Biologie - Genetik - Gymnasium, Bayern, G8, Oberstufe, Informationen aus dem Kurs PDF

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Gymnasium, Bayern, G8, Oberstufe, Informationen aus dem Kurs...

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Genetik Übertragung der DANN: Rekombinante DNA muss durch Vektoren (DNA- Moleküle, die bestimmte Eigenschaften haben) übertagen werden. Vektoren müssen replizierbar (kopierbar) sein. • • •

Plasmide als Vektoren für Genübertragung in Bakterien Ti- Plasmid genutzt (überträgt normal Tumoren an Pflanzen) nur Zweikeimblättrige Pflanzen Viren als Vektoren (Pflanzen genutzt : Gefahr mit Infizierung des Virus) Für Einkeimblättrige Pflanzen geeignet; Retroviren genutzt Direkte Genübertragung z.B. durch Inkubation (Auf Grund Probleme mit Vektorsysteme) (Hilfe von Elektroporation) Beim Partikelbeschuss werden winzige Wolframkügelchen von 1 bis 3 Nanometer Durchmesser mit Fremd DNA überzogen in Pflanzenzelle geschossen Bei Menschen oder Tieren meist mit einer feinen Hohlnadel oder Mikrokapillare in Zelle injiziert. DNA kann somit in die Protoplasten (innere einer Pflanzenzelle) aufgenommen werden. Besonders in den Zellkern!

Selektion transgener Zellen: Übertragung des Vektors in die Zellen oder auch Übertragung der Fremd DNA in Vektoren nicht immer erfolgreich. Jetzt Aussortierung der nicht erfolgreichen Zellen von den erfolgreichen! •

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1. Transformation: DNA Ringe in Zellen, die 2 Resistenzgene besitzen (Ampicillin und Tetracyclin) werden aufgeschnitten automatisch bei Ampicillin. Wenn Ampicillin Gen lesbar, kann keine Fremd DNA enthalten sein, weil diese sich automatisch zwischen den Gen anlagern wird und es unlesbar macht. Dann wieder durch DNA Ligase verklebt und e coli Zellen transformiert. 2. Selektion: O.g. Auslese ob Zellen ein Plasmid aufgenommen haben. Jetzt welche Zellen ein Plasmid mit oder ohne Fremd DNA besitzen. Zellen werden auf Tetracyclin Nährboden gesetzt. Ohne Plasmide sterben sofort ab während Zellen mit Plasmid heranwachsen. Samtstempel überträgt Zellen in Ampicillin Nährboden. Zellen die sich nun entwicklen sind ohne Fremd DNA, da sie auf dem Nährboden noch resistent sind. Vergleich zwischen 2 Nährböden zeigt dann die Zellen mit fremd DNA.

Gene Finden und Gewinnen: Schwierig aus dem Spender Genomen ein DNA Fragment zu finden, das kopiert werden soll. • • • •

Genomische Bibliotheken: Kopie aller Fragmente eines Genoms und Einfügung in tausende Empfängerzellen. Daher Erstellung einer kleineren cDNA Bibliothek aus untersuchten Zelle befindlichen Teile Um in Bibliotheken zu suchen werden Gensonden (einsträngige DNA Stränge mit Abschnitten der gesuchten Basenpaarbindungen eines Gens) RFLP Analyse: DNA Fragmente werden aufgetrennt in die Länge um die Länge zu vergleichen und ein Genetisches Muster zu erzeugen....