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REPORTE PRÁCTICA 1 y 2: “EL MICROSCÓPIO”...

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UNIVERSIDAD AUTÓNOMA DE NAYARIT Área de Ciencias de la Salud UNIDAD ACADÉMICA DE MEDICINA

LABORATORIO BIOLOGÍA CELULAR REPORTE PRÁCTICA 1 y 2: “EL MICROSCÓPIO”

Docente: David Ávila Jiménez

EQUIPO 1: Granados Bernal Ricardo Yair Luna Moreno Jovani Miguel Mejía Hernández Valeria Yamilet Trejo Arroyo Alejandra Stefanía 1°C Turno vespertino

Resultados

Fig. 4. Microscopio electrónico de transmisión

Fig. 2. Microscopia electrónica de transmisión

Fig. 3. Microscopio electrónico de barrido

Discusión El microscopio electrónico de barrido (SEM) es un instrumento capaz de ofrecer un variado rango de informaciones procedentes de la superficie de la muestra. Su funcionamiento se basa en barrer un haz de electrones sobre un área del tamaño que

deseemos (aumentos) mientras en un monitor se visualiza la información que hayamos seleccionado en función de los detectores que hayan disponibles. Universidad Politécnica de Valencia. (2012). Microscopia electrónica de barrido. 2018, de Servicio de Microscopia Electrónica Sitio web: http://www.upv.es/entidades/SME/info/753120normalc.html

El microscopio electrónico de transmisión (TEM) es un instrumento que aprovecha los fenómenos físico-atómicos que se producen cuando un haz de electrones suficientemente acelerado colisiona con una muestra delgada convenientemente preparada. Cuando los electrones colisionan con la muestra, en función de su grosor y del tipo de átomos que la forman, parte de ellos son dispersados selectivamente, es decir, hay una gradación entre los electrones que la atraviesan directamente y los que son totalmente desviados. Todos ellos son conducidos y modulados por unas lentes para formar una imagen final sobre una CCD que puede tener miles de aumentos con una definición inalcanzable para cualquier otro instrumento. La información que se obtiene es una imagen con distintas intensidades de gris que se corresponden al grado de dispersión de los electrones incidentes.

La imagen del TEM tal como se ha descrito ofrece información sobre la estructura de la muestra, tanto si ésta es amorfa o cristalina.

Además, si la muestra es cristalina, es decir, hay una estructura de planos periódica, puede ocurrir que varias familias de esos planos cumplan la condición de Bragg y difracten de forma coherente la onda electrónica incidente. Esto da lugar a un diagrama de difracción, que es una imagen de distintos puntos ordenados respecto a un punto central (electrones transmitidos no desviados) que nos aportan información sobre la orientación y estructura del/los cristales presentes. Universidad Politécnica de Valencia. (2012). Microscopia electrónica de barrido. 2018, de Servicio de Microscopia Electrónica Sitio web: http://www.upv.es/entidades/SME/info/753329normalc.html

Semejanzas y diferencias entre la microscopía electrónica y la microscopia de luz Semejanzas (fig. 5-12): • Diseño y funciones de sus elementos. • En relación al sistema de iluminación: La radiación empleada incide directamente sobre la muestra en estudio. Está conformado por una fuente emisora de la radiación y un condensador que enfoca el rayo sobre el preparado histológico. • El espécimen se coloca entre el sistema de iluminación y los objetivos o sistemas de formación de la imagen. • En relación al sistema óptico: Las lentes acopladas producen una imagen aumentada del espécimen en estudio. Conformado por una lente objetivo que forma una imagen

intermedia y la lente proyectora (ocular, en el caso del microscopio fotónico) que a su vez aumenta la imagen intermedia para formar la imagen aumentada final. • Pueden convertir la radiación empleada en una imagen permanente (microfotografía).

Fig. 5-12 Comparación de tres tipos de microscopios y sus características más resaltantes.

Tomado de Gartner L Hiatt J (2002) Texto Atlas de Histología (95)

Diferencias: Tabla 5-2 Elemento

LENTES

Microscopio fotónico

Microscopio electrónico

De cristal o vidrio, con Magnéticas, a partir de distancias focales fijas metales magnéticos, alambre de cobre enrollado, cuya distancia focal varía en relación con la corriente que pasa por la bobina de cobre

AUMENTO

Se consigue cambiando los objetivos, rotando el revólver

Pequeña, por lo que se pueden ver PROFUNDIDAD diferentes planos de DE CAMPO enfoque al mover el tornillo micrométrico

FUENTE DE LA RADIACIÓN

Haz de luz: fotones. Generalmente situada por debajo del espécimen (aunque hay excepciones)

ALTO VACÍO

No es necesario

RESOLUCIÓN

0,2 µm

El aumento del objetivo es fijo (distancia focal) mientras que la distancia focal de la lente proyectora varía para lograr los aumentos

Mayor, por lo que se puede ver enfocado todo el espesor del corte ultrafino del espécimen

Haz de electrones. Ubicada siempre en lo alto del instrumento, por encima del espécimen Imprescindible, para facilitar el desplazamiento de los electrones 0,2nm

Figura 5-12.-Comparación de tres tipos de microscopios y sus características más resaltantes. Prof. Daniel J. Narváez Armas. (N). LA MICROSCOPÍA: HERRAMIENTA PARA ESTUDIAR CÉLULAS Y TEJIDOS. 2018, de Medic.ula.ve Sitio web: http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitulo5.ht m

CONCLUSIÓN Gracias a la realización de esta práctica, podemos saber que existen distintas clases de microscopios y que sus funciones son un poco diferentes unos de otros, ya que algunas muestras utilizan colorantes y otras no. Estamos satisfechos

con los conocimientos adquiridos en esta práctica ya que pudimos apreciar los distintos usos de ellos. CUESTIONARIO 1. ¿CUÁNTOS TIPOS DE MICROSCOPIOS EXISTEN? Es difícil definir una cantidad exacta ya que existen distintos tipos de microscopios y también muchos criterios para clasificarlos:

Microscopios según el sistema de iluminación 1) Microscopio óptico 2) Microscopio electrónico 3) Microscopio de luz ultravioleta 4) Microscopio de luz polarizada 5) Microscopio de fluorescencia Microscopios según el número de lentes 1) Microscopio simple 2) Microscopio compuesto Microscopios según la transmisión de la luz 1) Microscopio de luz transmitida 2) Microscopio de luz reflejada Microscopios según el número de oculares 1) Microscopio monocular 2) Microscopio binocular 3) Microscopio trinocular Microscopios según la configuración de los elementos Microscopios digitales Microscopio estereoscópico Otros tipos de microscopios 1) Microscopio confocal 2) Microscopio de campo oscuro 3) Microscopio de contraste de fases

médico, como la histopatología de los tejidos. Microscopio de campo oscuro: utilizado para ver células vivas en las cuales no se aplicaron sustancias fijadoras ni colorantes como las bacterias, protozoarios, entre otros. Microscopio de contraste de fases: es el más utilizado para observar estructuras o objetos transparentes que no fueron teñidos ya que facilita la distinción de componentes y funciones que realizan ciertas células vivas. Microscopio de contraste por interferencia diferencial (Nomarsky): utilizado para visualizar especímenes no coloreados y ttransparentes ya que permite obtener información sobre la densidad de la muestra y apreciar detalles prácticamente invisibles al ojo humano. Microscopio de luz polarizada: también es utilizado para observar células vivas. Microscopio de fluorescencia o de radiación ultravioleta: permite demostrar por la radiacón luminosa que emiten partículas muy pequeñas que con otros microscopios no pueden ser apreciados con facilidad. Microscopio tridimensional de rastreo confocal: se obtienen imágenes nítidas de los microscopios de fluorescencia, de transmisión y de epifluorescencia con

gran capacidad de resolución y sin que se produzca fotooxidación por fluorocromo. Con este se pueden observar en tres dimensiones y rotarse para visualizar desde distintos ángulos Microscopio electrónico de transmisión: se utiliza para obtener imágenes de alta resolución (entre 0.5 y 1.0 nanómetros) Microscopio electrónico de barrido: Es utilizado para observar la superficie (surcos, grietas, depresiones, etc) de la célula deshidratada. BIBLIOGRAFÍA 

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Universidad Politécnica de Valencia. (2012). Microscopia electrónica de barrido. 2018, de Servicio de Microscopia Electrónica Sitio web: http://www.upv.es/entidades/SME/info/753120normalc.html Universidad Politécnica de Valencia. (2012). Microscopia electrónica de barrido. 2018, de Servicio de Microscopia Electrónica Sitio web: http://www.upv.es/entidades/SME/info/753329normalc.html Prof. Daniel J. Narváez Armas. (N). LA MICROSCOPÍA: HERRAMIENTA PARA ESTUDIAR CÉLULAS Y TEJIDOS. 2018, de Medic.ula.ve Sitio web: http://www.medic.ula.ve/histologia/anexos/microscopweb/MONOWEB/capitu lo5.htm MUNDO MICROSCOPIO. Sitio Web: https://www.mundomicroscopio.com/tipos-de-microscopios/

RESULTADOS

FIG. 2 OCULARES FIG. 1 MICROSCOPIO COMPUESTO

FIG. 4 OBJETIVOS 4X, 10X, 40X, 100X FIG. 3 CABEZAL

FIG. 5 TORNILLO DE MOVIMIENTO DE PLATINA MOVIL, TORNILLOS MACRO Y MICROMETRICOS

FIG.6 PLATINA

FIG. 7 DIAFRAGMA, CONDENSADOR

FIG.8 FUENTE DE LUZ

DISCUSIÓN

FIG.9 FOCO

FIG. 1. El microscopio es un instrumento que permite observar objetos que son demasiado pequeños para ser observados a simple vista, es una pieza clave y elemental en un laboratorio. Se compone de tres partes: 

Parte mecánica: está formado por aquellas piezas que no intervienen en la formación de la imagen ni en el camino de la luz (Base o pié, columna, tubo, platina, tornillos micro y micrométrico).



Parte óptica: incluye todos los elementos que colaboran en la ampliación de la imagen (ocular, objetivos).



Sistema óptico: incluye todos los elementos que colaboran en la ampliación de la imagen (condensador, diafragma, fuente luminosa).

FIG. 2. Los oculares están formados por un sistema de lentes convergentes. En la imagen se aprecian dos oculares (binoculares). Su función es la de aumentar la imagen proyectada por el objetivo. FIG 3. El cabezal es un componente situado en relación con el tubo del microscopio, contiene los oculares que permiten visualizar la imagen. FIG. 4. Los objetivos son un sistema de lentes ubicadas en la parte inferior del tubo. Son considerados los elementos más importantes en la formación de la imagen microscópica. Existen dos tipos de objetivos: los objetivos en seco y los objetivos de inmersión. Los objetivos a seco son aquellos en los que entre la lente y el objeto existe una pequeña capa de aire. Este tipo de objetivos son los de menor aumento. Los objetivos a inmersión son aquellos en los cuales se interpone entre la lente y el

objeto un líquido (aceite de cedro) el cual tiene un índice de refracción que es semejante al del cristal de la lente. FIG. 5. El tornillo de movimiento de platina móvil permite mover la preparación de delante hacia atrás o de izquierda a derecha y viceversa. Los tornillos macro y micrométricos, ambos permites el desplazamiento de la platina hacia arriba y hacia abajo con la finalidad de acercar o alejar la preparación hacia los objetivos y así conseguir un enfoque óptimo de la imagen. FIG. 6. La platina es el lugar donde se coloca el material a observar, el cual está sustentado en un portaobjetos. La platina presenta una abertura central, a través de la cual pasa la luz, y un carro mecánico que permite movilizar el preparado. Esto se realiza por medio de un tornillo de desplazamiento lateral y anteroposterior. FIG 7. La función del diafragma es graduar la cantidad de luz que reciba el objeto. El condensador recibe la luz y la intensifica, permitiendo una mayor claridad de la imagen. FIG. 8. La fuente de luz es una lámpara halógena de intensidad graduable, está situada en el pie del microscopio. Se enciende y se apaga con un interruptor. FIG 9. El foco es una parte importante del microscopio, no se debe tocar, pues se ocasionara daño y no podrá ser utilizado más, emite la luz a la fuente de luz.

CONCLUSIÓN Gracias a la realización de esta práctica, aprendimos las partes del microscopio, el funcionamiento de cada una, así como datos importantes, por ejemplo, qué partes no se deben tocar, y por qué razón, así como también aprendimos como se puede enfocar una muestra.

Estamos satisfechos al realizar la practica ya que sentimos que si se cumplieron nuestros objetivos, del conocimiento del microscopio y sus partes.

CUESTIONARIO 1) ¿Cuáles son microscopio?

las

partes

más

importantes

del

Nosotros consideramos que todas las partes que conforman el microscopio son importantes, ya que sin alguna de ellas no habrá un adecuado funcionamiento, por ejemplo sin la base no se podría sostener el microscopio y sin las lentes no se podría enfocar una muestra u objeto.

2) ¿Cuáles son las partes del microscopio que no se pueden tocar? Los lentes (como los objetivos y oculares) no se pueden tocar porque el sudor los daña, también no se puede tocar el foco o bombilla.

3) ¿Cuántas partes componen al microscopio? Cada autor tiene un número de partes diferentes, pero más o menos son 15 partes, las cuales se dividen en el sistema mecánico y en el sistema óptico, Dentro del sistema mecánico se encuentran:      

La base El brazo Cabezal Platina Tubo óptico Revólver

   

El porta condensador Tornillo macrométrico Tornillo micrométrico Desplazamiento de platina

Dentro del sistema óptico se encuentran:     

Objetivos Oculares Condensador Espejo Sistema de iluminación

4) Describe como se enfoca una muestra.

1. Se coloca la platina abajo, y sobre esta se coloca el portaobjetos con la muestra cubierta con un cubreobjetos. 2. Se coloca primero el objetivo de menor aumento (4x). 3. Mirando fuera del microscopio, subimos la platina hasta que la laminilla quede cerca del objetivo, después miramos por el ocular y rectificamos con el tornillo macrométrico, y después enfocamos con el tornillo micrométrico. 4. Después nos pasamos a los objetivos sucesivos (10x, 40x y 100x). 5. Mientras vayamos enfocando con objetivos de mayor aumento, se va subiendo la platina hasta que la preparación esté muy cerca del objetivo. 6. Sin embargo los objetivos no deben tocar la muestra, con excepción del objetivo de 100x. 7. Cuando se usa el objetivo de 100x, se debe usar aceite de inmersión.

8. Después de realizar la observación se coloca el objetivo de menor aumento antes de retirar la preparación. 9. Si se utilizó el objetivo de inmersión con su aceite se debe limpiar el objetivo con papel especial.

BIBLIOGRAFÍA

 Cesar E. Montalvo Arenas. (Agosto de 2012). MICROSCOPÍA. México. UNAM Recuperado de http://histologiaunam.mx/descargas/ensenanza/portal _recursos_linea/apuntes/2_microscopia.pdf  María Isabel Pérez Aguilar. (07 de agosto de 2013). El Microscopio: Equipo fundamental en el Laboratorio de Biología. México. Universidad Autonoma del Estado de Hidalgo Recuperado de https://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/prepa3/n1/m9. html  Escuela europea de Luxemburgo. (s. f.). El microscopio. Recuperado de http://www.euroschool.lu/prof.montilla/ficheroactivi/acti vidades3/El%20microscopio.pdf...