Tinción DE Papanicolau PDF

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TREN DE TINCIÓN DE PAPANICOLAU El tren de tinción se cambia cada 2000 laminillas teñidas/ Cada 6 u 8 semanas Fue desarrollada por el médico griego George Nicholas Papanicolau. Tiene como objetivo el poder observar y conocer la variación de la madurez celular de las células, así como su actividad metabólica. Es muy útil para ser aplicada no solo en citología ginecológica, si no también se suele utilizar para teñir células de otro aparatos y sistemas. Consiste en distinguir claramente entre los componentes celulares basófilos y acidófilos además de obtener un patrón detallado de la cromatina. Consta de una tinción nuclear y un contraste citoplasmático Se conforma de tres soluciones con 6 tintes: 1. Hematoxilina es un colorante basófilo que tiene afinidad por la cromatina 2 tipos de métodos para teñir el núcleo progresivo (el núcleo se tiñe de una correcta intensidad y se utiliza hematoxilina de mayer y gill) y no progresivo (se sobretiñe el núcleo con hematoxilina no acidificada, de Harris)

2. Orange G 6 (OG6), tinción citoplasmática ácida: tiñe la queratina celular de un naranja brillante, el ácido fosfutúngstico (6 denota la concentración de este) actúa como un mordiente que se une fuertemente a las proteínas lo que ayuda a intensificar el color logrado. La queratina no se encuentra en condiciones normales en el epitelio cervical vaginal (se encuentra en carcinomas queratinizados). 3. EA 50 o Verde luz: colorante ácido que tiñe de verde el citoplasma de células metabólicamente activas (intermedias, parabasales, basales, histiocitos, y columnares, así como células de un carcinoma indiferenciado o de un adenocarcinoma) o Eosina Y: colorante ácido que tiñe el citoplasma de células escamosas superficiales, los nucleolos, eritrocitos y cilios o Pardo de Bismark: tiñe la mucina de las células además precipita el ácido fosfotúngtico responsable de la tinción diferencial por la verde luz y la eosina Los pasos de la tinción están entremezclados con soluciones que hidratan, deshidratan y enjuagan las células. Procedimiento 1. Fijación con alcohol 96° durante 10 minutos 2. Tinción del nuclear (que permite visualizar un núcleo nítido con buena definición del detalle pudiendo evidenciar el patrón de la cromatina) 3. Tinción citoplasmática (de aspecto transparente, que permite apreciar los grados de diferenciación celular y actividad metabólica)

4. Aclaramiento (permite que la luz pace por el citoplasma) Tren utilizado en el laboratorio: técnica modificada por el Hospital John Hopkins (modificada de la tinción de Papanicolaou rápida) 1. Fijación: Alcohol 96º durante 10 minutos. 2. Hidratación: Agua 10 baños. 3. Tinción nuclear: Hematoxilina durante 2 minutos 4. Agua 10 baños 5. Solución de Scott durante 2 minutos (Para sellar hematoxilina) 6. Agua 10 baños 7. Deshidratación: Alcohol de 96º 10 baños x2 8. Tinción citoplasmática: OG6 por 15 segundos-> Escurrir 9. Colorante tricrómico 10. Alcohol de 96º 10 baños x2 11. Deshidratación (Alcohol 10 baños) 12. Alcohol absoluto + Xilol (Solvente derivado de petróleo) 10 baños Aguan antes de la Hematoxilina: Elimina el fijador y por arrastre físico los elementos que no son parte de la estructura celular y se obtiene una célula con moléculas de agua para que a través de esta puedan desplazarse el colorante Agua después de la hematoxilina: elimina por arrastre físico el exceso de colorante intra y extracelular no ligado al núcleo Solución de Scott: sella la hematoxilina al núcleo ya que permite que este colorante se una con mayor afinidad al núcleo Alcohol etílico: reemplaza al gua extracelular e intracelular debido a que los colorantes posteriores son más solubles en alcohol. Los otros baños de alcohol eliminaran el colorante restante. El Alcohol xilol aclara el citoplasma...