Bioquimica - Reacción xantoproteica Reacción de ninhidrina Reacción de Biuret Reacción de PDF

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Reacción xantoproteica
Reacción de ninhidrina
Reacción de Biuret
Reacción de Million
Desnaturalización...

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Introducción Se pueden definir como polímeros formados por la unión, mediante enlaces peptídicos, de unidades de menor masa molecular llamadas aminoácidos. Son moléculas muy complejas. Su masa molecular es muy elevada, normalmente está comprendida entre 6000 da y 10 6 da, son macromoléculas. Algunas proteínas están constituidas por la unión de varios polímeros proteicos que en ocasiones pueden también contener otras moléculas orgánicas (lípidos, glúcidos, etc). En este último caso reciben el nombre genérico de prótidos. Las proteínas son las moléculas orgánicas más abundantes en las células, más del 50% del peso seco de la célula son proteínas. Están constituidas, fundamentalmente, por C, H, O y N y casi todas tienen también azufre. Algunas tienen, además, otros elementos químicos y en particular: P, Fe, Zn o Cu. El elemento más característico de las proteínas es el nitrógeno. Son los compuestos nitrogenados por excelencia de los seres vivos. Las proteínas son moléculas específicas que marcan la individualidad de cada ser vivo. [ CITATION Moh051 \l 2058 ] Las proteínas dan reacciones de color con algunos reactivos. Estos colores no son específicos de las mismas sino de algunos aminoácidos que las constituyen. Las proteínas forman precipitados con sales de metales pesados, así como algunos ácidos inorgánicos y con algunos colorantes; lo anterior se debe en parte a la formación de complejos y en parte a las propiedades coloidales de las mismas. Las proteínas son sustancias anfotericas, combinándose tanto con ácidos como con bases dando como resultado sales ionizables. Generalmente insolubles en su punto isoeléctrico y algunas son coagulables por el calor, ácidos inorgánicos y alcohol etílico. Las reacciones para la identificación de las proteínas se dividen en dos grandes grupos;, 1.- Reacciones de coloración 2.- Reacciones de precipitación Las reacciones de coloración son las siguientes Reacción xantoproteica Es un método que se puede utilizar para determinar la presencia de proteínas solubles en una solución, empleando ácido nítrico concentrado. La prueba da resultado positivo en aquellas proteínas con aminoácidos portadores de grupos aromáticos, especialmente en presencia de tirosina. Si una vez realizada la prueba se neutraliza con un álcali, se torna color amarillo oscuro. La reacción xantoproteica se puede considerar como una sustitución electrofílica aromática de los residuos de tirosina de las proteínas por el ácido nítrico dando un compuesto coloreado amarillo a pH ácido. Según las guías químicas es una reacción cualitativa, mas no cuantitativa. Por ende determina la presencia o no de proteínas. Para cuantificar se usa otra reacción, como la de Biuret, y se hace un análisis espectro fotométrico.

Reacción de Million Es específica para el grupo fenólico por lo tanto, la dan positiva todas las sustancias que poseen esta función, como la Tirosina y todas las proteínas que contengan Tirosina. El primer paso de la reacción de Million consiste en la nitración del anillo fenólico de la Tirosina, por el ácido Nítrico del reactivo. La Tirosina nitrada forma complejos con los iones Mercurioso Hg(I) y Mercúrico Hg(II) del reactivo produciendo un precipitado rojo o una solución roja, ambos resultados positivos. Reacción de Biuret Es aquel que detecta la presencia de proteínas, péptidos cortos y otros compuestos con dos o más enlaces peptídicos en sustancias de composición desconocida. Está hecho de hidróxido potásico (KOH) y sulfato cúprico, junto con tartrato de sodio y potasio. El reactivo, de color azul, cambia a violeta en presencia de proteínas, y vira a rosa cuando se combina con polipéptidos de cadena corta. El hidróxido de potasio no participa en la reacción, pero proporciona el medio alcalino necesario para que tenga lugar. Se usa normalmente en el ensayo de Biuret, un método colorimétrico que permite determinar la concentración de proteínas de una muestra mediante espectroscopia ultravioleta visible a una longitud de onda de 560 nm (para detectar el ion Cu2+ [ CITATION bio01 \l 2058 ] Reacción de ninhidrina La ninhidrina es un poderoso agente y reactivo común para visualizar las bandas de separación de aminoácidos por cromatografía o electroforesis, también es utilizada con fines cuantitativos para la determinación de aminoácidos. Reacciona con todos los aminoácidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8, dando una coloración que varía de azul a violeta intenso. Este producto colorido (llamado púrpura de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la coloración producida por la ninhidrina es independiente de la coloración original del aminoácido Esta prueba es positiva tanto para proteínas como para aminoácidos. En aquellos casos donde no da positiva la prueba de biuret y da positiva la de ninhidrina, indica que no hay proteínas, pero si hay aminoácidos libres.

Desnaturalización: Se le da este nombre a todo proceso sin rotura o formación de iones químicos (hidrólisis, reducción etc) determina una modificación en las propiedades de una proteína nativa. Se considera un proceso muy complejo que proviene de modificaciones físicas, altera principalmente la estructura espacial de la proteína. Los agentes desnaturalizantes son: calor, ácidos, álcalis, alcohol, agitación e irradiación con luz ultra violeta o rayos x etc.[ CITATION Moh051 \l 2058 ]...