Tinciones flagelares PDF

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Tinción negativa de capsula y flagelares...

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Tarea 1 Microbiología

Jessica Lizeth Paredes Alday

Tinciones flagelares Estas son utilizadas para demostrar la presencia de flagelo, donde se usa un mordiente para aumentar los diámetros de los flagelos hasta que se puedan visualizar por microscopio cuando se tiñan. El método de Kodaka consiste en suspender las bacterias y se agrega una gota de colorante en el borde del cubre objetos y se deja en reposo por 10 minutos a temperatura ambiente. El colorante entra en la preparación por capilaridad y teñirá los flagelos, que se evidenciaran fácilmente en la zona donde se observa en colorante. Las bacterias para tinción de flagelos deben cultivarse en medios sin carbohidratos para evitar los efectos negativos de la acidez; además, deben utilizarse cultivos jóvenes. Esta tinción incrementa el diámetro de los flagelos por deposición de colorante. En ocasiones son útiles para identificar ciertos bacilos no fermentadores móviles, sobre todo cuando las reacciones bioquímicas son débiles y equivocas. En el método de Leifson, se preparan las laminillas limpiándolas con dicromato o ácido nítrico y calentando, se enjuaga en alcohol, preparamos un frotis con bacterias en medio líquido, se inclina por una esquina la laminilla para dejar una película delgada, una vez seca, a temperatura ambiente, se inunda con solucion de fucsina (básica) dejando reposar por 10 minutos, lavamos y secamos, en esta tinción los flagelos se tiñen de rojo, pudiendo presentar diferente disposición. El método de Gray, utiliza un mordiente que cubre la superficie del flagelo, aumentando aparentemente su grosor y a su vez proporcionando una capa de material teñible para captar el colorante. Aquí debemos de pasar de 3 a 4 veces por el fuego el portaobjetos, preparar una suspensión de la bacteria en agua estéril, sobre el portaobjetos ya frio, colocar 5 gotas de la suspensión (4 en las esquinas y una en el centro), dejar secar al aire, cubrir con mordiente durante 10 minutos, lavar con agua tratando de no arrastrar la solución, cubrir con solución carbol-fucsina durante 5 a 10 minutos, lavar con agua, dejar secara al aire y observar con objetivo de inmersión, los flagelos se observaran rojos, el mordiente es preparado el mismo día de su uso.

Tinciones de cápsula Las tinciones negativas son importantes pues nos permiten saber las condiciones nutricionales y fisiológicas que pueden reprimir o activar la síntesis de esta cápsula, saber la resistencia que tiene la bacteria, porqué es capaz de adherirse a ciertas superficies y comó puede aguantar la desecación, la demostración de la presencia de capsula básicamente nos ayuda a determinar la virulencia del microorganismo, es decir el grado hasta el cual un patógeno puede causar una enfermedad: las cápsulas, por sus características se pueden observar indirectamente con tinta china, compuesto por partículas finas de carbono suspendidas en agua formando un coloide, las partículas son demasiado grandes para penetrar a través de la matriz de la capsula, por lo que solo se teñirá el medio circundante y las células aparecerán sin teñir sobre un fondo de color negro. Para distinguir la cápsula del resto de la célula se debe aumentar el contrate cerrando el diafragma del condensador, y esta aparecerá como un halo transparente alrededor de la célula. Bibliografía Rodríguez Cavallini Evelyn. Bacteriología General: Principios Y Prácticas de Laboratorio. Editorial Universidad de Costa Rica. Página 79

Tarea 1 Microbiología

Jessica Lizeth Paredes Alday

García Tinajero Raúl. (1985). Manual Ilustrado de Tecnicas de Laboratorio Utilizadas en Bacteriología y Micología Veterinarias. Ed. IICA Biblioteca Venezuela. pp 83-85...