348679937 Exudado Faringeo Def PDF

Preview

Summary

UNIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO.FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALAEXUDADO FARÍNGEOReporte de Práctica de LaboratorioGarcía Mireles Adrián Uriel, Islas López Lesli Michel,Maldonado Guadalupe Gabriel, Sanabria AnguianoMitzi Elizabeth, Rendón Rosales María Fernanda,Valverde Calderón Diana...

Description

NIVERSIDAD NACIONAL AUTÓNOMA DE MÉXICO. FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES IZTACALA

EXUDADO FARÍNGEO Reporte de Práctica de Laboratorio García Mireles Adrián Uriel, Islas López Lesli Michel, Maldonado Guadalupe Gabriel, Sanabria Anguiano Mitzi Elizabeth, Rendón Rosales María Fernanda, Valverde Calderón Diana Fabiola.

GRUPO 2332

Dra. Norma Patricia Chen Escamilla Dra. Rosa María Quintana Aguila Prof. Samuel Mejía Lomelí

PRÁCTICA DE EXUDADO FARÍNGEO UTILIDAD DE LA PRUEBA Se realizará el exudado faríngeo con el objetivo de identificar los microorganismos presentes en las vías aéreas superiores, mediante la observación de sus colonias, características en ciertos agentes. Posteriormente se identificará la morfología del agente mediante la observación a microscopio en 10x, 40x, y 100x y su susceptibilidad a distintos antibióticos.

OBJETIVOS    

Realizar un exudado faríngeo de forma correcta. Identificar los microorganismos presentes en el cultivo Identificar las características físicas y morfológicas de las colonias. Conocer los microorganismos causantes de las infecciones respiratorias más comunes de tipo bacteriano

INTRODUCCIÓN El aparato respiratorio o sistema respiratorio consiste en las estructuras que realizan el intercambio de gases entre la atmósfera y la sangre. Incluye a las vías respiratorias, pulmones y músculos respiratorios que median en el movimiento del aire tanto dentro como fuera del cuerpo humano. 1 El aparato o tracto respiratorio está divido anatómicamente en superior (boca, nariz, fosas nasales, orofaringe, nasofaringe, laringe, tráquea y senos paranasales) e inferior (bronquios, pulmones y unidad respiratoria) así como algunas estructuras accesorias, es decir, las pleuras y la pared torácica (huesos, articulaciones y músculos del tórax). 1 Es través del aparato respiratorio que el oxígeno (O2) es introducido dentro del cuerpo para su posterior distribución a los tejidos y el dióxido de carbono (CO2) producido por el metabolismo celular, es eliminado al exterior. Sin embargo no se limita a ello, también interviene en la regulación del pH corporal, en la protección contra los agentes patógenos y sustancias irritantes y en la vocalización (debido a la vibración de de las cuerdas vocales). 1

El tracto respiratorio está en contacto directo con el medio ambiente y se encuentra expuesto continuamente a los microorganismos suspendidos en el aire que respiramos; Diversos mecanismos no específicos protegen el tracto respiratorio de las infecciones, entre ellos, se señalan: los pelos, pasaje contorneado, mucus, inmunoglobulina A secretora y sustancias antibacterianas como la lisozima presente en las secreciones respiratorias. Los reflejos mecánicos como la tos, el estornudo y la deglución contribuyen con la eliminación de agentes extraños; por otra parte, la microbiota “normal” de la nasofaringe y orofaringe previene la colonización del tracto respiratorio por microorganismos patógenos. 2 Esto último tiene su origen al nacer, momento en el cual el hombre está libre de gérmenes, pero es rápidamente colonizado por microorganismos, que en su mayoría provienen de la flora normal de otros seres humanos (especialmente de la madre), y que adquieren por contacto directo o indirecto, o que le llegan por los alimentos. La flora es especialmente numerosa a nivel de ciertas mucosas (boca, faringe, intestino, vagina), y con menor representación en la piel. La flora humana normal es el conjunto de gérmenes que conviven con el huésped en estado normal, sin causarle enfermedad. Su composición es característica para la especie humana, tanto en los gérmenes que la componen como en su número y distribución en el organismo. 3 La flora humana normal desde diversos puntos de vista representa un importante mecanismo de defensa del huésped. Contribuye al desarrollo de la respuesta inmunológica y ayuda a evitar la colonización de la piel o las mucosas por bacterias que pueden ser patógenas (los gérmenes para iniciar la infección deben, en general, comenzar por colonizar los epitelios donde compiten con los integrantes de la flora por factores tales como receptores celulares y nutrientes). 2

Sin embargo, y aun a pesar de todos los mecanismos defensivos del aparato respiratorio existen ocasiones en que, séase por causas ambientales o biológicas, estos no bastan para evitar enfermarse. 3

1

Dentro de las infecciones que afectan al género humano, las que ocurren en el tracto respiratorio son las más frecuentes y de ellas son las infecciones de vías respiratorias superiores (ITrS) las que originan el mayor número de consultas médicas, sobre todo en la edad pediátrica. Es por ello que hoy día, las infecciones respiratorias (IRA) constituyen un motivo de frecuente preocupación dentro del equipo de salud. 4 El 80% de estas infecciones son de etiología viral, en segundo lugar son producidas por bacterias y un reducido número de casos son de origen micótico.

El 80% de las ITRS son de etiología viral. El resfriado común es causado principalmente por el grupo de los rinovirus y coronavirus. La faringitis aguda en su gran mayoría es causada por rinovirus, adenovirus, parainfluenza y coxsackie. La causa bacteriana más frecuente de faringoamigdalitis y, por lo tanto, susceptible de ser tratada con antimicrobianos es Streptococcus pyogenes, responsable de 15 a 30% de las faringitis agudas en niños y de 5 a 10% en adultos. Existen otras bacterias causantes de faringitis, entre éstas tenemos a los Estreptococos beta-hemolíticos de los grupos C y G que se han asociado a brotes epidémicos de faringitis transmitidas por alimentos, a faringitis endémica en comunidades cerradas donde concurren jóvenes y adultos. 5 Otros agentes etiológicos poco frecuentes lo constituyen: Arcanobacterium haemolyticum, Yersinia enterocolitica, Franciscella tularensis y Neisseria gonorrhoeae, esta última debe ser considerada entre los jóvenes y adultos como consecuencia del contacto buco-genital. 4

2

Existen microorganismos que forman parte de la microbiota habitual de la faringe, algunos participan en la etiología de infecciones del tracto respiratorio bajo, sin embargo, no se consideran patógenos en faringoamigdalitis aguda en pacientes inmunocompetentes; es el caso de H. influenzae, S. pneumoniae, M. catarrhalis y S. aureus. H. influenzae es un agente causal de faringitis en niños. En pacientes inmunocomprometidos, se debe informar el hallazgo de Candida sp., bacilos gramnegativos y S. aureus. Tanto en la sinusitis como en otitis media, entre los microorganismos etiológicos frecuentemente implicados se señala a: S. pneumoniae, H. influenzae y, en menor proporción M. catarrhalis. 5

El diagnóstico de las enfermedades infecciosas se realiza sobre la base de los signos y síntomas clínicos que presenta el paciente, los datos epidemiológicos y la demostración del agente causal o las huellas que éste ha dejado en el sistema inmunológico del individuo. El papel del laboratorio de microbiología clínica consiste en determinar la presencia de patógenos potenciales en los tejidos, los

3

líquidos corporales o las secreciones de los pacientes, e identificarlos en caso de que estén presentes. 3 Este servicio es indispensable para el médico tratante, porque la información acerca de la identidad del patógeno es de importancia primordial para predecir el curso de la infección y orientar o decidir la conducta terapéutica más apropiada. Esta información puede obtenerse por medio de cuatro formas posibles: • • • •

El cultivo y la identificación de los microorganismos a partir de muestras clínicas. El examen microscópico de la muestra clínica. La medición o cuantificación de la respuesta inmune específica para el patógeno en el paciente. La detección de moléculas específicas de los patógenos en las muestras de los pacientes.

La extensión y la confiabilidad de la información que puede proporcionar el laboratorio varían de acuerdo con la naturaleza del patógeno. Algunos de ellos son fáciles de detectar, cultivar, identificar y caracterizar; otros requieren medidas extraordinarias tan sólo para detectar su presencia. La principal conexión entre el médico y el laboratorio de microbiología clínica es la muestra que se recolecta y se envía para su procesamiento. Es por ello, que la recolección correcta de una muestra clínica para su cultivo es la etapa más importante en el aislamiento exitoso de un microorganismo responsable de una determinada enfermedad infecciosa. 3 En este rubro podemos encontrar al exudado faríngeo, una prueba de laboratorio que se hace para aislar e identificar organismos que puedan causar una infección en la garganta. El diagnóstico de laboratorio correcto y oportuno depende del cuidado con que se realice la toma y manejo de la muestra siguiendo a detalle las instrucciones al respecto. La interpretación del resultado del laboratorio debe estar apoyada por un buen diagnóstico clínico y los antecedentes epidemiológicos del caso. 5 La muestra para aislamiento de agentes infecciosos debe ser tomada antes de instaurar la terapia con antimicrobianos. La muestra debe identificarse incluyendo todos los datos relevantes del caso: nombre completo o clave, diagnóstico presuntivo, fecha de toma y tipo de muestra. 5

4

El médico solicitará esta prueba cuando el paciente presente dolor de garganta y fiebre que pueda ser debida a una infección respiratoria de vías altas. Los síntomas varían y pueden incluir: • • • • • • •

Dolor de garganta. Fiebre. Dolor de cabeza. Amígdalas rojas con puntitos blancos o amarillos en la parte posterior de la garganta. Cuello hinchado y blando. Debilidad. Pérdida de apetito.

El estudio del exudado faríngeo es importante para el diagnóstico de ciertas infecciones del aparato respiratorio, no obstante el aislamiento e identificación de microorganismos patógenos en estas regiones suele presentar algunos problemas debido a la existencia de una flora normal abundante que incluye aproximadamente 200 especies, muchas de ellas consideradas oportunistas con potencial patógeno e incluso patógenos definidos; por lo que el esquema de aislamiento debe incluir tanto microorganismos gran negativos como gran positivos, además de hongos. 2 Para la obtención de buenos resultados, es recomendable la toma de muestra antes del inicio del tratamiento antimicrobiano y es de vital importancia la adecuada toma de la misma, para lo cual se recomienda sea de los sitios que tengan mayor afectación como los que presentan enrojecimiento o pus (en el caso de la orofaringe), tomando precauciones como la de no contaminar la muestra tocando lengua, labios u otro anexo de la cavidad bucal. 2 La toma de muestra deberá realizarse en el laboratorio, pero si no fuera posible, entonces deben emplearse medios de transporte como el medio Stuart, que aseguran la viabilidad de los microorganismos hasta que sea posible la siembra en los medios adecuados. 2 Debe tenerse presente que la importancia de los microorganismos como responsables de una infección está relacionada con su abundancia en el exudado que se estudia. -

Tanto para la confirmación de género como para la identificación de las principales especies de importancia clínica, resulta de vital importancia el estudio de las

5

características metabólicas en los microorganismos a estudiar, lo cual es llamado con frecuencia estudio bioquímico o pruebas bioquímicas. Estas pruebas se realizan generalmente en tubo y se eligen a partir de las características del microorganismo que se han obtenido de los cultivos en placa y de las tinciones realizadas de colonias aisladas; comprenden una amplia gama, dentro de las cuales destacan TSI, SIM, prueba de fermentación de carbohidratos, citrato de Simmons y caldo urea. Adicional a las pruebas bioquímicas, suelen emplearse las llamadas pruebas especiales, que son todas aquellas pruebas que no necesariamente arrojan información sobre el metabolismo del microorganismo, sino que también pueden distinguir un aspecto morfológico o estructural. Una vez establecida la identidad del microorganismo causal de la enfermedad, es importante realizar pruebas de susceptibilidad a los diferentes antibióticos, para así poder brindar al paciente el tratamiento adecuado y evitar que se propague aún más la resistencia microbiana que ya constituye un serio problema de salud. Para esta evaluación, se utilizan discos de papel impregnados con los fármacos más comúnmente empleados en el tratamiento de enfermedades causadas por microorganismos Gram positivos y gramnegativos, que tras ser colocados en medios inoculados masivamente con la cepa en cuestión permiten observar en pocas horas (24 – 48 hr) la acción de los fármacos por la formación de los llam dep

6

HIPOTESIS En el exudado faríngeo se encontraran restos celulares de la mucosa faríngea y flora bacteriana habitual como: Lactobacilos sp., Espiroquetas sp . , Estreptococos del grupo viridans entre otros, al realizarse la prueba en un sujeto aparentemente sano su cultivo no mostrará algún otro patógeno ajeno a esta flora.

MATERIALES • •

Abate lenguas Hisopos de algodón.

o Equipo de laboratorio • Mechero de Bunsen • Asa bacteriológica • Porta-objetos • Microscopio • Pinzas o Sustancias • Alcohol • Agua • Tren de tinción • Transportador (opcional) o Material biológico • Agar sangre o Equipo de protección • Bata • Guantes de látex • Cubre bocas

7

METODO I.

Toma de muestra − Se le pide al paciente que abra la boca y bajo visión directa y con una iluminación adecuada se procede a tomar la muestra. − Con la ayuda de un abate lenguas, se deprime la lengua con suavidad y se tocan con el hisopo todas las aéreas con exudado, ulceras o inflamación. − Se deben frotar la mucosa por detrás de la úvula, entre los pilares amigd no tocar la mu diluir o contam

Nota: La garganta puede doler al momento del examen e igualmente se puede experimentar una sensación de náuseas cuando se toca la parte posterior de la garganta con el aplicador de algodón. II.

Transporte (Opcional) − En caso de que exista la necesidad de trasladar alguna muestra, el hisopo debe colocarse, de inmediato en un tubo que contenga algún medio de transporte para mantener la muestra lo más cerca posible de su estado original con un deterioro mínimo. Deben evitarse las condiciones ambientales adversas, como exposición al frío o calor extremos. Las muestras deben trasladarse o trabajarse lo antes posible. Se aconseja un límite de 2 horas entre la recolección y la llegada de las

8

muestras al laboratorio. Los medios de transporte de Stuart, Amies y Cary-Blair, son los que se usan con más frecuencia. III.

Cultivo − El hisopo se hace rodar y se frota en el borde de una placa de Agar sangre. − Con el asa de alambre se extiende la muestra en la superficie mediante 10 a 20 movimientos de un lado a otro de la placa (sembrado en estría)

9

− Al final el asa se hunde varias veces en el medio para investigar hemólisis bajo la superficie (Los cortes en el agar obligan a que parte del inóculo anaerobio, y permiten

IV.

Análisis del cultivo

− Después de 18 a 24 horas de incubación la placa se examina por la presencia de colonias betahemolíticas. Los cultivos negativos deben ser incubados 24 horas adicionales antes de ser descartados. − De la misma forma, se realiza la tinción de Gram de una colonia aislada obtenida por crecimiento en condiciones aeróbicas, en el medio Agar sangre Para ello:

10

 Con el asa bacteriológica se toma una colonia y se le coloca en un porta-objetos. (Se hace un frotis delgado del material a estudiar)

 Se le agrega una gota de agua a la colonia y se le deja secar

 Se fija la muestra con el mechero  Se cubre la superficie del frotis con solución de cristal violeta por un lapso de un minuto y se enjuaga con agua destilada.

11

 Se cubre la superficie del frotis con Lugol por un lapso de un minuto para posteriormente enjuagar con agua destilada.

 Se coloca la solución de alcohol- cetona y se enjuaga instante

al

 Se cubre el frotis con la solución de safranina por 30 segundos para finalmente enjuagar y dejar secar al aire.

12

− Se observa al microoscopio a 10, 40 y 100x la colonia, esto con el fin de determinar la morfología bacteriana y descartar o confirmar la presencia de otros microorganismos, como bacilos. V.

Análisis del cultivo

− Se prepara otro cultivo y por medio de unas pinzas metálicas esterilizadas se deposita en la superficie del medio de cultivo inoculado un disco de antibiograma realizando una ligera presión para que quede adherids al mismo. − La placa preparada con el inóculo y los antibióticos se invierte y se lleva a incubar durante 24 horas a 37ºC. Tras este tiempo, se leen los resultados midiendo el diámetro de los halos de inhibición del crecimiento que aparecen alrededor de los discos de papel. Se valora la efectividad de los mismos consultando la tabla correspondiente en la que, según el antibiótico, tenemos la capacidad de difusión en el medio y por tanto, la medida de halo que corresponderá a una bacteria sensible, moderadamente sensible/de sensibilidad intermedia, o resistente. RESULTADOS Observación de cultivos

10x

40x

100x

Se muestran 3 imágenes de diferentes observaciones al microscopio (a 10, 40 y 100x) respecto a la colonia, en donde se pueden distinguir células escamosas y, principalmente bacterias que son propias de la flora bacteriana bucal y tienen como característica que son Gram positivas debido a su tinción de color morado azulado.

13

Antibiograma *PE (Penicilina)

Resistente

*CF (Cefalotina)

Resistente

*AM (Ampicilina)

Resistente

*CTX (Ceftriaxona)

Resistente

*CXM (Cefuroximsa)

Resistente

*DC (Dicloxacilina)

Resistente

*E (Eritromicina)

Resistente

*PEF (Pefloxacina)

Sensible

*SXT (Sulfametoxazol Trimetroprim)

Sensible

AN RE

Po ad de práctica se obtuvo *CAZ (Ceftazidima) Resistente como resultado que en *TE (Tetraciclina) Sensible la colonia anteriormente analizada se encuentran bacterias de tipo Gram positivo y debido a que estas fueron obtenidas de la flora bacteriana bucal el riesgo de enfermedades es nulo. En cuanto al antibiograma lo que más podemos rescatar es que fueron mínimos los fármacos sensibles a dicho agente siendo estos PEF (Pefloxacina), SXT (Sulfametoxazol Trimetroprim) y Te (Tetraciclina). *GE (Gentimicina Enterobacteriaceae)

Intermedio

De acuerdo al trabajo presentado por el investigador Javier Prado M. tenemos que existe una gran diversidad de microorganismos de tipo bacteriano presentes en la microbiota normal que no son considerados patógenos, pero, cualquiera de ellos puede causar enfermedad en individuos con inmunodeficiencias, desordenes metabólicos o tratamientos prolongados con algunos antibióticos, algunos de ellos son: Staphylococcus epidermidis, Corynebacterium spp, Estreptococos viridans y del grupo D, Branhamella catharrallis, Klebsiella spp, Proteus spp y Enterobacter spp; de los cuales el más común es Estreptococos viridans. Así mismo, se encuentra también la microbiota patógena, en donde la faringe alberga un grupo de microorganismos considerados patógenos los cuales están ahí generando el denominado estado de “portador sano”, es decir, están en bajo número y sin causar enfermedad, estos son: Streptococcus pneumoniae, Streptococcus

pyogenes, Staphylocuccus aureus, Haemophylus influenzae y parainfluenzae y Neisseria meningitidis. Hablando ahora específicamente de Estreptococos viridans, de acuerdo al autor G. Rodríguez, sabemos qu...