Informe #7 Recuento De Plaquetas en cámara y frotis PDF

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Summary

El recuento de plaquetas mediante cámara consiste en determinar el número de trombocitos presentes en
un volumen determinado de sangre diluida. Se lisan los hematíes y se evita el agregamiento plaquetario para
facilitar su visualización y recuento. La muestra de sangre se diluye lo sufic...

Description

Universidad de Guayaquil Facultad de Ciencias Químicas Carrera: Química y Farmacia

Laboratorio de Hematología Práctica #7 Firma:

RECUENTO DE PLAQUETAS EN CÁMARA Y FROTIS Nombre: Bravo

Baquerizo Nathaly Isabel

Fecha: 16/08/2021

Objetivos de la práctica de laboratorio ➢ Determinar la cantidad de plaquetas que se pueden encontrar en una muestra de sangre mediante la cámara de Neubauer para detectar o diagnosticar trastornos y enfermedades de la medula ósea. ➢ Conocer las características morfológicas que presentan las plaquetas en el torrente sanguíneo mediante la técnica del frotis sanguíneo y definir la funcionalidad de estas células sanguíneas. Marco Teórico Las plaquetas o trombocitos son unas células sanguíneas que encontramos en la sangre, las cuales son las principales responsables de la coagulación sanguínea. Son uno de los tres tipos de células sanguíneas (además de los glóbulos blancos y los glóbulos rojos), que se origen en la médula ósea a partir de unas células bautizadas con el nombre de megacariocitos.

Imagen 1. Células sanguíneas

Los megacariocitos son células de gran tamaño que se rompen en distintos fragmentos para formar plaquetas. Estos fragmentos celulares no tienen núcleo, pero sí contienen unas estructuras llamadas gránulos, que tienen una serie de proteínas necesarias para producir la coagulación de la sangre, y sellar las roturas de los vasos sanguíneos. Un único megacariocito es capaz de producir de 1000 a 3000 plaquetas, las cuales, una vez se forman, comienzan a circular en el torrente sanguíneo durante alrededor de 9 a 10 días. (Pérez, 2020)

Imagen 2. Trombopoyesis

Así, cuando se dañan o envejecen, el bazo (el cual no solo filtra la sangre de las células viejas, sino que también almacena plaquetas, glóbulos rojos y glóbulos blancos funcionales) los elimina de la circulación sanguínea.

El principal papel de las plaquetas es obstruir los vasos sanguíneos lesionados o rotos, para evitar la pérdida de sangre. En condiciones normales, las plaquetas se mueven en un estado inactivo a través de los vasos sanguíneos. No obstante, cuando se produce una rotura en un vaso sanguíneo (herida), las plaquetas que se encuentran inactivas se activan por la presencia de determinadas moléculas en la sangre, las cuales son secretadas por las células endoteliales de los vasos sanguíneos. Una vez activadas, las plaquetas son capaces de cambiar su forma y volverse más redondas, con proyecciones largas en forma de dedos que se extienden desde la célula, pegajosas y se adhieren entre sí y a las distintas superficies de los vasos sanguíneos con el fin de tapar o taponar cualquier rotura presente en el vaso sanguíneo. (Pérez, 2020)

Imagen 3. Coagulación sanguínea

Valores normales de plaquetas El valor normal de las plaquetas es entre 150 000 e 450 000 plaquetas/ µL de sangre, sin embargo, algunas condiciones pueden interferir en el proceso de producción de las plaquetas, habiendo un aumento o disminución de su concentración en la sangre, esta condición se conoce como trombocitopenia o trombocitosis. (Lemos, 2020) Plaquetas altas El aumento del número de plaquetas, conocido como trombocitosis, puede ocurrir por causas patológicas o fisiológicas. Algunas causas fisiológicas pueden ser la realización de actividad física intensa, trabajo de parto, altitud elevada, tabaquismo, estrés o uso de adrenalina, por ejemplo. Las principales causas patológicas de trombocitosis son: •

Anemia hemolítica grave;

•

Anemia ferropénica;

•

Síndromes mieloproliferativos, como trombocitemia esencial, Policitemia Vera y Mielofibrosis;

•

Sarcoidosis;

•

Infecciones agudas y crónicas;

•

Leucemia;

•

Después de una hemorragia aguda;

•

Post esplenectomía (extirpación del bazo);

•

Neoplasias;

•

Colitis ulcerativa;

•

Después de una cirugía.

Es importante identificar la causa que conllevó al aumento de las plaquetas, para que el médico pueda indicar el tratamiento más adecuado. Plaquetas bajas Otro trastorno relacionado a la cantidad de plaquetas es la trombocitopenia, que corresponde a la disminución de las plaquetas en la sangre. Esto puede ocurrir debido al uso de algunos medicamentos, anemia perniciosa, enfermedades autoinmunes como el lupus y por deficiencias nutricionales, por ejemplo. Por lo general, el aumento en el número de plaquetas no causa síntomas, por lo que se identifica a partir de la realización de la hematología, que es el examen de sangre que evalúa la cantidad y las características de las células sanguíneas. En algunos casos pueden surgir algunos síntomas, variando de acuerdo con la causa, siendo los principales náuseas, vómitos, mareos y hormigueo en las extremidades. (Lemos, 2020) Recuento de plaquetas en cámara de Neubauer El recuento de plaquetas mediante cámara consiste en determinar el número de trombocitos presentes en un volumen determinado de sangre diluida . Se lisan los hematíes y se evita el agregamiento plaquetario para facilitar su visualización y recuento. La muestra de sangre se diluye lo suficiente para que estén separadas unas de otras y así poder contarlas. El recuento se realiza en una cámara de Neubauer o similar de dimensiones conocidas. (Rodríguez, 2019) La profundidad de la cámara es de 0,1 mm. Los cuadrados de las esquinas miden 1 mm 2 de superficie y están subdivididos en 16 cuadrados más pequeños de 0,25 mm de lado. El cuadrado del centro está dividido en 16 cuadrados de 0,2 mm de lado y éstos a su vez están subdivididos en 16 cuadrados de 0,05 mm de lado. Los valores de referencia en el recuento de plaquetas son de 150-400 Gigaplaquetas por litro (Gl/L) para hombres y mujeres. O lo que es lo mismo, 150000-400000 plaquetas/mm3. Cuando los valores son superiores

a los de referencia estamos ante una trombocitosis. Y si son inferiores estaremos ante una trombocitopenia/trombopenia. Plaquetas en frotis Se basa en que las plaquetas que observamos en un frotis sanguíneo se pueden estimar por comparación con el contaje de plaquetas en cámara. Para tal efecto se considera que por cada plaqueta que observemos en el frotis de sangre teñida, ésta equivaldrá a 20.000 en el contaje en cámara. (1:20.000). El estimado sería como un contaje cualitativo y se reportará en palabras: ▪ ▪ ▪

Normal Disminuidas Incrementadas

Se realiza un frotis de sangre con la última gota de una punción venosa o capilar. Se tiñe con reactivo de Wright. Con objetivo de inmersión (100x) se observan 10 campos microscópicos sucesivos, desde el borde longitudinal superior hacia el borde longitudinal inferior. Consignado el número de plaquetas que se encuentren. Las plaquetas se las reconoce por ser corpúsculos esféricos u ovalados de 3 micras de diámetro, que tienen una zona central granulosa y que se tiñe de color violeta-rojizo con el colorante de Wright y una zona periférica hialina y filamentosa. Sumar las plaquetas halladas en los 10 campos. Obtener el promedio por campo y este valor se compara con el cuadro siguiente para emitir el estimado de plaquetas en frotis. ▪

Normal:

7 – 24 Plaquetas de promedio

▪

Disminuida:

Inferior a 4 plaquetas de promedio

▪

Incrementada:

Superior a 30 plaquetas de promedio

Reactivos de laboratorio ✓ Líquido de dilución de RESS-ECKER ✓ Reactivo de Wright Materiales de laboratorio o Cámara de Neubauer o Tubo de ensayo 75x13 o Tapón de caucho o Pipeta semiautomática de 10 y 200 landas

o Caja de Petri o Dispensador de plástico descartable o Papel filtro. Equipos de laboratorio ▪

Microscopio binocular

▪

Mezclador de tubos

▪

Contador de células

Actividades a desarrollar/ técnica operatoria Realizar una dilución 1:2000 de la sangre con el reactivo.

Agitar por 3 minutos.

Preparar la cámara de Neubauer y cargar la cámara con la mezcla.

Con el objetivo de 10x enfocar la cuadrícula correspondiente a los glóbulos rojos.

Junato a la cámara ubicar un pequeño trozo de papel embebida con agua.

Poner ésta bajo una caja de Petri por 1520 minutos.

Con el objetivo de 40x contar las plaquetas en 5 cuadrantes de hematíes.

Las plaquetas se reconocen como cuerpos redondeados o

Alargados refringentes de color azul-negruzco de 3 micras de diámetro

Resultados obtenidos

Imagen 4. Recuento de plaquetas en cámara de Neubauer

Imagen 5. Observación de plaquetas en 10x y 40x.

Los conteos fueron los siguientes: 10, 11, 10, 8 y 13 haciendo una suma de 52 plaquetas en esos 20 cuadrados pequeños. 𝑷𝒍𝒂𝒒𝒖𝒆𝒕𝒂𝒔⁄𝒎𝒎𝟑 =

𝑵 × 𝟐𝟎𝟎 × 𝟏𝟎 × 𝟒𝟎𝟎 𝟖𝟎

𝑁 = 𝑛ú𝑚𝑒𝑟𝑜 𝑑𝑒 𝑝𝑙𝑎𝑞𝑢𝑒𝑡𝑎𝑠 𝑒𝑛 𝑙𝑜𝑠 5 𝑐𝑢𝑎𝑑𝑟𝑎𝑛𝑡𝑒𝑠 𝑷𝒍𝒂𝒒𝒖𝒆𝒕𝒂𝒔⁄𝒎𝒎𝟑 = 𝑵 × 𝟏𝟎. 𝟎𝟎𝟎 𝑃𝑙𝑎𝑞𝑢𝑒𝑡𝑎𝑠 ⁄𝑚𝑚 3 = 52 × 10.000 𝑃𝑙𝑎𝑞𝑢𝑒𝑡𝑎𝑠 ⁄𝑚𝑚 3 = 520.000 El valor obtenido en el recuento de plaquetas es elevado al valor de referencia indicando que este paciente presenta una trombocitosis El aumento del número de plaquetas, conocido como trombocitosis, puede ocurrir por causas patológicas o fisiológicas. Algunas causas fisiológicas pueden ser la realización de actividad física intensa, trabajo de

parto, altitud elevada, tabaquismo, estrés o uso de adrenalina. Las principales causas patológicas de trombocitosis son: • • •

Anemia hemolítica grave; Anemia ferropénica; Síndromes mieloproliferativos, como trombocitemia esencial, Policitemia Vera y Mielofibrosis.

Rangos de Referencia Plaquetas /mm3

140.000 a 500.000

Conclusiones ✓ Se determinó que el recuento de plaquetas es de suma importancia ya que se encargan de la coagulación sanguínea, obstruyendo los vasos lesionados o rotos para evitar la pérdida de sangre. ✓ Se analizó la muestra sanguínea de un paciente y se identificó que este tiene un elevado número de plaquetas o trombocitos que se conoce como trombocitosis y puede ocurrir por causas patológicas o fisiológicas. Algunas causas fisiológicas pueden ser la realización de actividad física intensa, trabajo de parto, altitud elevada, tabaquismo, estrés o uso de adrenalina. ✓ El tratamiento de la trombocitosis depende de la causa. Muchos pacientes no necesitan tratamiento aparte de un seguimiento médico periódico. A las personas que están en riesgo alto de coagulación se les puede recetar aspirina en una dosis baja. Recomendaciones ❖ Los frotis sanguíneos deben preparase bajos criterios de control que aseguren los requerimientos necesarios para ser de utilidad en el examen microscópico. La experiencia de la persona que realiza el procesamiento de las muestras influye directamente en la calidad de los frotis sanguíneos. ❖ Los recuentos de células mediante cámara de recuento son técnicas con un elevado margen de error. En determinadas circunstancias el error puede ser incluso mayor (vejez de la muestra, muestra de sangre con coágulos, material sucio, mala calibración de pipetas, etc.) ❖ El número de plaquetas también puede aumentar tras un ejercicio físico extenuante y después del parto. Entre los fármacos que pueden hacer aumentar el número de plaquetas se incluyen los estrógenos y los contraceptivos orales. ❖ Antes de emitir un resultado el laboratorio se debe tener en cuenta que el número de plaquetas también puede aumentar tras un ejercicio físico extenuante y después del parto. Entre los fármacos que pueden hacer aumentar el número de plaquetas se incluyen los estrógenos y los contraceptivos orales.

o TROMBOCITOPENIA. Cuando existe una trombocitopenia aislada, la causa más común es la destrucción inmune, pero existen trombocitopenias asociadas a un gran número de enfermedades. o TROMBOCITOSIS. Es el aumento de las plaquetas y puede ser secundario. Las infecciones suelen ser la causa más frecuente (virales, bacterianas o por micoplasma), pero existen muchas otras enfermedades que se asocian a trombocitosis. Bibliografía Lemos, M. (11 de Enero de 2020). Plaquetas: qué son, valor normal y qué significa cuando están altas o bajas. Obtenido de TUASAÚDE: https://www.tuasaude.com/es/plaquetas/ Pérez, C. (23 de Abril de 2020). Qué son las plaquetas, funciones y para qué sirven. Obtenido de Salud: https://www.serpadres.es/3-6-anos/salud-infantil/articulo/que-son-las-plaquetas-funciones-y-para-quesirven-611587678778 Rodríguez, F. (01 de Febrero de 2019). Recuento de plaquetas en cámara de Neubauer. Obtenido de Blog de Laboratorio Clínico y Biomédico: https://www.franrzmn.com/recuento-de-plaquetas-en-camara-deneubauer/ Torrens P., M. (2015). Interpretación clínica del hemograma. Revista Médica Clínica Las Condes, 26(6), 713-725. Recuperado el 21 de Junio de 2021, de https://www.elsevier.es/es-revista-revista-medica-clinica-las-condes202-articulo-interpretaciyn-clynica-del-hemograma-S0716864015001480...