Identificación carbohidratos, prueba de Lugol y Benedict PDF

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Practica para la identificación de carbohidratos. Alumnos FES Zaragoza....

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Universidad Nacional Autónoma de México Facultad de Estudios Superiores Zaragoza

Laboratorio de bioquímica Celular y de los Tejidos I

Carbohidratos 1401

Equipo 2 • Rebollo Patiño Estefany Lizbeth • Villa Montes Sofia • Yepez Leal Alison

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OBJETIVOS • Analizar la importancia biológica de los carbohidratos de reserva. • Extraer polisacáridos de muestras diferentes. • Identificar a éstos con la prueba de Lugol y Benedict, antes y después de su hidrólisis.

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Diagrama de Flujo

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RESULTADOS

• Prueba de yodo en una rebanada de papa

¿Por qué se observa esa coloración? ¿Por qué hay diferencia entre la coloración de almidón y el arroz si ambos alimentos contienen almidón? La prueba del yodo es una reacción química usada para determinar la presencia o alteración de almidón u otros polisacáridos. Una solución de yodo - diyodo disuelto en una solución acuosa de yoduro de potasio - donde los iones I3- se sitúan dentro de la macromolécula de almidón cocido (estrictamente de la amilosa) produciendo un efecto óptico de color azul (con solución de Lugol diluida) pasando por púrpura profundo hasta llegar al negro en soluciones concentradas.(1) Esta reacción es el resultado de la formación de cadenas de poliyoduro a partir de la reacción del almidón con el yodo presente en la solución de un reactivo llamado Lugol. La amilosa, el componente del almidón de cadena lineal, forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro. En el arroz la concentración del almidón es mayor, por ello se observa el ligero cambio en la coloración debido a que a mayor concentración de almidón el color se vuelve más intenso. (1)

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• Prueba del Lugol Tabla 1. Resultados obtenidos y su explicación al aplicar la prueba del Lugol al almidón y glucógeno antes de su hidrólisis.

Cuestionamiento

Almidón

Glucógeno

Positiva

Positiva

En el almidón se observó un color azul negruzco mientras que en el glucógeno fue un café rojizo. Interpretación

¿Qué detecta la prueba?

La presencia de polisacáridos que son carbohidratos complejos formados por un gran número de azúcares simples, los cuales se unen entre sí mediante los enlaces glucosídicos. (2)

¿Qué estructura 3El yodo se introduce entre las espiras de las hélices de dimensional del CHO interacciona y como con el la molécula de la amilosa o amilopectina (3) lugol ?

¿Qué diferencia estructural a nivel de ramificación del CHO explica la diferente coloración obtenida para glucógeno y almidón?

En el almidón las moléculas yodo se unen a la amilosa cuya estructura es lineal y con enlaces 1-4, tomando un color azul-negruzco Mientras que en el glucógeno el yodo se une a la estructura con enlaces 1-4 y ramificaciones 1-6 (estructura de la amilopectina pero más ramificada) pero en este caso las moléculas de yodo no se unen a sus hélices debido a que son más cortas reteniendo menos el yodo produciendo un color café-rojizo (4)

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Tabla 2. Resultados obtenidos y su explicación al aplicar la prueba del Lugol al almidón y glucógeno después de su hidrólisis Cuestionamiento

Almidón

Glucógeno

Negativa

Negativa

En el almidón se observó un color café claro y en el glucógeno también, pero con un poco de residuos más oscuros. Interpretación Al ser hidrolizado el glucógeno ¿Qué sucede estructuralmente que explica el cambio en la reacción?

Se rompen los enlaces, dejando los monosacáridos (glucosas) libres para ser utilizadas, al romperse el polisacárido la prueba de Lugol da negativa ya que no hay polisacárido que identificar.

• Prueba de Benedict Tabla 3. Resultados obtenidos y su explicación al aplicar la prueba de Benedict al almidón y glucógeno antes de su hidrólisis Explicación

Almidón

Glucógeno

Negativa

Negativa

Como se puede observar en las imágenes 4 y 5 se observó una coloración azul al llevar a cabo esta prueba.

Interpretación

¿Qué detecta la prueba?

Esta prueba detecta a monosacáridos y algunos disacáridos reductores, es decir, que tiene un carbono anomérico libre. (5)

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¿Qué carbono del CHO no se encuentra libre para reaccionar con el Cu2+? ¿En qué otro enlace está participando ese carbono?

El carbono 1 de cada monosacárido (glucosas)

Los monómeros de estos polisacáridos (glucosas) están unidos por un enlace glucosídico α(1-4), es decir, los carbonos 1 participan en este tipo de enlaces

Tabla 4. Resultados obtenidos y su explicación al aplicar la prueba de Benedict al almidón y glucógeno después de su hidrólisis Cuestionamiento

Almidón

Glucógeno

Positiva

Positiva

Como se observa en las imágenes 4 y 5 b al hidrolizar al almidón y el glucógeno y aplicarles la prueba de Benedict se observó un precipitado rojo ladrillo Interpretación Menciona que CHO´s se obtienen independientemente de qué tan efectiva sea la prueba Al hidrolizar el CHO qué grupo químico funcional se libera que ya puede reaccionar con el Cu2+ (considera la estructura abierta) ¿De qué depende la tonalidad/resultado que se puede obtener en esta prueba?

Principalmente se pueden y esperan obtener glucosas, pero puede darse el caso de obtener también maltosas y oligosacáridos. (5) El grupo aldehído del carbono 1 se oxida en presencia del ión cúprico que contiene el reactivo de Benedict. Se esperan distintas observaciones (colores y tonos) dependiendo la cantidad o concentración de los azúcares reductores, y esto a su vez dependerá de la eficacia de la hidrólisis. (6)

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DISCUSIÓN El almidón es un polisacárido formado por amilosa y amilopectina, al realizar la prueba de yodo fue posible su identificación, pues la amilosa forma hélices donde se juntan las moléculas de yodo, formando un color azul oscuro a negro, como ya se mencionó previamente la intensidad del color depende directamente de la concentración de almidón, por lo tanto, al realizar la prueba con el arroz el color observado fue muy cercano al negro. La reacción de identificación de carbohidratos con el reactivo de Lugol resultó ser positiva para el almidón y glucógeno debido a que estos son polisacáridos, es decir son cadenas de monosacáridos unidos por enlaces O-glucosídicos en este caso glucosas, y aunque su estructura es diferente ya que en el caso del almidón está formado tanto por una estructura lineal con enlaces 1-4(amilosa) como por una ramificada con enlaces 1-4 y ramificaciones 1-6(amilopectina) y el glucógeno únicamente por estructuras ramificadas con enlaces 1-4 y ramificaciones 1-6 , que es la estructura de la amilopectina con la única diferencia que esta se encuentra más ramificada y por esta razón la coloración de ambos es diferente pero sigue siendo positiva Al Hidrolizar la muestra, los enlaces de los polisacáridos se rompen formando glucosas libres y de no ser eficiente esta hidrólisis también puede formar disacáridos u otros oligosacáridos, por lo tanto, la prueba de Lugol dará negativa ya que ya no existirá bajo esas condiciones el polisacárido

La prueba de Benedict es para la detección de azúcares reductores , los cuales son azúcares que tienen el grupo aldehído del carbono anomérico libre, por lo tanto al tener glucógeno y almidón, como se mencionó anteriormente en el experimento pasado se trata de dos polisacáridos formados de la unión de glucosas que para unirse se enlazan con el grupo aldehído , por lo tanto un polisacárido no puede ser un azúcar reductor dando la prueba de Benedict negativo, sin embargo al hidrolizar la muestra, estos enlaces se rompen dejando los grupos aldehído libres, dando como resultado azúcares reductores que la prueba de Benedict identifica dando positiva

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CONCLUSIÓN De acuerdo con los resultados obtenidos y a la discusión de estos, fue posible identificar principalmente la estructura y composición del almidón y del glucógeno como polisacáridos de reserva, así como las diferencias entre estos y su distinto comportamiento químico ante las pruebas para su identificación (Lugol y Benedict). Todo esto ayudándonos a cumplir con dos de los objetivos de la práctica: la extracción de estas biomoléculas de alguna muestra y la aplicación de estas pruebas necesarias para su estudio. Asimismo, el reconocimiento de lo anterior nos conduce a cumplir con otro de los objetivos el cual implica la comprensión y explicación de la importancia biológica de estos polisacáridos de reserva tanto en animales como en vegetales respectivamente, pues esta función depende tanto de su composición y estructura química, como de su reactividad ante ciertas sustancias.

REFERENCIAS 1. Química (1) [Internet]. Calameo.com. [citado el 9 de octubre de 2021].

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3. 4.

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6.

Disponible en: https://es.calameo.com/read/006241052d97a518b8797 AdminAgrovin. Polisacáridos: qué son y para qué sirven [Internet]. Agrovin.com. 2021 [cited 2021 Oct 9]. Available from: https://www.agrovin.com/polisacaridos-que-son-y-para-que-sirven/ Quimica (1) [Internet]. Calameo.com. [cited 2021 Oct 9]. Available from: https://es.calameo.com/read/006241052d97a518b8797 PRÁCTICA Identificación de polisacáridos con Lugol [Internet]. Aprendecontabella.com. [cited 2021 Oct 9]. Available from: https://www.aprendecontabella.com/courses/716474/lectures/15508625 Prof. Fernando Francisco Hernández Clemente. Sharenew 2021-1 Carbohidratos [Internet] Classroom, México [citado 09 de octubre 2021]. Disponible en: https://classroom.google.com/u/1/w/NTUxMzczNzQ1MTRa/t/all BIOFORO. Prueba de Benedict para carbohidratos simples (monosacáridos) [Internet] México, [citado el 09 de octubre 2021] Disponible en http://biocoments.blogspot.com/2015/04/prueba-de-benedict-ycarbohidratos.html

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