Cultivo de protozoarios PDF

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métodos de cultivos realizados para reproducción e identificación de protozoarios...

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Universidad Autónoma de Tamaulipas

Unidad Académica Multidisciplinaria Reynosa-Aztlán

Laboratorio de Parasitología Clínica

Investigación: Cultivos de protozoarios

QFB Ramsés Orlando Lara Medina

Alumno: Gabino Guadalupe Ruiz Ruiz

7° “D” QFB

21/10/2018 cd. Reynosa, Tamps, México

Fundamento Un medio de cultivo es cualquier sustancia que puede ser usada para el cultivo de microorganismos, puede ser llamada un medio o, dicho con mayor precisión un medio de cultivo. Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los microorganismos. La diversidad metabólica de estos es tan grande que la variedad de medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal adecuado para todos ellos, ni siquiera refiriéndonos a las bacterias con exclusividad. Utilidad •

Los medios de cultivo son una mezcla de nutrientes que, en concentraciones adecuadas y en condiciones físicas óptimas, permiten el crecimiento de los microorganismos.

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Generales: Sirven para el cultivo de una gran variedad de microorganismos.

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Selectivos: Son medios a los que se les agregan sustancias para inhibir el crecimiento de otros microorganismos

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Medios diferenciales: Son aquellos destinados a facilitar la discriminación de microorganismos de una mezcla por sus propiedades diferenciales de crecimiento en dichos medios.

Cultivos para protozoarios NNN para protozoarios hemoflagelados Es un medio de cultivo usado para cultivar Leishmania , necesario cuando los amastigotes no se encuentran al raspar. Consiste en un 0,6% de cloruro de sodio (NaCl) agregado a una pendiente de agar de sangre simple . NNN también se puede usar para cultivar Trypanosoma cruzi . El medio de cultivo se fabrica con agar y sangre de conejo. La muestra que se siembra se obtiene de un aspirado del borde activo de la lesión o de un fragmento de biopsia que se macera. La muestra se deposita en el medio de cultivo y se incuba a 26 °C. se revisa cada semana al microscopio de luz en busca de promastigotes. Los cultivos se mantienen antes de descartarlos como negativos.

Medio TSTB Cuatro gramos de agar base sangre fueron disueltos en 100 ml de agua destilada y esterilizada en autoclave a 121 °C de temperatura y 1 atmósfera de presión durante 15 minutos, posteriormente el medio estéril fue enfriado en baño maría a 50 °C. En el interior de una campana de flujo laminar vertical de bioseguridad clase II. Se añadió 15 ml de sangre de conejo desfibrinada al medio de cultivo y 1 ml de una mezcla de antibióticos (penicilina G sódica 3.000 UI y Sulfato de estreptomicina 3.000 ug). Dos a 2,5 ml de la mezcla así preparada fue distribuida en tubos de 10 ml con tapa rosca y se dejó enfriar en soportes con un ángulo de 25°. El medio así preparado se conservó hasta el momento de utilizar en un refrigerador a 4 °C, por no más de 15 días. Dos tubos fueron colocados en una incubadora a 37° C para control de esterilidad. 3 tubos fueron inoculados con promastigotes de Leishmania como control de calidad de los medios de cultivo. Medio Chalkley Funciona muy bien, usar agua destilada o pasteurizada con granos de trigo o arroz según sean los organismos que cultivar (ciliados y flagelados en el primer caso y el arroz para las amibas, como se menciono anteriormente), para protozoos enquistados: hervir paja de agua destilada o pasteurizada por 5 a 10 min. Dejar enfriar a temperatura ambiente, añadir una cantidad pequeña de la muestra y después de 24 hrs. Observar el crecimiento. Los protozoos del suelo y alrededor de las plantas se recogen con sifón o una pipeta gigante con una perilla de goma, una pipeta graduada de 25 0 50 ml de capacidad. Un aparato para enemas- comprado en la farmacia. Se pueden dejar sustratos artificiales susceptibles de ser colonizados.

Bibliografía •

José Rodrigo Carral Domínguez, medios de cultivos de protozoos de vida libre,_www.clubensayos.com/temas-variados/medios-de-cultivo-deprotozoos/3609236.html, 27 de septiembre de 2016.

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Hernán Bermúdez, Marco Solano, Diagnóstico de leishmaniasis utilizando medio de cultivo tstb en pacientes de tropico de cochabamba, médico lab. Parasitología_labimed_cumetrop,_iibismed,_gac_med_bol v.28 n.2 cochab amba 2005

• Unidad 4. Estudio microscópico y cultivo de hongos, algas y protozoarios Práctica 10. Técnicas de siembra y cultivo de algas y protozoarios, departamento de la UNAM, ME1515 – 2012/2...