Laboratorio de hematología - Algunos de Reporte de FSP PDF

Preview

Summary

Un gran material; espero le puedan sacar el máximo provecho

Este material es de las profesoras del curso y lo comparto con el objetivo de que el conocimiento sea de utilidad para otras personas; muchas gracias por sus enseñanzas y apoyo profesoras...

Description

desde la circulación periférica hacia los tejidos. Destrucción a nivel periférico. Combinación de alguna de las anteriores. La linfopenia puede ser de origen congénito o adquirido. Dentro de las adquiridas están diferentes tipos de infecciones de origen viral, secundaria al consumo de algunos medicamentos, en enfermedades autoinmunes y en algunos tipos de leucemias.80 5. FROTIS DE SANGRE PERIFÉRICA (FSP). Definición: Es el reporte de la morfología de las células sanguíneas glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas, que se realiza en un extendido de sangre teñido con alguno de los colorantes de Romanowsky. Fundamento científico: Es reflejo de un buen o mal funcionamiento de la médula ósea y de los diferentes factores que influyen en la presencia de células sanguíneas, en calidad y cantidad normales en el frotis de sangre periférica Fundamento técnico: A partir de un extendido de sangre coloreada con Wright se realiza la observación microscópica en 100X con el propósito de clasificar y cuantificar las alteraciones morfológicas de las células sanguíneas teniendo en cuenta sus características morfológicas y tintoriales. Método Materiales y equipos: Lancetas desechables Algodón y alcohol Láminas portaobjeto limpias y desengrasadas Laminillas 22 X 22 ó 22 X 30 Capilares sin heparina Gradilla de coloración. Colorante de Wright. Líquido de contraste (Buffer Giordano, líquido tampón de fosfato de pH 7.2, agua destilada ó agua del chorro), Cronómetro. Toalla de papel húmeda Aceite de inmersión Microscopio 80 López Rubio, M. De Miguel Llorente, D. García Suárez, J. Burgaleta Alonso de Ozalla, C. Alteraciones de los leucocitos. Medicine 2001; 8 (52): 2735-2742.

81

Piano contador de células Medidas de bioseguridad: tenga en cuenta que las láminas defectuosas deben descartarse como material cortante. El transporte de láminas para coloración y posterior observación se debe realizar en las bandejas destinadas para este fin. Recolecte los residuos de la coloración en el recipiente adecuado. Las láminas leídas se deben guardar un mínimo de seis meses en cajas porta láminas. Posteriormente se descartan como material cortante. Muestra: Sangre capilar que se extiende en forma inmediata sobre la lámina portaobjetos. No obstante, si el paciente tiene en forma simultánea un hemograma se puede realizar el FSP a partir de sangre total anticoagulada con EDTA siempre y cuando no pasen más de 15 minutos de haber sido tomada la muestra, es ideal que se haga en el sitio de toma de muestras inmediatamente después de su recolección Condiciones preanalíticas: Cualquier situación de ansiedad provocada en momentos previos o durante la toma de muestras va a generar alteraciones en distribución porcentual de los leucocitos, dado que estas situaciones provocan una mayor secreción de adrenalina la cual modifica las expresión de receptores y moléculas de adhesión que trae como consecuencia un aumento celular a expensas especialmente de neutrófilos de la reserva marginal. Por lo tanto, es necesario que el paciente esté tranquilo en el momento de tomar la muestra y que no haya realizado ejercicio fuerte. Control analítico: Diferentes casas comerciales envían láminas coloreadas o fotos para controlar la exactitud en el informe de la morfología celular. Recuerde que las láminas leídas se deben guardar un mínimo de seis meses, esta es la única prueba que puede confirmar un resultado. Procedimiento: Realice el extendido y coloréelo con el colorante de Wright teniendo en cuenta las recomendaciones realizada para el RDL. Una vez realizado el extendido y la coloración coloque una gota de aceite de inmersión unos milímetros arriba de la cola del extendido. Utilizando el objetivo 10X ubique un campo donde los glóbulos rojos apenas se toquen entre sí, cuente el número de glóbulos blancos y haga su apreciación en un promedio mínimo de 3 campos si están entre 15 y 35 reporte los glóbulos blancos como normales en número o aumentados o disminuidos si es mayor o menor el número encontrado en el promedio. Pase al objetivo de 100X y en estos mismos campos proceda a observar la morfología de glóbulos rojos, blancos y plaquetas en un mínimo de diez campos, 82

valla tomando nota de las anormalidades que va encontrando para poder sacar los promedios posteriormente. Morfología de glóbulos rojos: Los glóbulos rojos que no presentan anormalidades se informan como NORMALES EN MORFOLOGIA. La clasificación de las anormalidades de los eritrocitos se puede observar en la tabla 15. Tabla 15. Anormalidades de los eritrocitos Tipo de anormalidad Nombre que recibe Tamaño Anisocitosis Forma Poiquilocitosis Inclusiones Inclusiones eritrocitarias Contenido de hemoglobina Hipocromía Policromatofilia Madurez Normoblastos Rouleaux Distribución Aglutinación El término anisocitosis implica presencia de células de diferente tamaño. Para evaluarla se compara su tamaño con el de una célula de tamaño estable como un linfocito pequeño que tiene un tamaño de 7 al igual que el eritrocito normal. Para valorarla se tiene en cuenta el número de éstas en el promedio de diez campos y se reporta acorde con la valoración de la tabla 16. Tabla 16. Valoración de la anisocitosis Normal Ligera Moderada Marcada 0-5 6 - 15 16 - 30 Mayor 30 Es necesario aclarar si la prevalencia es de células micro o macrocíticas. La microcitosis y macrocitosis se informan por cruces o como ligera, moderada o marcada dependiendo la cantidad de cada uno en un promedio de 10 campos y teniendo en cuenta los parámetros de la tabla 17. Tabla 17. Valoración de la micro y macrocitosis Numero

Imagen

Ligera (+)

83

Moderada (++)

Marcada (+++)

Normal hasta 5

6 - 15

16 - 30

Mayor 30

Se habla de poiquilocitosis cuando hay variaciones en la forma de los eritrocitos. Se informa como ligera, moderada o marcada acorde con la valoración de la tabla y se aclara con presencia de qué tipo de formas está dada y en que intensidad cada una en el promedio de 10 campos. Tabla 18. Valoración de la poiquilocitosis Ligera Moderada Marcada Numero (+) (++) (+++) normal 0 – 5 6 - 15 16 - 30 Mayor 30 Ej.: Moderada poiquilocitosis con presencia de codocitos ++, eliptocitos + y leptocitos +. Tabla 19. Informe de células poiquilocíticas NOMBRE

IMAGEN

INFORME

DESCRIPCIÓN

Normal

Ligera (+)

Moderad a (++)

Marcada (+++)

Acantocitos

Célula espinosa o espicular, esferoidales y exhiben múltiples proyecciones

0

1-5

6-15

Mayor de 15

Anulocitos

Células muy delgadas, de forma irregular, sobre la membrana celular se observa una pequeña cantidad de Hb .

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Codocitos

Células hipocrómicas con una distribución en diana de la hemoglobina

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Dacriocitos

Células de cola o periforme

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Drepanocitos

Célula delgada, elongado fusiforme. Curvada en forma de hoz

0

1-5

6-15

Mayor de 15

84

Tabla 19. Informe de células poiquilocíticas NOMBRE

IMAGEN

INFORME

DESCRIPCIÓN

Normal

Ligera (+)

Moderad a (++)

Marcada (+++)

Esferocitos

Células que han perdido la forma biconcava, no se observa centro claro.

0

1-5

6-15

Mayor de 15

Eliptócitos

Forma elíptica

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Esquistocitos

Son células que han sufrido procesos de fragmentación

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Estomátocitos

Disco uniconcavo posee zona de palidez central parecida a una hendidura

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Equinocitos

Células crenadas. Por lo general obedecen a errores técnicos

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Excentrocitos

Eritrocito con la hemoglobina desplazada hacia uno de sus extremos.

0

1-5

6-15

Mayor de 15

Leptocitos

Células muy delgadas planas y anchas con diámetros hasta 10-11u

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Ovalocitos

Forma oval y de mayor tamaño.

1

2-5

6-15

Mayor de 15

Se consideran los glóbulos rojos hipocrómicos, cuando su contenido de hemoglobina es inferior al normal. La carencia de hemoglobina severa o marcada por lo general trae como consecuencia que los glóbulos se deformen produciendo formas anormales y carentes de hemoglobina como los codocitos, anulocitos y leptocitos entre otros. Para evaluar la hipocromía se deben contar diez campos, se saca el promedio y se valora acorde con los rangos de la tabla 20. 85

Normal

Tabla 20. Valoración de la hipocromía Imagen Ligera Moderada Marcada (+) (++) (+++)

0–5

6 - 15

16 - 30

Mayor 30

La policromatofilia se detecta por la presencia de eritrocitos de color violeta. Un aumento en la policromatofilia es reflejo de una médula ósea en stress que está respondiendo a la hipoxia generada por la no disposición de oxigeno en los tejidos, por lo tanto su aumento se asocia con respuesta medular eficiente. La intensidad de la policromatofilia se relaciona directamente con el porcentaje de reticulocitos revelados con la coloración supravital. Estos glóbulos rojos policromáticos del stress tienen un tamaño superior a los policromáticos de respuesta medular normal. Para informar la policromatofilia se deben contar diez campos, sacar un promedio y valorarla acorde con los valores de la tabla 21.

Numero Normal 0 – 1.5

Tabla 21. Valoración de la policromatofilia Imagen Ligera Moderada Marcada (+) (++) (+++) 1.6-2.5

2.6-3,5

Mayor de 3,6

Si la respuesta medular es acelerada además de la policromatofilia se podrían observar en periferia normoblastos. Se reportan sin importar el estado de maduración, su informe se realiza en % en 100 células blancas contadas. Las inclusiones eritrocitarias se pueden observar como resultado de un proceso de maduración anormal de los eritrocitos o por otras causas relacionadas con alteraciones en la síntesis de la hemoglobina. Punteado basófilo: Corresponde a una acumulación de gránulos basófilos que se tiñen con el azul de metileno de los colorantes de Romanowsky. Están compuestos de agregados ribosómicos. Estos gránulos muestran variación de tamaño y número. 86

El punteado basófilo fino se observa generalmente en trastornos caracterizados por la alteración en la biosíntesis de la hemoglobina, como en los síndromes diseritropoyéticos, hemoglobinopatias. El punteado basófilo grueso se observa en procesos tóxicos como en intoxicaciones por plomo, no obstante cualquiera de los dos fino o grueso se puede encontrar indiscriminadamente en cualquiera de los casos mencionados. Cuerpos de Howell-Jolly: Aparecen como inclusiones esféricas y excéntricas de tamaño entre 1 y 2 . No es común encontrar más de una inclusión en cada glóbulo, su hallazgo es típico de procesos diseritropoyéticos. Son basófilos y se tiñen intensamente con las coloraciones de Romanowsky. Están compuestos por cromatina nuclear picnótica. Anillos de Cabot: Constituyen unas finas fibras basófilas que se tiñen con el azul de metileno de las coloraciones de Romanowsky y que algunas veces se disponen concéntricamente a la membrana eritrocitaria otras aparecen con forma de ―ocho‖. El anillo por lo general se encuentra asociado a otras inclusiones como el punteado basófilo. No existe un acuerdo definitivo sobre los mecanismos por los cuales se induce la formación de estos. Cuerpos de Pappenheimer: Son inclusiones intraeritrocitarias que contienen gránulos de hierro en asociación con mitocondrias y restos ribosomales. Con los colorantes de Romanowsky se observan como inclusiones basófilas redondeadas de tamaño regular, por lo general asociadas en grupos de dos, cuatro y pequeños agregados que tienden a ubicarse hacia la periferia de la célula. Son indicativos de alteraciones en la eritropoyesis, especialmente la observada en las anemias sideroblásticas, talasemias, alcoholismo grave y otros procesos diseritropoyéticos. Lo podemos observar también en los síndromes postesplenectomía. Las inclusiones eritrocitarias deben ser informadas individualmente por cruces y valoradas acorde con la tabla 22. Inclusión

Tabla 22. Valoración de las inclusiones eritrocitarias Imagen Normal + ++

Cuerpos de Howell-jolly

0

87

1-2

3-5

+++

Mayor de 6

Cuerpos de Pappenheimer

0

1-2

3-5

Mayor de 6

Punteado basófilo

0

1-2

3-5

Mayor de 6

Anillos de Cabot

0

1-2

3-5

Mayor de 6

Parásitos intracelulares: En nuestro medio hablamos específicamente de Plasmodium vivax y falcíparum. Los esquizontes maduros se registran en el histograma de glóbulos blancos y pueden afectar tanto el recuento total como el diferencial y el recuento de plaquetas en caso de encontrarse aumentados. Las formas de trofozoito no se registran dado su tamaño. Se informan como positivo en lo posible dejando explícita la especie del plasmodium. Se puede informar la parasitemia en % por 100 glóbulos blancos contados. Fenómeno de rouleaux El fenómeno de rouleaux ó pilas de monedas se observa frecuentemente en hiperproteinemias como en el caso del Mieloma múltiple y en macroglobulinemias; igualmente se puede observar en enfermedades inflamatorias crónicas y como un artefacto en las partes gruesas del extendido sanguíneo. Por lo anterior le recordamos realizar su observación cuidadosamente en los campos recomendados anteriormente y valorarlo acorde con la tabla 23. Tabla 23. Valoración del fenómeno de rouleaux 88

Numero

Imagen

Normal

Ligera (+)

Moderada (++)

Marcada (+++)

0

1-5

6-15

Mayor 15

Intensidad

La autoaglutinación es provocada por autoanticuerpos tipo crioaglutininas se detecta desde el momento de realizar el extendido, ya que presenta algún grado de dificultad al extender la sangre y en los bordes hay evidencia clara de aglutinación. En el FSP se observa la aglutinación a lo largo de todo el extendido y hace muy difícil realizar la observación de las células. Se informa como paciente autoaglutinando sin tener en cuenta la intensidad. Morfología de leucocitos: Hay tres datos importantes para informar de los leucocitos en un FSP: cuantos (número), de cuales (recuento diferencial) y como son (forma). Como mencionamos, lo primero que hacemos es valorar con objetivo 10X, en tres a cinco campos donde los glóbulos rojos apenas de toquen entre sí, aproximadamente 3 mm arriba de la cola del extendido, se obtiene un promedio de los campos contados el cual debe estar entre 15 y 35 células nucleadas para decir que los leucocitos están normales en número, por el contrario si está menor o mayor los mencionamos como disminuidos o como aumentados. Respecto a la forma de los leucocitos, a medida que realiza el recuento diferencial observe la forma de las células encontradas y anote cualquier tipo de alteración. Dentro de las principales anormalidades tenemos: Fenómeno de Pelger-Huet o Pseudo Pelguer-Huet: En este caso los PMN han tenido un proceso de maduración anormal o displásico, las células se presentan con hiposegmentación. Pueden observarse con 1 ó 2 lóbulos, cuando son dos lóbulos se considera que el uno es imagen especular del otro, se caracteriza como la expresión heterocigótica del fenómeno. La no lobulación obedece a la expresión homocigótica. Hablamos de Pelger cuando todos los PMN son hiposegmentados y de pseudo Pelger cuando los observamos mezclados con otros que presentan lobulación normal. Puede encontrarse en forma congénita o adquirida y en este caso se considera indicador de displasia mieloide y en algunos casos se ha encontrado como precursor de un proceso mieloide agudo. Es muy importante tener en cuenta esta 89

anormalidad ya que se puede prestar a confusión con células inmaduras como metamielocitos y bandas, ayuda a definir la anormalidad, el que la cromatina de todas las células es más condensada de lo normal y la relación núcleo-citoplasma está perdida y no corresponde a la de una célula inmadura. Los macropolicitos son PMN hipersegmentados y de mayor tamaño. Los macropolicitos obedecen a un proceso megaloblástico. Hipersegmentación de PMN: Cuando los neutrófilos con normal tamaño presenten más de cinco lóbulos o cuando el total de la población tiene más de cuatro lóbulos, eosinófilos y basófilos con más de dos lobulaciones se consideran como hipersegmentados. Granulaciones tóxicas, vacuolas tóxicas y cuerpos de Dohle: Las granulaciones tóxicas de los PMN son gránulos hipertrofiados que le dan un aspecto hipergranular a los citoplasmas especialmente de los neutrófilos. Las vacuolas tóxicas se encuentran en neutrófilos y monocitos entre otras y se observan como espacios redondeados y no coloreados en los citoplasmas. Los cuerpos de Dohle no son exclusivos de PMN, igualmente se pueden encontrar en los citoplasmas de los monocitos, se observan como inclusiones redondeadas basófilas que se depositan en la periferia de las células, por lo tanto es más factible observarlos en el citoplasma de los neutrófilos que es acidófilo, en los citoplasmas basófilos de los eosinófilos y los monocitos pueden pasar desapercibidas. La presencia de estas inclusiones indica hiperactividad celular. Se encuentran en condiciones tóxicas y en infecciones severas como en caso de septicemia, neumonía, quemaduras y exposiciones a drogas citotóxicas. Neutrófilos hipogranulares y agranulares: Se observan cuando hay un proceso de maduración anormal o displasia granulocítica. Anomalía de Alder-Reilly: es una característica autosómica recesiva que se manifiesta en los leucocitos con la presencia de gránulos azurófilos agrupados en racimos comúnmente se observa en granulocitos, monocitos y linfocitos, en neutrófilos se podrían confundir con granulaciones tóxicas, sin embargo la existencias en otras células diferentes de PMN y la ausencia de vacuolas tóxicas y de cuerpos de Dohle ayudan a hacer la diferenciación. Esta anomalía se ha asociado con el síndrome de Hunter, síndrome de Hurler (Gargolismo), y el enanismo polidistrófico; todas estas asociadas con un desorden de los mucopolisacáridos caracterizado por opacidad de la cornea, defectos en el crecimiento, silla turca en forma de zapato, deformidad de la columna vertebral y muerte en la primera década de la vida. Anomalía de May-Heglin: Es un rasgo autosómico dominante raro, asociado con hemorragias leves, macroplaquetas con escasos gránulos y trombocitopenia. Se 90

caracteriza por la aparición en PMN de unos cuerpos de inclusión muy similares a los cuerpos de Dohle; se observan coloreados de azul pálido, con la diferencia que por lo general no están hacia la periferia de la célula sino distribuidos indistintamente en el citoplasma, están constituidos por RNA derivado del retículo endoplásmico, son peroxidasa y PAS negativos. Anomalía de Chediak-Higashi: Es un desorden autosómico raro que se caracteriza por la presencia de PMN carentes de gránulos azurófilos primarios, en su lugar se forman gránulos pleomórficos anormales y no funcionales ...