Laboratorio Identificación DE Aminoacidos Y Proteinas PDF

Preview

Summary

Download Laboratorio Identificación DE Aminoacidos Y Proteinas PDF

Description

LABORATORIO IDENTIFICACIÓN DE AMINOACIDOS Y PROTEINAS PARTE I

ADRIÁN SAMIR PEDROZO ARIANO 161941 MARÍA VALENTINA ACOSTA CHINCHILLA 162073 CAROLINE TAMARA VIDAL TRILLOS 162145

DOCENTE RAMÓN JOSÉ LOBO JÁCOME

UNIVERSIDAD FRANCISCO DE PAULA SANTANDER OCAÑA FACULTAD DE CIENCIAS AGRARIAS Y DEL AMBIENTE INGENIERÍA AMBIENTAL Ocaña, Norte de Santander

Octubre de 2020

ii

ÍNDICE 1. INTRODUCCIÓN ...............................................................................................................1 2. MARCO TEÓRICO.............................................................................................................2 2.1 Objetivos ........................................................................................................................2 2.1.1 Objetivos generales ............................................................................................2 2.1.2 Objetivos específicos .........................................................................................2 3. JUSTIFICACIÓN ................................................................................................................3 4. MATERIALES ....................................................................................................................4 5. PROCEDIMIENTO .............................................................................................................5 6. RESULTADOS....................................................................................................................9 7. CUESTIONARIO ..............................................................................................................11 8. ANEXOS ...........................................................................................................................14 9. CONCLUSIONES .............................................................................................................15 10. BIBLIOGRAFÍA ...............................................................................................................16

iii

LISTA DE FIGURAS Figura 1..................................................................................................................................................... 11 Figura 2..................................................................................................................................................... 12 Figura 3..................................................................................................................................................... 12 Figura 4..................................................................................................................................................... 13 Figura 5..................................................................................................................................................... 13 Figura 6..................................................................................................................................................... 14

iv

LISTA DE TABLAS Tabla 1 ........................................................................................................................................................ 6 Tabla 2 ........................................................................................................................................................ 6 Tabla 3 ........................................................................................................................................................ 7 Tabla 4 ........................................................................................................................................................ 8

1

1. INTRODUCCIÓN Según (Lobo Jácome, 2020) Las proteínas son polímeros de residuos de aminoácidos, por ello el interés de estudiar la estructura y propiedades de estos y sus reacciones típicas. Aunque la mayoría de los aminoácidos presentes en la naturaleza se encuentran formando las proteínas hay algunos que desempeñan otras funciones. Los αaminoácidos se clasifican en una biológica en proteicos y no proteicos, o también en codificables y no codificables. Los aminoácidos se pueden también clasificar según diversos criterios. Con fines analíticos y limitándonos a los grupos representativos que se tratan en esta práctica, distinguiremos: Aminoácidos con anillo fenólico: fenilalanina y tirosina Aminoácidos que contienen azufre: cisteína, cistina y metionina. Aminoácidos con un grupo gunidínico: arginina. Aminoácidos derivados del anillo indol: triptófano

2

2. MARCO TEÓRICO Las proteínas están constituidas por una veintena de aminoácidos unidos covalentemente en una ordenación de cabeza cola mediante enlaces peptídicos (conocidas también como uniones amídicas), o uniones peptídicas producidos por la eliminación de los elementos del agua entre el grupo carbonilo del carboxílico del primer aminoácido y el grupo amino del otro aminoácido formando macromolécula designadas como oligopéptidos o poli péptidos (proteínas). El comportamiento de las sustancias proteicas frente a diversos solventes, como agua, no pueden tomarse como único criterio de solubilidad, eficiencia y suficiente para agrupar, clasificar y caracterizar a las proteínas y es así como en medio acuoso, variación de temperatura, presencia de sales, efecto de acidez, pH permite, separar, caracterizar y clasificar a proteínas. (Lobo Jácome, 2020)

2.1 Objetivos 2.1.1 Objetivos generales Identificar aminoácidos y proteínas 2.1.2 Objetivos específicos Verificar reacciones de desnaturalización y precipitación por calor y ácidos.

3

3. JUSTIFICACIÓN Las reacciones que permiten identificar estos y otros grupos de aminoácidos, no son suficientes para identificar inequívoca de unos aminoácidos, por tanto cuando se analiza un hidrolizado proteico o una mezcla de aminoácidos de otro origen, debe verificarse con aminoácidos patrones. Las reacciones de desnaturalización y precipitación de proteínas son de importancia en métodos de separación y se explican por efecto de calor o de ácidos sobre la actividad enzimática. Recuerde que los residuos de αaminoácidos tienen la presencia de un grupo carboxílico y un grupo amino, más un radical por la cadena.

4

4. MATERIALES Leche Huevo Tubos de ensayo Gradilla Pipeta Pinzas Mechero Muestra de aminoácido conocida: Glicina, tirosina.

5

5. PROCEDIMIENTO Coagulación por calor: En un tubo de ensayo colocamos 2 ml de las muestras proteicas y calentamos a ebullición. Observe y anote las de cambio y las proteínas que precipitan. A 2 ml de la solución proteica o aminoácido agregamos 1 ml de cloruro de sodio al 5 %, calentamos a ebullición. Observe la magnitud de la coagulación en los tubos.

Precipitación de proteínas con etanol o acetona. A 2 ml de solución, agregamos 2 ml de alcohol al 90% y a otro tubo acetona. Anote el resultado.

Precipitación por ácidos. Montamos una serie de tubos, una para cada muestra. A 2 ml de solución adicionamos por separado TCA, HCl, pícrico, nítrico, acético, sulfúrico. Observe el precipitado o la interface formada.

6

6. RESULTADOS Tabla 1 Coagulación por calor MUESTRA HUEVO PURO

HUEVO DILUIDO

RESULTADOS -

Se coagula

-

Toma un color blanquecino

-

Se coagula

-

La mayor parte de la muestra queda en estado acuoso

LECHE PURA

-

No hubo cambios

LECHE DILUIDA

-

No hubo cambios

GLICINA

-

No hubo cambios

TIROSINA

-

Se torna turbio

Observación realizada a las muestras de la primera experiencia (coagulación por calor) Tabla 2 Coagulación por calor (cloruro de sodio 5%) MUESTRA HUEVO PURO

HUEVO DILUIDO

RESULTADOS -

Se coagula

-

Su color fue totalmente blanco

-

Se coagula quedando esta parte de la proteína en la parte superior

-

En la parte inferior la proteína queda líquida

7

LECHE PURA

-

No hubo cambios

LECHE DILUIDA

-

No hubo cambios

GLICINA

-

No hubo cambios

TIROSINA

-

Se torna turbio

Observación realizada a las muestras de la primera experiencia pero con la variación de la agregación de cloruro de sodio al 5% Tabla 3 Precipitación de proteínas con etanol y acetona. MUESTRA HUEVO PURO

ETANOL -

Coagulación mínima.

ACETONA -

Se coagula.

-

Presentó coloración blanca.

-

La acetona quedó en la parte superior.

-

HUEVO DILUIDO

La parte inferior

-

Se coagula

quedo acuosa.

-

Presentó coloración blanca en la parte superior.

LECHE PURA

-

Presentó grumos pero

-

Se coagula

lo demás quedó

-

Conservó su color

totalmente líquido.

(blanco). -

Se dividió en dos: en la parte superior su

8

color fue blanco y en la inferior transparente. -

LECHE DILUIDA

No hubo cambios.

-

Se coagula

-

Conservó su color (blanco).

-

GLICINA

No hubo cambios.

-

Se produjo viscosidad en la sustancia.

TIROSINA

-

Hubo precipitación.

-

Hubo precipitación.

Observación realizada de las muestras de la segunda parte con la adición de etanol y acetona. Tabla 4 Precipitación por ácidos.

TCA

HUEVO

HUEVO

LECHE

LECHE

DILUIDO

PURO

DILUIDA

PURA

Presentó

Presentó

precipitación coagulación

Presentó

No se

coagulación aprecia

TIROSINA GLICINA No hubo

No hubo

cambios

cambios

coagulación HCl

Presentó

Presentó

precipitación coagulación

No hubo

No se

No hubo

No hubo

cambios

aprecia

cambios

cambios

coagulación PÍCRICO

Presentó

Presentó

precipitación coagulación

No hubo

Se torna del

No hubo

No hubo

cambios

color

cambios

cambios

característico

9

del ácido y no presenta coagulación NÍTRICO

Presentó

Presentó

precipitación coagulación

No hubo

No se

No hubo

No hubo

cambios

aprecia

cambios

cambios

No hubo

No hubo

cambios

cambios

No hubo

No hubo

cambios

cambios

coagulación ACÉTICO

No hubo

Coagulación Presentó

cambios

poco visible

No se

coagulación aprecia coagulación

SULFÚRICO No hubo cambios

Coagulación Presentó poco visible

No se

coagulación aprecia coagulación

Observaciones realizadas al agregar ácidos a las muestras proteicas.

10

7. CUESTIONARIO 1. ¿Cuál es el posible aminoácido que contiene su muestra? Leche: Isoleucina (1,61 g), Leucina (2,47 g), Valina (1,73 g), Metionina (0,62 g), Fenilanina (1,22 g), Treonina (1,16 g), Triptófano (0,35 g), Lisina (1,96 g), Histidina (0,66 g). (Think USA Dairy, s.f.) Huevo: Lisina (6.6 g), Alanina (5.8 g), Histidina (2.3 g), Cisteína (2.4 g), Arginina (5.9 g), Valina (7.1 g), Ácido aspártico (9.4 g), Metionina (4.9 g), Treonina (4.5 g), Isoleucina (7.0 g), Serina (8.1 g), Leucina (10.1 g), Ácido glutámico (16.1 g), Tirosina (3.9 g), Prolina (3.6 g), Fenilalanina (5.4 g), Glicina (3.2 g), Triptófano (1.2 g). (Tu mejor versión, s.f.)

2. ¿Cuáles factores causan una proteína desnaturalizada? La desnaturalización de las proteínas consiste en la pérdida de la estructura tridimensional por distintos factores ambientales, como temperatura, pH o ciertos agentes químicos. La pérdida de la estructura da como resultado la pérdida de la función biológica asociada a esa proteína, ya sea enzimática, estructural, transportadora, entre otras. La estructura de la proteína es altamente sensible a los cambios. La desestabilización de un solo puente de hidrógeno esencial puede desnaturalizar la proteína. Del mismo modo, existen interacciones que no son estrictamente esenciales para cumplir con la función proteica, y, en caso de ser desestabilizada, no tiene efecto en el funcionamiento. (Gelambi, s.f.)

11

Figura 1 Desnaturalización

Tomado de: Lifeder.com (Desnaturalización de Proteínas: Factores y Consecuencias).

12

8. ANEXOS Figura 2 Coagulación por calor

Tomado de: Jept.es (Reconocimiento de proteínas) Figura 3 Precipitación por ácidos

Nota: Reacción xantoproteica. Tomado de: Jept.es (Reconocimiento de proteínas)

13

Figura 4 Coagulación por calor (sales)

Nota: Precipitación por cambio iónico. Tomado de: blogspot.com (Precipitación) Figura 5 Precipitación de proteínas con etanol

14

Nota: En las siguientes figuras se muestra, en primer lugar, la clara de huevo en el vaso, a continuación, el efecto de la adición de etanol transcurrida media hora y, por último, el resultado tras 24 h. Tomado de: webs.ucm.es (Desnaturalizando proteínas) Figura 6 Precipitación por ácidos

Nota: en la figura observamos el efecto del vinagre sobre la leche transcurridas 24 h. Tomado de: webs.ucm.es (Desnaturalizando proteínas)

15

9. CONCLUSIONES Las cadenas de proteínas que hay en la clara de huevo, denominadas proteínas globulares, se encuentran enrolladas adoptando una forma esférica. Al añadir etanol ocurre lo mismo que cuando se fríe o cuece 3 un huevo, las cadenas de proteína se desenrollan y se forman enlaces que unen unas cadenas con otras. Este cambio de estructura da a la clara de huevo la consistencia y color que se observa en un huevo cocinado. (Desnaturalizando proteínas, s.f.)

Los tirosina contiene anillos de benceno activados y se someten fácilmente a la nitración, por eso reacciona con los reactivos que contienen Nitrógeno.

La solución de glicina resulta incolora al agregarle los reactivos por lo tanto, la reacción da negativa. En el caso del ácido pícrico se disuelve con el ácido.

Después de realizar la experiencia de precipitación por ácidos podemos concluir con los resultados obtenidos que el pH, la temperatura y sustancias químicas son capaces de desnaturalizar las proteínas.

En la coagulación por calor pudimos determinar que el calor no es un factor que logre cambios en la leche como la coagulación esto se da debido a que la leche solo presenta esta reacción cuando se le agregan ácidos. Todo lo contrario lo podemos ver en el huevo en el cual la temperatura si es un factor que lo hace coagular desnaturalizando sus proteínas.

16

10. BIBLIOGRAFÍA Desnaturalizando proteínas. (s.f.). https://webs.ucm.es/. Obtenido de Desnaturalizando proteínas: https://webs.ucm.es/info/analitic/Asociencia/DesnatProteinas.pdf Gelambi, M. (s.f.). https://www.lifeder.com/. Obtenido de Lifeder.com: https://www.lifeder.com/desnaturalizacion-proteinas/ Lobo Jácome. (2020). https://uvirtual.ufpso.edu.co/. Obtenido de Unidad de Educación virtual UFPSO: https://uvirtual.ufpso.edu.co/pluginfile.php/50825/mod_resource/content/14/Lab.%20ami noacuidos%20y%20proteinas.pdf Think USA Dairy. (s.f.). https://www.thinkusadairy.org/. Obtenido de Think USA Dairy: https://www.thinkusadairy.org/es/inicio/productos-lacteos-estadounidenses/leches-enpolvo/salud-y-nutricion Tu mejor versión. (s.f.). https://blog.nutritienda.com/. Obtenido de Tu mejor versión: https://blog.nutritienda.com/albumina-dehuevo/#:~:text=La%20alb%C3%BAmina%20de%20huevo%20proporciona,de%20amino %C3%A1cidos%20ramificados%20y%20leucina....