Coprocultivo - Lecture notes MICROBIOLOGIA PDF

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MICROBIOLOGIA...

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OBJETIVO Dar a conocer al personal químico y técnico el procedimiento para realizar un Coprocultivo ALCANCE Este procedimiento esta dirigido al personal químico y técnico del área de bacteriologia del COE RESPONSABILIDAD El vigilar que se cumpla este procedimiento es responsabilidad del Jefe de laboratorio NOMBRE DE LA PRUEBA EXAMEN

METODO / INSTRUMENTO VITEK 2

Coprocultivo

SINONIMOS, ABREVIATURAS COPRO

PRINCIPIO Una gran variedad de bacterias pueden producir infecciones gastrointestinales, estas se pueden recuperar en medios de cultivo selectivos REQUISITOS DE LA MUESTRA PREPARACION DEL PACIENTE -No ingerir antibiótico cinco días antes de la toma TIPO DE MUESTRA CRITERIO Tipo: Heces Volumen: Recipiente:

Un gramo aproximadamente Frasco esteril

Estabilidad: La muestra es estable por 3 horas Criterio de

rechazo: Muestras no recolectadas en el frasco esteril

REACTIVOS Y CONTROLES REACTIVOS:

Placas de medios de cultivo :

-

Agar para Salmonella y Shigella Agar eosina azul de metileno o MacConnkey . Agar Verde Brillante Caldo tetrationato

Preparación: Consultar instrucciones en la etiqueta adherida al frasco, o bien las cajas bienen preparadas listas para su uso Almacenamiento y estabilidad: Sin reconstituir:

Consérvese bien cerrado entre 2 y 30 ºC

Reconstituido:

Conservar las placas ya preparadas en bolsa de plástico selladas, etiquetadas con fecha de preparación y almacenadas de 2 a 8 º C por 1 mes. Conservar los tubos preparados de caldo tetrationato de 2 a 8 º C por 1 mes.

Rendimiento aceptable: Los medios preparados duran un mes. CONTROLES:

Para garantizar la calidad y esterilidad de las placas preparadas o compradas, es necesario incubar una caja por cada 100 piezas del mismo lote a una temperatura de 35 a 37 º C por 48 horas y verificar que no haya crecimiento bacteriano. MATERIAL Y EQUIPO AUXILIAR MATERIAL Asas, cajas preparadas con los medios correspondientes. EQUIPO Mechero Incubadora Microscopio Campana de Flujo laminar Vitek 2 Equipo de computo

SEGURIDAD EN EL LABORATORIO Bata, guantes, cubre boca, zapato cerrado de piso, lentes de protección.

PROCEDIMIENTO 1. Las muestras obtenidas se llevan al área de microbiología, se registran en las bitacoras de trabajo (recepción de muestras, y resultados de bacteriologia) 2.

Manejo de la muestra hasta su análisis

Se incuba a 37ºC. Por 24 hrs 3. Manejo de las muestras inadecuadas o rechazadas El personal encargado del área, debe revisar las condiciones de las muestras recibidas, y será motivo de rechazo, aquellas que no hayan sido tomadas en los medios adecuados para este tipo de cultivo, así mismo, debe notificar inmediatamente al jefe de laboratorio para que sea resuelta la inconformidad. 4. Preparación del Instrumento El personal del área debe verificar que la estufa de incubación está a 35 a 37º C. 5. Procedimientos de control de calidad necesarios Todo medio de cultivo utilizado en este procedimiento, debe haber sido sometido a la prueba de esterilidad 6. Análisis de las muestras Colocar una pequeña parte de la muestra en caldo tetrationato e incubar 24 horas. Tomar un hisopo , aplicar con delicadeza una pequeña muestra de éste y hacerlo rodar sobre la superficie cerca del borde de los siguientes medios para su aislamiento primario: Agar V.B. Agar S.S. Agar EMB Operación de estriado. Flamear un asa dejarla enfriar y desde el borde superior de la muestra primaria, realizar un zigzag (cubriendo un tercio de la placa) hasta el borde inferior de la caja, procurando pasar el asa no más de tres veces por la muestra primaria, volver a flamear el asa y repetir esta operación hasta cubrir el total de la placa, tocando dos veces el zigzag anterior Las placas triples con los medios EMB, S.S, V.B, se incuban a 37ºC de 48 hrs.

Una vez transcurrido el tiempo se observa el crecimiento bacteriano, si éste pertenece a la flora normal, se reporta como Desarrollo de la flora normal Si son bacterias que por su aspecto físico pueden considerarse como patógenas se procede a realizar la identificación bioquímica del microorganismo y su antibiograma programando la muestra en el Vitek 2 (Consultar manual de operación del equipo) 7.- Los resultados obtenidos se anotaran en la Bitacora de Resultados Bacteriologia .

REGISTROS DEL DEPARTAMENTO -Bitacora de registro de pacientes -Bitacora de Resultados bacteriologia COE - Bitacora de resultados bacteriologia Policlinica -Bitacora de hemocultivos -Bitacora de mantenimiento de equipo -Bitacora de autoclave -Bitacora de mantenimiento de equipo -Bitacora de entrega de turno -Bitacora de cultivos realizados al personaldel Coe -Carpeta de Resultados del Coe -Carpeta de resultados de la policlinica -Bitacora de Control de reactivos -Bitacora de control de reactivos (medios de cultivo) -Bitacora de entrega de turno PROGRAMAS DE CONTROL DE CALIDAD EXTERNO Qualitat CRITERIOS DE REPETICION Se resiembra alguna bacteria cuando se sospecha de contaminación, o bien cuando el cultivo tiene mas de 24 horas y desea identificar una bacteria, cuando a criterio no se obtiene lo esperado se solicita nueva toma de muestra REPORTE DE RESULTADOS Las bacterias se dividen por GENERO Y ESPECIE GENERO: La primera letra es con mayúscula ESPECIE: Se escribe con minúscula El equipo Vitek 2 emite un reporte, el cual se debe vaciar al sistema de reporte del laboratorio para ser firmado y entregado CIFRA DE ALERTA

Reporte de Flora Bacteriana patogena VALORES ESPERADOS Cultivos Negativos SIGNIFICADO CLINICO Una gran variedad de bacterias puede producir infecciones gastrointestinales; Para que estas bacterias se puedan recuperar en el cultivo, se debe recoger la muestra y transportarse al laboratorio para evitar los cambios ácidos en las heces, y se asegure la viabilidad de los microorganismos infecciosos, e inocularse en los medios de cultivo selectivo apropiados. NOTAS DE PROCEDIMIENTO Pacientes con tratamiento con antimicrobianos LIMITACIONES DEL METODO Muestras recogidas en frasco no esteril, o depositadas en el laboratorio mucho tiempo después TIEMPO APROXIMADO EN EL LABORATORIO De tres a cinco días de entrega COBERTURA DE EMERGENCIA Alguna otro Unidad del Issemym BIBLIOGRAFIA La División Editorial de Medicina de Salvat ANEXOS Incluir formatos que se requieran para el desarrollo de la Instrucción de Trabajo...