Práctica 4. Fermetación alcoholica de diferentes sustrastos PDF

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Reporte de laboratorio. ...

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Introducción: La fermentación es un proceso catabólico de oxidación incompleta, que no requiere oxígeno, y el producto final es un compuesto orgánico. Según los productos finales, existen diversos tipos de fermentación. Fue descubierta por Louis Pasteur, quien la describió como la vida sin el aire. La fermentación típica es llevada a cabo por las levaduras. Los organismos anaerobios siguen la ruta metabólica de la glucólisis produciendo ácido pirúvico y posteriormente por acción de las enzimas piruvato descarboxilasa y alcohol deshidrogenasa, producen alcohol etílico. Durante la fermentación anaerobia se produce dióxido de carbono (CO2) por la descarboxilación del ácido pirúvico. Esta propiedad se aprovecha indirectamente para saber que la producción de etanol también está ocurriendo, con la prueba del etanol. La prueba de Azucares reductores (Fehling) se realiza para analizar la presencia y ausencia de azúcares reductores. Se fundamenta en el grupo carbonilo de las aldosas, pues tienen la estructura química abierta necesaria para actuar como agentes reductores. (Primo, 1995). El objetivo de esta práctica fue inducir la formación de etanol mediante la fermentación anaeróbica de diferentes hidratos de carbono con levaduras Sacharomyces cervisae. Método: 1. Preparar 25 mL de solución de sustrato al 10%. 2. Separar 3 mL en un tubo (tubo #1) para realizar la reacción de Fehling. 3. Suspender 5g de levadura en el volumen restante del sustrato. 4. Vaciar la mezcla en el sacarímetro y colocar un mechero cerca para generar un ambiente cálido. 5. Separar 2 mL en un tubo (tubo #2) para realizar la reacción de Fehling. 6. Anotar cada 5 minutos durante 15 minutos el volumen de CO₂ que se forma y graficar T(v).

Este método se llevó a cabo tres veces, cada una utilizando un sustrato distinto para comparar sus resultados. Los sustratos utilizados fueron: Glucosa, Sacarosa y Surculosa. Prueba de Fehling 1. Añadir 1 mL de reactivo de Fehling A y 1 mL de reactivo de Fehling B y agitar. 2. Calentar en baño María. Esta reacción se llevó a cabo en el tubo #1 y en el tubo #2. El color azul indica que la prueba fue negativa y el color rojo indica que fue positiva.

Prueba de etanol 1. Agregar en un tubo (tubo #3) 2 mL de muestra del sacarímetro. 2. Agregar 0.5g de dicromato de potasio y 2 mL de ácido sulfúrico. 3. Calentar en baño María. La formación de un compuesto de color de amarillo a verde indica la presencia de etanol.

Resultados y discusión A continuación se presenta gráficamente los resultados de la velocidad de fermentación de los distintos sustratos utilizados. 10 8 6 4 2 0 5 min

10 min Glucosa

15 min Sucralosa

20 min Sacarosa

Gráfica 1: velocidad de fermentación

Fig 1 Glucosa fermentándose en sacarímetro

Como podemos observar, la sacarosa fue el sustrato con mayor velocidad de fermentación, esto puede ser debido a que está formada por dos azucares (glucosa y fructosa) y al fermentarse lleven a cabo la reacción más rápido, a diferencia de la glucosa que está formado solo por una molécula. (Ratser. 2012).

Tabla 1: Primera prueba de Fehling

Glucosa Sacarosa Sucralosa

Conclusión: Se cumplió con el objetivo, ya que dentro de nuestra práctica observamos laformación de etanol mediante la fermentación anaerobia, así como también comprendimos el comportamiento anaeróbico de esta levadura, analizando su eficiencia para asimilar ciertos carbohidratos. La fermentación tiene bastante importancia ya que ha sido utilizada por el ser humano en la producción de cerveza, vino, pan y procesos que implican el uso de bacterias o levaduras con el fin de convertir un producto natural en un producto fermentado.

Referencias:

Rojo ladrillo (+) Azul intenso (-) Rojo intenso (+)



Primo, E. (1995). Química orgánica básica y aplicada: De la molécula a la industria. Barcelona: Editorial Reveles.



Ratser. (2012). “La definición de azúcares reductores”. Consultado de: http://www.ratser.com/la-definicion-deazucares-reductores/

Tabla 1: Resultados antes de la fermentación.

La prueba para azucares reductores es positiva para la glucosa y la sucralosa. La glucosa reacciona principalmente con los aldehídos porque tienen un grupo carbonilo más expuesto, que le da el carácter reductor, y existe la presencia del precipitado rojo ladrillo (óxido cuproso). En cambio la sacarosa dio resultados negativos. Esto se da porque es un azúcar constituida por una molécula de glucosa y de fructosa, tiene un enlace entre el primer carbono de la glucosa y el segundo carbono de la fructosa, y no queda grupos reductores disponibles. Tabla 2: Segunda prueba de Fehling y presencia de etanol

Glucosa Sacarosa Sucralosa

Fehling Naranja (+) Amarillo (+) Naranja (+)

Etanol Verde (+) Verde (+) Verde (+)

Tabla 2: Resultados después de la fermentación.

Tras la fermentación, las moléculas de glucosa y fructosa de la sacarosa se separan, dando como resultado la presencia de azúcares reductores. La glucosa y la sucralosa siguieron reflejando resultados positivos antes y después de la fermentación. Sin embargo, la única diferencia fue un ligero cambio de coloración. Los resultados de la prueba de etanol fueron positivos en los 3 sustratos tras la fermentación....