Práctica 04 - Digestión de las proteínas e inhibición de las enzimas digestivas proteícas PDF

Preview

Summary

Facultad de Ciencias médicasEscuela de Medicina HumanaTítulo:◆Práctica 04- Digestión de las proteínas e inhibición delas enzimas digestivas proteícasDocente:◆Polo Gamboa, Jaime AbelardoEstudiantes:◆Chavez Carrion, Camila de Jesus◆Ñacari Quispe, Walter Gustavo◆Quipuzco Gutiérrez, Nathaly Elizabeth◆Ra...

Description

Facultad de Ciencias médicas Escuela de Medicina Humana Título: ◆ Práctica 04- Digestión de las proteínas e inhibición de las enzimas digestivas proteícas

Docente: ◆ Polo Gamboa, Jaime Abelardo

Estudiantes: ◆ Chavez Carrion, Camila de Jesus ◆ Ñacari Quispe, Walter Gustavo ◆ Quipuzco Gutiérrez, Nathaly Elizabeth ◆ Ramirez Ramos, Randy ◆ Rodrigo Arévalo, Gerard Yoham

Curso: ◆ Bioquímica y biología molecular

Trujillo-Perú 2022-0

Digestión de las proteínas e inhibición de las enzimas digestivas proteicas I.

INTRODUCCIÓN:

La digestión de las proteínas, o degradación hasta aminoácidos se inicia en la boca, en mínima cantidad, se continua en el estómago con la pepsina; pero es el páncreas que produce enzimas que cumplen un rol principal en este proceso conociéndose como enzimas proteolíticas. Entre estas se tiene a: tripsina, quimotripsina, elastasa y carboxipeptidasa; y las de origen intestinal: aminopeptidasas, dipeptidasas. Estas mismas enzimas se pueden clasificar a su vez como endopeptidasas: pepsina, tripsina, quimotripsina, elastasas y exopeptidasas: carboxipeptidasa y aminopeptidasa. La tripsina, es activada por la enterocinasa en el intestino, y es específica de los enlaces peptídicos sobre el lado carboxílico de residuos de aminoácidos básicos: lisina y arginina solamente. La quimotripsina es específica para los enlaces peptídicos de los aminoácidos sin carga como los aromáticos: tirosina, triptófano y fenilalanina. La elastasa tiene una especificidad amplia, ataca a los residuos de aminoácidos alifáticos neutros pequeños, como la glicina, alanina y serina. Las exopeptidasas catalizan la hidrólisis de enlaces peptídicos, uno a la vez, desde los extremos de péptidos. Las carboxipeptidasas, secretadas en el jugo pancreático, hidroliza el enlace peptídico carboxiterminal en las cadenas polipeptídicas. Todas ellas son sintetizadas como zimógenos y son activadas al ser liberadas a la luz del intestino para que actúen sobre las proteínas La falta de enzimas proteolíticas produce creatorrea (presencia de fibras musculares identificables en las heces, que provienen de la carne de los alimentos), y azorrea (gran cantidad de productos nitrogenados en las heces). En el lactante con ausencia congénita de tripsinógeno y por consiguiente por falta de activación de quimotripsinógeno y procarboxipeptidasa, existe hipoproteinemia, con retardo marcado del crecimiento.

II.

OBJETIVOS:

Demostrar la acción hidrolítica de las enzimas digestivas contenidas en el páncreas sobre la caseína o proteína de la leche, determinado los productos (aminoácidos) con ninhidrina.

III.

RESUL RESULT TADOS:

Primer experimento: Acción de enzimas digestivas pancreáticas sobre la caseína

Los tres tubos se encuentran en fase desnaturalizante, sin embargo, es el tubo 2, quien aún no ha perdido su naturaleza proteica, y sus cadenas peptídicas aún se encuentran juntas, creando estructuras semisólidas de color blanco.

Segundo experimento: Acción de la soya hervida y cruda sobre el efecto proteolítico de la tripsina

TUBO 1 y 2: No se liberan aminoácidos TUBO 3: Se liberan aminoácidos

TUBO 4: Ligeramente se presentan aminoácidos

IV IV..

INTERPRET INTERPRETACIÓN: ACIÓN: Primer experimento: Acción de enzimas digestivas pancreáticas sobre la caseína

En el tubo 1, presenta la proteína (caseína), la enzima proteolítica (extracto pancreático) y se encuentre en el ambiente adecuado (pH 8.0); por lo que hubo reacción enzimática evidenciándose cuando al agregar ninhidrina este tubo adoptó un color púrpura, lo cual indica que hay presencia de los aminoácidos. en una segunda fase se le agrega ácido tricloroacético, el cual es un ácido fuerte, que desnaturaliza a las proteínas, mostrándonos como resultado un precipitado de las proteínas (color blanquecino) En el tubo 2 y 3, estos no tuvieron presencia de extracto pancreático (enzimas) y caseína (Proteína), es decir no hubo reacción enzimática, lo cual se evidenció cuando en la segunda fase, se le agrega a estos tubos, ácido tricloroacético, el cual es un ácido fuerte, que desnaturaliza a las proteínas, mostrándonos como resultado un precipitado de las proteínas (color blanquecino), comprobando así que en los tubos 2 y 3 no hubo reacción y hay proteínas, respectivamente la caseína y las enzimas cuya estructura es proteica. La razón de utilizar la ninhidrina es que va a detectar, identificar los grupos amino libres presentes en péptidos y proteínas y se asociará con ellos, el grupo alfaamino de los aminoácidos que va a. formar complejos coloreados con la ninhidrina formado así un color púrpura, cabe resaltar que dependiendo de las cantidades de aminoácidos a reaccionar, va a variar las diferentes tonalidades de color púrpura, mientras más concentración de aminoácidos, mayor es la tonalidad del color púrpura.

Segundo experimento: Acción de la soya hervida y cruda sobre el efecto proteolítico de la tripsina En el tubo 1 y 2 se agregó la proteína de soya cruda, y solo en el primer tubo la solución de tripsina, al ser la soya cruda, dentro de esta tendrá la peptidasa activa por lo cual, tendrá la función de inactivar a la Tripsina, en consecuencia, no habrá actividad enzimática de las proteínas, evidenciándose, cuando agregan a estos dos tubos, etanol absoluto, el cual desnaturaliza a las proteínas, llegando a tornarse en un color blanquecino.

Los tubos 3 y 4 contienen la proteína de soya hervida y al tubo 3 se le agrega solución de tripsina y al 4 no. Por lo tanto, al tener soya en altas temperaturas, la peptidasa se encontrará de forma inactiva, por lo que la tripsina actúa sobre esta misma proteína de soya de forma normal, habiendo así actividad enzimática y comprobandolo en un segundo momento al reaccionar con la ninhidrina, estos tubos se tornarán de color púrpura, sobre todo el tubo 3 el cual contiene alta concentración de aminoácidos en el cual si se dio la reacción, indicando la presencia de aminoácidos libres. Mientras, que el tubo 4 presenta ligeramente la liberación de aminoácidos.

V.

CONCLUSIONES: ● El proceso metabólico de digestión tiene enzimas que degradan. ● Eventualmente algunas sustancias que ingresan junto con la proteína, pueden tener inhibidores que inhiben la reacción catabólica de la enzima, en consecuencia, no se producirían productos.

VI.

CUESTIONARIO:

1. ¿Cuáles fueron los objetivos de la práctica?

Los objetivos en la práctica fueron demostrar que a través de la digestión de las proteínas se puede demostrar la acción hidrolítica que estas poseen y la inhibición de las enzimas por agentes inhibidores de la proteína.

2. Identifique las variables que intervinieron en el experimento realizado en la práctica. Variables en el experimento N°01: ● Enzima proteolítica (extracto pancreático) ● Proteína (Caseína) ● Cuantificación de todos los aminoácidos (Ninhidrina) ● pH óptimo (Buffer fosfato 8.0) ● Desnaturalizante (Ácido tricloroacético) Variables en el experimento N°02: ● Enzima (Solución de tripsina) ● Proteína (Soya cruda) (Inhibidor antitripsina) ● Proteína (Soya hervida) ● Desnaturalizante (Etanol)

3. Explique el sitio de producción y la acción de las hormonas que intervienen en el proceso de digestión y absorción de

los aminoácidos

Familia de la gastrina: Gastrina, CCK- Pancreocimina Familia de la secretina: Secretina, Péptido inhibidor gástrico (PIG), Péptido intestinal vasoactivo (VIP) Otros: Motilina, Neurotensina, Sustancia P, Péptido liberador de la gastrina, Somatostatina,Glucagón Glicentina, Guanilina Encefalinas, TRH ACTH, Polipéptido pancreático PYY,Urogastrona. GASTRINA Precursor: preprogastrina Péptidos: G34, G17, G14 Origen: Células APUD (amine precursor uptake & decarboxilation) que son las células G del antro gástrico, células en el intestino delgado, células del páncreas que cuando hacen tumores son los gastrinomas responsables de la producción de grandes cantidades de ácido gástrico (síndrome de Zollinger-Ellison). También hay células que producen gastrina en hipófisis, hipotálamo, bulbo, nervio vago y nervio ciático. COLECISTOKININA (CCK) Péptidos: CCK 58, 39, 33, 12, 8 Origen: células de la parte superior del intestino, íleon y colon distal, corteza cerebral y nervios. SECRETINA Hay una sola molécula peptídica de estructura parecida al glucagón, PIG y VIP. Origen: células S del intestino superior, células enterocromafines y terminaciones nerviosas. PÉPTIDO INTESTINAL VASOACTIVO Péptido de 28 aminoácidos Origen: nervios del tracto gastrointestinal y sangre; encéfalo, en nervios autónomos coexiste con ACh.

4. Elabore un esquema con la digestión y absorción de

proteínas y aminoácidos.

5. Elabore un esquema mostrando transaminación e identifique los intervienen.

dos ejemplos de componentes que

Glutamato + Piruvato ↔ Alanina + α-Cetoglutarato

Glutamato + α-Cetoglutarato ↔ α-Cetoglutarato + α-aminoácido

6. Elabore un esquema mostrando desaminación e identifique los intervienen.

Serina ↔ Piruvato Treonina ↔ α-Cetobutirato

dos ejemplos de componentes que

7. ¿Cuál es la acción de la soya sobre la digestión de la proteína?

Su acción es actuar como inhibidor de tripsina ya que esta es una de las peptidasas encontradas en la soya. Este inhibidor es el único polipéptido que forma complejo estable y enzimáticamente inactivo con la tripsina gracias a la compatibilidad de sus enlaces peptídicos con el sitio activo de esta última, reduciendo la disponibilidad celular.

8. ¿Cuál es la razón de utilizar ninhidrina en el experimento de la digestión de las proteínas? La reacción con la ninhidrina produce colores que sirven como base para la cuantificación de todos los aminoácidos. A simple vista podemos distinguir una coloración que va de azul a violeta intenso.

9. ¿Qué ocurre si se trata con el calor la soya?

El inhibidor de la tripsina de la soya, es termolábil así que en la soja hervida pierde su capacidad de inhibir a la tripsina.

10. ¿Por qué el ovomucoide de la clara de huevo inhibe la acción de la tripsina? Se trata del factor antitrípsico, inhibe las proteínas por lo que se podrá asimilar los aminoácidos de la clara de huevo. Se encuentra en la clara de huevo cruda y es negativa para su digestión. Si se cuecen los huevos se elimina y su desgastabilidad es mejor. Asimismo, actúa como Ovo inhibidor, siendo la principal enzima antiproteasa de la clara de huevo, que bloquea tripsina y quimiotripsina, y así impide que se asimile los aminoácidos ingeridos y se desactive a 70 grados.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS: ● Sanz, M. Proteínas en nutrición artificial. S.f. Senpe.com [citado el 29 de enero 2022]. Disponible en: https://senpe.com/documentacion/monografias/senpe_mo nografias_proteinas_NE3. pdf 2. ● Transaminación [Internet]. Lifeder.com. 2020 [citado 29 de enero 2022]. Disponible en: https://www.lifeder.com/transaminacion/ ● Obando A. Las hormonas del tubo digestivo [Internet] S.f [Consultado 31 de enero de 2022] file:///C:/Users/Windows10/Downloads/art10%20(1).pdf...