Aula Prática Fosfatase Ácida PDF

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UNIVERSIDADE DE CAXIAS DO SUL CENTRO DE CIÊNCIAS DA SAÚDE UEM Biofisiológica – Campo temático: Bioquímica Aula Prática Fosfatase Ácida O termo fosfatase ácida designa um grupo heterogêneo de fosfatases que exibem pH ótimo abaixo de 7,0 e catalisam a hidrólise de monoéster ortofosfórico, produzoindo um álcool e um grupo fosfato. A fosfatase ácida é amplamente distribuída nos tecidos. A maior atividade é encontrada na glândula prostática (cerca de 1000 vezes maior que em outros tecidos), nas células ósseas, no fígado, no baço, nos eritrócitos e nas plaquetas. Em indivíduos do sexo masculino, a fração prostática representa em torno de 50% da fosfatase ácida total, sendo o restante proveniente do fígado e de desintegração de eritrócitos e plaquetas. Os níveis de fosfatase ácida no soro apresentam importância clínica no diagnóstico e na monitorização do câncer prostático. Níveis séricos elevados da fosfatase ácida prostática são encontrados em pacientes portadores de câncer de próstata. Dados da literatura demonstram que cerca de 5-10% dos pacientes com câncer de próstata no estágio B apresentam níveis séricos elevados da fração prostática. Esta percentagem sobe para 20-25% no estágio C e alcança níveis acima de 60% no estágio D. Quando o adenocarcinoma está confinado à próstata, os valores de fosfatse ácida podem ser normais. Pacientes portadores de hipertrofia benigna da próstata podem ter níveis séricos ligeiramente elevados de fosfatase ácida prostática. Indicações Estadiamento e seguimento de neoplasia de próstata Auxiliar no diagnóstico de metástases de neoplasia de próstata Material Soro ou plasma (jejum de 8h) Níveis elevados de fosfatase ácida Neoplasia de próstata – estadiamento e seguimento de neoplasia de próstata, particularmente da forma metastatizada Hipertrofia prostática benigna – ocorrência relativamente em homens acima dos 40 anos. O aumento é possível devido à compressão ou obstrução do sistema ductal prostático, como resultado da hipertrofia glandular. Palpação retal Prostatite Enfermidades ósseas Obs.: o resultado de Fosfatase Ácida sempre deverá ser correlacionado com PSA (antígeno prostático específico). Valores de Referência 0,15 a 0,56 U/L

Unidade de Medida U/L

Princípio A fosfatase ácida do soro atua sobre o substrato de timolftaleína monofosfato. A adição de álcali inibe a ação enzimática e converte a timolftaleína liberada na sua forma azul, que é medida colorimetricamente. O produto final da reação se constitui de uma mistura de cor azul e a cor própria do substrato.

Procedimento 1. Tomar 3 tubos de ensaio e proceder como a seguir: Substrato Água destilada ou deionizada Padrão (nº3)

Controle 0,5 mL ---------

Teste 0,5 mL ---------

Padrão ----0,5 mL 0,1 mL

2. Colocar em banho-maria a 37 ºC por 2 minutos. O nível da água no banho deve ser superior ao nível dos reagentes nos tubos de ensaio. Amostra

-----

0,1 mL

----

3. Misturar e incubar em banho-maria a 37 ºC EXATAMENTE 30 minutos (cronometrados). Reagente de Cor (nº 2) Amostra

2,0 mL 0,1 mL

2,0 mL -----

2,0 mL -----

4. Misturar e determinar as absorbâncias do controle, teste e padrão em 590 nm, acertando o zero com água destilada. A cor é estável por 120 minutos.

Cálculo Absorbância do teste – Absorbância do controle Fosfatase ácida (U/L) =

Absorbância do padrão

x3

Fonte: Motta, V. T., Bioquímica clínca para o laboratório – Princípios e Interpretações. 5ed. Rio de Janeiro: Medbook, 2009. Soares, J. L. M. F. et al, Métodos Diagnósticos – Consulta Rápida. Porto Alegre: Artmed, 2002. Xavier, R. M. et al, Laboratório na Prática Clínica – Consulta Rápida. Porto Alegre: Artmed, 2005. Bula Kit Labtest para Fosfatase Ácida...