Problemas Tema 2 Ciencias ómicas y eso PDF

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1-­‐  Si  estuviéramos  trabajando  con  un  DNA  lineal  como  el  que  se  muestra  en  la figura  siguiente  ¿cuál  es  el  tamaño  en  pares  de  bases  (pb)  de  los...

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1"#Si#estuviéramos#trabajando#con#un#DNA#lineal#como#el#que#se#muestra#en#la# figura#siguiente#¿cuál#es#el#tamaño#en#pares#de#bases#(pb)#de#los#fragmentos#de# DNA#que#se#obtienen#al#realizar#las#digestiones#con#la#enzima#d,#con#la#enzima#e,# con#la#enzima#f#y#con#las#distintas#combinaciones#de#las#mismas?.#Los#números# corresponden#al#número#de#pares#de#bases#del#DNA#(en#total#su#tamaño#es#de# 1500#pares#de#bases)# Digestión#d:# Digestión#e:# Digestión#f# Digestión#de:# Digestión#df:# Digestión#ef:# # #

# # # 2)#En#la#figura#se#muestra#un#plásmido#de#4000#pares#de#bases.#En#el#mismo#hay# cinco#sitios#de#restricción#que#corresponden#a#las#enzimas#(a,b,#c).#La#presencia# de#cinco#sitios#y#solo#tres#enzimas#indica#que#una#o#más#de#las#enzimas#pueden# tener#más#de#un#sitio#de#corte.#Al#lado#se#muestra#el#resultado#de#una# electroforesis#en#un#gel#de#agarosa#de#los#productos#de#las#digestiones#con#las# enzimas#de#restricción.#En#la#electroforesis#se#separan#los#fragmentos#de#DNA# generados,#como#consecuencia#del#corte#con#las#enzimas,#en#función#del#tamaño.# El#tamaño#se#expresa#en#pares#de#bases.#El#gel#tiene#7#carriles#que#corresponden# a:# M."#este#carril#corresponde#al#marcador,#son#fragmentos#de#DNA#con#un#tamaño# conocido#que#se#emplean#como#referencia#para#conocer#el#tamaño#de#los# fragmentos#obtenidos#en#la#digestión#con#las#enzimas#de#restricción# a."#este#carril#corresponde#a#los#fragmentos#de#DNA#obtenidos#al#digerir#el# plásmido#con#la#enzima#a# b."#este#carril#corresponde#a#los#fragmentos#de#DNA#obtenidos#al#digerir#el# plásmido#con#la#enzima#b# c."#este#carril#corresponde#a#los#fragmentos#de#DNA#obtenidos#al#digerir#el# plásmido#con#la#enzima#c# ab."#este#carril#corresponde#a#los#fragmentos#de#DNA#obtenidos#al#digerir#el# plásmido#con#las#enzimas#a#y#b#al#mismo#tiempo# ac."#este#carril#corresponde#a#los#fragmentos#de#DNA#obtenidos#al#digerir#el# plásmido#con#las#enzimas#a#y#c#al#mismo#tiempo# # Coloca#en#la#figura#del#plásmido#las#enzimas#de#acuerdo#con#los#resultados#de#las# digestiones.#Ten#en#cuenta#que#las#digestiones#pueden#dar#como#resultado#

fragmentos#de#diferente#secuencia#pero#de#igual#tamaño#y#que#en#la#electroforesis# migraran#juntos#pero#la#banda#tendrá#mas#intensidad# #

# # # # 3)#Un#fragmento#de#ADN#clonado,#con#extremos#cohesivos#generados#por#EcoRI,# lleva#el#gen#que#codifica#para#un#polipéptido#de#la#cápside#de#un#virus#que#infecta# a# humanos,# pero# que# enferma# sólo# a# personas# que# tienen# las# defensas# inmunológicas#disminuidas.#Ese#fragmento#de#ADN,#que#tiene#8#kpb#de#longitud,# se# inserta# en# el# plásmido# bacteriano# pBR322# en# su# único# sitio# para# EcoRI.# El# plásmido# recombinante# # se# corta# con# dos# endonucleasas# de# restricción# (por# se" #parado# o# juntas)# y# luego# es# sometido# a# electroforesis# en# un# gel# de# agarosa# y# teñido# con# bromuro# de# etidio.# En# la# figura# se# muestra# el# patrón# de# bandas# (visualizadas#por#medio#de#luz#UV)#originado#por#cada#uno#de#los#tratamientos:# A) EcoRI# B) BamHI# C) EcoRI+#BamHI# #Si#realizamos#un#Southern#blot#que#fragmentos#hibridaran#con#una#sonda#del#gen## de#la#cápside#del#virus##########

A"""""B""""""C" 8"Kbp" 6"Kbp"

5,5"" 4,5"" 4"" 3,5" 3" 2,5" " 1"

# # 4)#El#interferón#α#está#codificado#por#un#gen#que#no#contiene#intrones.#Por#rotura# con# BamHI,# se# genera# un# único# fragmento# de# restricción# conteniendo# el# gen# completo,#que#puede#ser#identificado#en#un#Southern#blot#con#una#sonda#de#cDNA# marcada# radiactivamente.# Para# determinar# la# posible# causa# de# una# inmunodeficiencia,#muestras# de#sangre# de#pacientes# y#de# personas#no#afectadas# fueron#utilizadas#para#estudiar#el#gen#del#interferón#α y#la#expresión#del#mismo.# Se#muestran#a#continuación#autorradiografías#de#Southern#y#Northern#de#dichos# experimentos# así# como# un# Western# blot# representativo# utilizando# anticuerpos# anti"interferón# α.# Los# individuos# 1# y# 2# son# sanos# .# En# base# a# los# resultados# obtenidos#:# a)#¿Cuál#sería#la#posible#causa#de#la#inmunodeficiencia#en#los#pacientes#3,4#y#5?# b)¿Qué#característica#particular#tiene#el#individuo#2#para#el#gen#del#interferón#α? c)# ¿Importa# a# partir# de# que# tejido# se# realizó# el# Southern?# Y# el# Northern?# Y# el# Western?##

# 5)#El#gen#X#está#ubicado#en#un#plásmido#de#5300#pb.#El#corte#de#dicho#plásmido# con#la#enzima#de#restricción#BamHI#produce#tres#fragmentos:#1,2#y3#como# muestra#el#esquema.#Copias#en#tándem#del#gen#X#están#contenidas#en#un#único#

#

fragmento#de#restricción.#Si#el#gen#X#codifica#a#una#proteína#de#400#aminoácidos,# indicar#la#posición#aproximada#del#gen#en#el#plásmido.# # #

800#pb#

1500#pb# 3000#pb# # # #...