

especies de bacterias, debido a la naturaleza quf mica de sus paredes celulares, tienen la capacidad de retener el cristal violeta incluso luego del tratamiento con un decolorante organico, como por ejemplo una mezcla en partes iguales de alcohol etilico al 95% y acetona. Las bacterias que retienen el colorante se ven negro azuladas cuando se observan al microscopio, y se denominan entonces Gram positivas. Algunas bacterias pierden la coloraciOn primaria con cristal violeta cuando son tratadas con el decolorante, presumiblemente debido al alto contenido de Ifpidos de su pared celular. Estas bacterias decoloradas toman el colorante de contraste, la safranina, y se ven rojas cuando se observan al microscopio, denominandose Gram negativas. Cuando estas reacciones de coloraci6n de Gram son observadas junto con el tipo (cocos y bacilos) y la disposici6n de las celulas bacterianas, pueden ser usadas para realizar identificaciones presuntivas....