Práctica 14 - Partes y uso del microscopio. PDF

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Partes y uso del microscopio....

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Práctica 14. Par artes tes y uso del microscopio. INTRODUCCION. La historia del microscopio se remonta desde los años 1590, dónde el holandés Zacharias Janssen es reconocido cómo el creador del telescopio compuesto, al convivir en una familia relacionada con la óptica, fue capaz de incorporar varias lentes en un tubo. Más adelante Galileo le añadiría una lente cóncava y otra convexa, lo que lo impulsaría más adelante a la investigación con telescopios. No sería hasta 1625 cuando el médico alemán Giovanni Faber acuñaría el término de microscopio. Por último entre los años de 1665 y 1676 los científicos Robert Hooke y Antoine van Leeuwenhoek difundirían la creación del microscopio, por una parte difundiendo dibujos a través de obras conocidas dónde hacía aparición el instrumento y por otra las investigaciones que se realizaron sobre los organismos unicelulares. Existen diversos tipos de microscopios, que van desde los simples hasta los compuestos, pero el más común a la hora de estudiar fenómenos biológicos es el segundo, también conocido como de imagen virtual, el cual en resumidas cuentas es un sistema de lentes que cumplen la función de aumentar la imagen de un objeto. Se dice que la imagen es virtual puesto que la imagen se obtiene por la transmisión de los rayos provenientes de una fuente luminosa a través del objeto. Los rayos luminosos atraviesan el diafragma, que a manera de iris delimita el diámetro de la proyección que penetra por el condensador que está formado por lentes que concentran la luz sobre el objeto, el objeto recoge la luz y su figura es proyectaba de manera virtual, ampliada e invertida. Es importante saber las partes que componen a un microscopio y los sistemas que lo integran, pues es elemental tener un buen manejo de las partes para darle un mejor uso, de no ser así puede que los resultados vistos a través de este no sean los esperados y nos brinden datos erróneos. Los malos resultados en la observación se pueden deber por: La mala iluminación proporcionada, un condensador bajo, que el diafragma se encuentre muy cerrado a la hora de la observación, el enfoque que se le está dando al objeto en cuestión, que alguna de las partes se encuentre sucia, especialmente el

lente, que los movimientos que realice el tubo sean muy rápidos, entre otras cosas más. El uso del microscopio comenzó como entretenimiento y terminó siendo un factor clave y básico para la ciencia y la medicina, nos brindó un campo de visión mucho más amplio, y gracias a él pudimos estudiar los niveles de organización de la vida cómo la conocemos hoy en día, desde átomos, moléculas, virus, microrganismos etcétera. La función básica del microscopio ha sido la misma con el pasar del tiempo, brindarnos una imagen más amplia de los objetos a estudiar, sin embargo con el paso del tiempo las imágenes cada vez se obtienen en mejor resolución y nos permiten que el estudio de organismos sea mucho más fácil. Algunos de los descubrimientos más impresionantes gracias a la ayuda del microscopio son la división celular, el ciclo de Krebs, la Neurotransmisión y la fotosíntesis y respiración celular. Existen muchos tipos de microscopios, por el momento, aprenderás a manejar el microscopio de imagen virtual (o compuesto). Debemos recordar que el microscopio es un instrumento muy delicado, que, gracias a un sistema óptico de lentes de cristal, amplifica la imagen de los objetos que no podemos apreciar debido a su tamaño tan pequeño. Este microscopio funciona gracias a 3 sistemas: óptico, mecánico, y de iluminación. El sistema óptico está formado por el objetivo y los oculares, el mecánico por el pie, brazo, tubo del ocular, platina, revólver, tornillo micrométrico, tornillo macro métrico y la charnela; el de iluminación por el espejo o lámpara, diafragma y el condensador. El microscopio es un aparato muy delicado y costoso, por lo que es preciso lo manejes con mucho cuidado.

PROPOSITO. Identificar, con ayuda de un esquema y un microscopio, cada una de las partes y sistemas que conforman el microscopio óptico compuesto para poder familiarizarse con su funcionamiento

MATERIAL.    

Práctica impresa 36 microscopios óptico compuesto Preparaciones de: Echeverría y lirio Esquema del Microscopio Fig. 1 ya elaborado

PROCEDIMIENTO 1. En principio se le explicará al alumno cómo se debe manejar un microscopio, cómo sostener lo, en qué posición de la mesa se coloca y cómo debe limpiarse. 2. En un esquema del microscopio (fig.1) señalar las siguientes partes: oculares, revólver, objetivos, tornillos macro métrico y micrométrico, pinzas, platina, condensador, diafragma, brazo, lámpara, pie o base, describiendo brevemente la función de cada una. 3. Las partes anteriores se deben agrupar con ayuda de un cuadro sinóptico en los siguientes sistemas: sistema óptico, sistema mecánico y sistema de iluminación, explicando la función integrada de cada uno. 4. Colorear con tres colores diferentes cada una de las partes que corresponde a cada uno de los sistemas (fig.1) Para empezar a familiarizarse con el manejo del microscopio se hará lo siguiente: a) Preparación de una muestra. Corta un pedazo de papel periódico o milimétrico de aproximadamente 1 cm2. Colócalo sobre un portaobjetos limpio y seco. Con ayuda del gotero pon un poco de agua sobre el papel, y cuando éste se humedezca, coloca el cubreobjetos sobre él, evitando que se formen burbujas. b) Observación en el microscopio. Coloca la muestra sobre la platina, asegurándola con las pinzas. Emplea primero el objetivo de 10x, seguido por el de 40x, y si es posible, por el de 100x. Con ayuda del tornillo macro métrico, baja el tubo o la platina (según sea el caso) hasta el tope. Mirando a través del ocular, ajusta la imagen, en el caso del papel periódico, busca la letra "e" hasta que se vea nítida. Para saber cuántas veces aumenta la imagen, pon la preparación del papel milimétrico o la regla, y observa cuánto abarca de la división más pequeña 1) mm 2) multiplica lo observado por el aumento del objetivo usado y después por el aumento del ocular (por ejemplo, supón que, al mirar por el ocular, se observa un solo cuadro, entonces será: 1 mm2 x 10 x 10 = 100, por tanto, tendremos una imagen aumentada cien veces). Dibuja tus observaciones. Manejo del microscopio:

1. Colocar el objetivo de menor aumento en posición de empleo y bajar la platina completamente. Si el microscopio se recogió correctamente en el uso anterior, ya debería estar en esas condiciones. 2. Colocar la preparación sobre la platina sujetándola con las pinzas metálicas. 3. Comenzar la observación con el objetivo de 4x (ya está en posición) o colocar el de 10 aumentos (10x) si la preparación es de algún tejido. Para realizar el enfoque: Acercar al máximo la lente del objetivo a la preparación, empleando el tornillo macro métrico. Esto debe hacerse mirando directamente y no a través del ocular, ya que se corre el riesgo de incrustar el objetivo en la preparación pudiéndose dañar alguno de ellos o ambos. Mirando, ahora sí, a través de los oculares, ir separando lentamente el objetivo de la preparación con el macro métrico y, cuando se observe algo nítido la muestra, girar el micrométrico hasta obtener un enfoque fino. Empleo del objetivo de inmersión: 1. Bajar totalmente la platina. 2. Subir totalmente el condensador para ver claramente el círculo de luz que nos indica la zona que se va a visualizar y donde habrá que echar el aceite. 3. Girar el revólver hacia el objetivo de inmersión dejándolo a medio camino entre éste y el de x40. 4. Terminar de girar suavemente el revólver hasta la posición del objetivo de inmersión. 5. Mirando directamente al objetivo, subir la platina lentamente hasta que la lente toca la gota de aceite. En ese momento se nota como si la gota ascendiera y se adosara a la lente. 6. Enfocar cuidadosamente con el micrométrico. La distancia de trabajo entre el objetivo de inmersión y la preparación es mínima, aun menor que con el de 40x por lo que el riesgo de accidente es muy grande. 7. Una vez se haya puesto aceite de inmersión sobre la preparación, ya no se puede volver a usar el objetivo 40x sobre esa zona, pues se mancharía de aceite. Por tanto, si desea enfocar otro campo, hay que bajar la platina y repetir la operación desde el paso 3. 8. Una vez finalizada la observación de la preparación se baja la platina y se coloca el objetivo de menor aumento girando el revólver.

9. En este momento ya se puede retirar la preparación de la platina. Nunca se debe retirar con el objetivo de inmersión en posición de observación. 10.Limpiar el objetivo de inmersión con cuidado empleando un papel especial para óptica. Comprobar también que el objetivo 40x está perfectamente limpio. Mantenimiento y precauciones a) Nunca hay que tocar las lentes con las manos. Si se ensucian, limpiarlas muy suavemente con un papel de filtro o, mejor, con un papel de óptica. b) No dejar el portaobjetos puesto sobre la platina si no se está utilizando el microscopio. c) No forzar nunca los tornillos giratorios del microscopio (macro métrico, micrométrico, platina, revólver y condensador). d) El cambio de objetivo se hace girando el revólver y dirigiendo siempre la mirada a la preparación para prevenir el roce de la lente con la muestra. No cambiar nunca de objetivo agarrándolo por el tubo del mismo ni hacerlo mientras se está observando a través del ocular. e) Después de utilizar el objetivo de inmersión, hay que limpiar el aceite que queda en el objetivo con pañuelos especiales para óptica o con papel de filtro (menos recomendable). En cualquier caso, se pasará el papel por la lente en un solo sentido y con suavidad. Si el aceite ha llegado a secarse y pegarse en el objetivo, hay que limpiarlo con una mezcla de alcohol-acetona (7:3) o xilol. No hay que abusar de este tipo de limpieza, porque si se aplican estos disolventes en exceso se pueden dañar las lentes y su sujeción. Mantener seca y limpia la platina del microscopio. Si se derrama sobre ella algún líquido, secarlo con un paño. Si se mancha de aceite, limpiarla con un paño humedecido en xilol. f) Es conveniente limpiar y revisar siempre los microscopios al finalizar la sesión práctica y, al acabar el curso, encargar a un técnico un ajuste y revisión general de los mismos. g) Para observar una muestra con el objetivo de inmersión, se coloca una gota de aceite de cedro encima de la lámina de la preparación antes de girar el revólver. Esto permite que la imagen se vea con nitidez para realizar la observación ya que este tipo de lentes requiere que el índice de refracción sea similar al del vidrio. h) Terminada la observación, girar el revólver para colocar el objetivo de menor aumento en la primera posición de trabajo.

i) Retirar la preparación y dejar limpio el microscopio, secando la platina con cuidado. j) Si usó el objetivo de inmersión, debe limpiarse inmediatamente después de su uso con ayuda del papel de lente. k) Quitar el grueso del aceite con una hoja, luego limpiar con una segunda impregnada en xileno o xilol y finalmente con una tercera, secar el lente. No usar cantidades excesivas de solvente pues puede disolver el cemento de los componentes de los lentes. l) Al finalizar el trabajo, hay que dejar puesto el objetivo de menor aumento en posición de observación, asegurarse de que la parte mecánica de la platina no sobresale del borde de la misma y dejarlo cubierto con su funda. m) Mantener cubierto o guardado el microscopio cuando no esté en uso. Cuando no se está utilizando el microscopio, hay que mantenerlo cubierto con su funda para evitar que se ensucien y dañen las lentes. Si no se va a usar de forma prolongada, se debe guardar en su caja dentro de un armario para protegerlo del polvo. RESULTADOS. 1. Cuadro sinóptico o mapa conceptual de los sistemas que integran al microscopio.

CONCLUSIONES. ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________ ____________________________________________________________________...