Practica 3 Biologia del desarrollo Recolección de huevos de D. melanogaster PDF

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Recolección de huevos de D. melanogaster...

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27-9-2019

Practica 3 Recolección de huevos de D. melanogaster

Integrantes del equipo: Dulce Gabriela Guerra Quevedo Hugo Abraham Hernández Villanueva

Introducción La ovoposición por las moscas hembra adultas comienza al segundo día de su emergencia; llegan a producir de 400 a 500 huevos como máximo en 10 días. Los huevos de Drosophila son ovoides, pequeños (medio milímetro aproximadamente) y con dos filamentos en uno de sus extremos que les impiden hundirse en la superficie blanda del alimento donde son depositados. El óvulo de Drosophila es bilateralmente simétrico, su lado dorsal es aplanado mientras que el lado ventral es convexo. El polo anterior y el posterior se distinguen por ciertas diferenciaciones; por ejemplo, el micrópilo siempre se encuentra situado en la región anterior. Las dimensiones del óvulo son: 420 micras de largo (casi medio milímetro) por 150 micras de ancho. Sus membranas protectoras son el corion opaco y la membrana vitelina secretada por el óvulo. La fecundación es interna y ocurre en el útero. El óvulo al caer al útero ocupa la mayor parte de éste, quedando los filamentos dorsales del óvulo suspendidos en los oviductos. Los espermatozoides pasan al oviducto cuando se han liberado del receptáculo seminal del macho. Se utiliza una cámara de recolección que consiste en una botella de cultivo vacía con un toallín de papel humedecido en el fondo (para mantener la humedad) y un tapón de algodón. Se usan cucharas plásticas cuyos mangos han sido recortados para que quepan en las botellas sin tocar el tapón, sobre de ellas se coloca medio de cultivo y se realizan surcos sobre la superficie ya que la hembra prefiere colocar los huevos en surcos húmedos. Las hembras suelen poner mayor cantidad de huevos por la tarde, si se quiere obtener mayor cantidad de huevo y en diversas etapas larvarias se pueden dejar las cucharas por 24 horas. Objetivo general El alumno aprenderá a identificar y manipular huevos de D. melanogaster. Al final de la práctica, estará en capacidad de identificar las partes externas del huevo de la mosca. Materiales  Cámaras de recolección de huevos de D. melanogaster. Serán suplidas por el profesor  Lupa binocular  Microscopio compuesto  Pincel de punta fina

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Aguja de disección Caja de Petri Solución salina Pipeta Pasteur o gotero Porta objetos

Método  El profesor proporcionara una cuchara con medio de cultivo el cual estuvo en las cámaras de recolección y que con certeza tendrá huevos de D. melanogaster en distintas etapas.  Con el estereoscopio identificar las partes de la cuchara en donde la hembra de D. melanogaster coloco los huevos.  Se pueden observar como pequeños puntos blancos con los filamentos respiratorios sobresaliendo.  Posterior a la identificación de huevos, tomar un portaobjetos (limpio) y con la punta de la jeringa tomar huevo uno a uno y colocarlos en el portaobjetos. Nota: los huevos son delicados al momento de manejarlos, cuidar no romper ninguno.  Corroborar que ningún huevo se rompió.

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Agregar una pequeña cantidad de solución salina al portaobjetos y observar en microscopio compuesto en 4X y 10X Observar el corion, los filamentos respiratorios y el micropili.

Resultados  Identificación de los huevos en el medio de cultivo Huevo de Drosophila melanogaster Se observaron las cucharas con medio de cultivo en estereoscopio con un aumento de 32 donde se observó que las hembras prefieren los lugares rugosos para depositar sus huevos. Huevo de Drosophila melanogaster Figura 1 observada en estereoscopio con

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Identificación del corion, filamentos respiratorios y micropili de los huevos de Drosophila melanogaster, a la muestra se le agrego solución salina para mejorar la visibilidad. Filamentos respiratorios observado por la parte dorsal del huevo.

Se observa una pequeña protuberancia entre los filamentos respiratorios, correspondiente al micropili. Figura 1 observada en microscopio compuesto en

Micropili observado desde una vista lateral del huevo.

Filamento respiratorio observado desde el lateral del huevo.

Figura 2 observada en microscopio compuesto en

Filamento respiratorio observado desde la parte lateral del huevo.

Corion con impresiones dejadas por las células del folículo ovárico.

Figura 3 observada en microscopio compuesto en

Discusión de resultados El corion es una estructura compleja, que consiste en una lámina interna y una lámina externa, que unen una capa de pequeños bolsillos de aire que se conectan con una extensa red de espacios de aire en los filamentos respiratorios. Este diseño maximiza el intercambio gaseoso y minimiza la pérdida de agua. Los filamentos respiratorios son las regiones de mayor intercambio gaseoso. La restricción del intercambio gaseoso a esta pequeña área, el huevo es capaz de minimizar pérdida de agua cuando se encuentra en un ambiente seco. Adicionalmente, los filamentos respiratorios tienen una superficie repelente al agua que mantiene una película de gas (un plastrón) alrededor de ellos cuando están sumergidos. El plastrón ayuda a los filamentos respiratorios a actuar como “branquias” si el huevo se ve atrapado en un pozo de agua por lluvia, por ejemplo. Por todo lo anterior, el corion ayuda a la supervivencia del huevo tanto en ambientes secos como húmedos. Conclusión Como conocimiento final obtenido en la práctica, podemos decir que con ayuda de un estereoscopio aprendimos a identificar los huevos de D. melanogaster sin gran cantidad de detalles más que la coloración. Al microscopio compuesto en 4x y 10x pudimos observar de manera mas

detallada las estructuras externas del huevo de la mosca, así como a identificar si estas las observamos desde una vista lateral o dorsal....