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Componente practico: Laboratorio PresencialCurso Biología Celular y MolecularCódigo 151009Integrantes:Paola Miranda1102549242Diana RuedaCódigo estudiante 2Karina RuedaCódigo estudiante 3Presentado a: Rolando Diaz DiazCead BucaramangaUnad - octubre 05 - 2019INTRODUCCIONEl presente informe se muestra ...

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1 Componente practico: Laboratorio Presencial

Curso Biología Celular y Molecular Código 151009 Integrantes: Paola Miranda 1102549242 Diana Rueda Código estudiante 2 Karina Rueda Código estudiante 3

Presentado a: Rolando Diaz Diaz

Cead Bucaramanga Unad - octubre 05 - 2019

INTRODUCCION

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El presente informe se muestra a través de la realización de un taller, las diferentes actividades realizadas en el laboratorio y que es un complemento a la materia Biología molecular que estamos cursando. Este trabajo muestra la experiencia del laboratorio agrupado en siete prácticas. La primera llamada bioseguridad abordamos el concepto de dilución de hipoclorito para la desinfección y los diferentes elementos del laboratorio con su respectiva utilidad, definimos bioseguridad importante para la realización de la práctica. La segunda practica del laboratorio llamada microscopía mostramos todos los montajes húmedos para observación, en los que observamos, agua estancada, hebra hilo, papel milimetrado, en esta práctica se pueden observan tanto fotos como conceptos. En la tercera practica abordamos el tema célula: crenación, citólisis, plasmólisis y turgencia”, donde a través de diferentes montajes pudimos observar estos fenómenos. La cuarta practica se aborda el tema de permeabilidad selectiva del eritrocito. La quinta practica se aborda el tema de Mitosis y Meiosis reconocemos el ciclo celular, los cromosomas y genes. Apreciamos el proceso de división celular por mitosis con sus fases: interface, profase, metafase, anafase, telofase. También el proceso de división celular por Meiosis. La sexta practica abordamos la Extracción de ADN. Y en la séptima practica abordamos el tema de Genética humana.

OBJETIVOS GENERAL

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La guía de prácticas del curso de Biología Celular y Molecular tiene como objetivo dar herramientas al estudiante para comprender las propiedades, estructura, funciones, orgánulos celulares y las interacciones químicas, genéticas, con el ambiente y su ciclo vital desarrollando su pensamiento científico y crítico respecto a las relaciones que se dan en la Biología celular y Molecular.

OBJETIVOS ESPECIFICOS •

Conocer las normas de bioseguridad en el laboratorio.

•

Comprender el funcionamiento del microscopio y reconocer los diferentes poderes del microscopio mediante diferentes montajes.

•

Aprender a hacer los montajes o preparaciones húmedas y las principales sustancias usadas. Reconocer las principales funciones del microscopio y comparar sus propiedades de resolución, ampliación y penetración.

•

Observar los fenómenos de hipotonía, isotonía e hipertonía en células animales y vegetales.

•

Observar la función de los lisosomas de manera análoga en ciliados.

•

Aprender a diferenciar los periodos del ciclo celular.

DESARROLLO DE LAS PRACTICAS

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UNIDAD 1: NATURALEZA DE LAS CIENCIAS 

PRÁCTICA NO.1: BIOSEGURIDAD

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: Conocer y cumplir las principales normas de seguridad e higiene que se deben seguir en el laboratorio, con el fin de evitar posibles riesgos, tanto como para las personas y el medio ambiente. Presentación de resultados y Cuestionario: 1.

Defina los conceptos de bioseguridad, limpieza, contaminación, desinfección, descontaminación y esterilización.

Rta: Bioseguridad: es un conjunto de normas, medidas y protocolos que son aplicados en múltiples procedimientos realizados, para conservar la salud y seguridad del personal que labora en el laboratorio. Limpieza: acción de eliminar la suciedad, con el propósito de disminuir o exterminar los microorganismos en la piel o en algún objeto. Contaminación: Las actividades que diariamente realizan los seres humanos originan desechos que son depositados al ambiente (suelo, aire, agua), provocando, en muchos casos, daños. Es la presencia en el ambiente de cualquier agente (físico, químico o biológico) que lo haga menos favorable al desarrollo de los seres vivos. Desinfección: Proceso químico que mata o erradica los microorganismos sin discriminación, tales como bacterias, virus y protozoos.

Descontaminación: metodología específica para eliminar y controlar cualquier material

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contaminante. Esterilización: Es la eliminación o muerte de todos los microorganismos que contiene un objeto o sustancia, y que se encuentran acondicionados de tal forma que no pueden contaminarse nuevamente. 2. ¿Cómo puede usted evitar en el laboratorio daños a su salud? Rta: Principalmente, atendiendo y respetando las normas básicas de bioseguridad. En general, quiere decir que debemos evitar todo contacto de reactivos y materiales con la piel, no llevar nada a la boca durante las prácticas, usar la bata blanca, guantes y tapabocas, lavar bien las manos luego de cada experimento y al salir del laboratorio. También es muy importante conocer previamente las características y uso de cada elemento y reactivo y materiales infecciosos usados en el laboratorio. Finalmente, podríamos agregar que es muy importante para nuestra seguridad y la de los demás, el mantener el lugar aseado. 3. Teniendo en cuenta la fórmula V1xC1=V2xC2; en una tabla presente diluciones al 0.5%, 1%, 1.5% y 5% de hipoclorito de sodio que tiene una concentración inicial de 10% y un volumen inicial de 1 litro, indicando la concentración inicial, concentración final, volumen inicial de hipoclorito, volumen de agua y volumen final para cada dilución. Rta:

Volumen

Concentración

Volumen final Concentración

Inicial (C1)

inicial de

Volumen de para la

Final (C2)

Hipoclorito

10%

agua (ml)

6

dilución (V2) (V1)

100.000 ppm

5.000 ppm

50 ml

5.000 ppm

950 ml

100.000 ppm

10.000 ppm

100 ml

10.000 ppm

900 ml

100.000 ppm

15.000 ppm

150 ml

15.000 ppm

850 ml

100.000 ppm

50.000 ppm

500 ml

50.000 ppm

500 ml

4. En una tabla, compare e identifique las características principales tales como descripción, uso, cuidados y breve fundamento científico de su funcionamiento de los equipos espectrofotómetro, balanza y microscopio. Rta: Nombre

Descripción

Uso

Cuidados

Espectrofotó metro

Este instrumento tiene la capacidad de proyectar un haz de luz monocromática a través de una muestra y medir la cantidad de luz que es absorbida por dicha muestra.

Se usa para el análisis químico que sirve para medir la cantidad de intensidad de luz absorbida después de pasar a través de una solución muestra.

Limpieza de los filtros y fuentes de luz. Verificar instalaciones eléctricas. Colocar el instrumento en un lugar libre de vibraciones, humedad, calor excesivo o luz directa. Proteger el instrumento del polvo. Permitir que el instrumento se caliente antes de usarlo.

Grafico

Balanza

Es un equipo que tiene importancia en el laboratorio, ya que de su buen uso depende la exactitud en la preparación de reactivos, estándares y productos del laboratorio como tal.

La balanza es la que nos proporciona mayor exactitud, es por eso que es usada de preferencia en ambientes como los laboratorios clínicos y de investigación, en donde se requiere de gran precisión en la medida

Limpiar la balanza de salpicaduras y derrames, estando apagada. Verificar siempre la nivelación de la balanza. Al encender dejarla estabilizar mínimo 10 minutos. Revisar la capacidad máxima del equipo. No pesar sustancias corrosivas, calientes o que puedan degradar el interior de la balanza.

Microscopio

El microscopio es un instrumento óptico que aumenta la capacidad de observación a niveles de acercamiento tal que hasta hace posible el análisis de partículas. La imagen que se obtiene es realmente una investigación sobre la composición de los objetos

El uso de este puede ser en escuelas, laboratorios clínicos, hospitales, industrias farmacéuticas, industrias biológicas e industria alimentaria. El uso del microscopio nos permitirá tener una imagen aumentada del objeto.

Si hay necesidad de mover el microscopio de un sitio a otro, este se debe sostener en posición vertical, y tomarlo por el brazo y por la base, que son las partes más sólidas del equipo. Limpiar los lentes y los objetivos antes y después de su uso con papel de arroz. Siempre al iniciar se debe observar el montaje con el objetivo de menor aumento y con la platina abajo. Siempre dejar apago el equipo

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antes desenchufar.

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de

1. En una tabla identifique el nombre, uso y elabore el gráfico de los siguientes materiales de uso en el laboratorio de Biología celular y molecular: Nombre

Tubo de ensayo

Erlenmeyer

Aceite de inmersión

Descripción

Uso

Es de forma cilíndrica alargada generalmente de vidrio, su base tiene una forma de ¨u¨ redondeada.

Se utiliza principalmente como contenedor de líquidos y sólidos a los cuales se les va a someter a pruebas.

Recipiente de vidrio, tiene forma de cono y un cuello cilíndrico, es plano por la base.

Se utiliza para calentar líquidos cuando hay peligro de perdida por evaporación.

Tiene un índice de refracción similar al de vidrio del cubreobjetos.

Sirve para aumentar la resolución de un microscopio mediante la inmersión del lente objetivo y el espécimen en un aceite transparente de alto índice de refracción.

Gráfico

Nombre

Descripción

Uso

Embudo

Es una pieza cónica de vidrio o plástico, empleado para canalizar líquidos y materiales granulares en recipientes con bocas estrechas.

Se utiliza para el trasvasijado de productos químicos desde un recipiente a otro.

Pinzas

Son un tipo de sujeción ajustable generalmente de metal.

Sirve para sujetar diferentes objetos de vidrio, o realizar montajes más elaborados.

Gradilla

Es un equipo de laboratorio para mantener de forma vertical a múltiples tubos de ensayos al mismo tiempo.

Se utiliza para sostener y almacenar gran cantidad de tubos de ensayos o tubos Esspendorf.

Cápsula

Es un pequeño contenedor semiesférico con un pico en su costado. Existen diferentes tamaños y formas.

Se utiliza para evaporar el exceso de solvente en una muestra.

Es un utensilio compuesto de un recipiente cóncavo y una maneta. Se encuentran hechos de madera,

Se usa para triturar ciertos ingredientes hasta convertirlos en una especie de polvo o en pedazos muchos mas pequeños.

Mortero

Gráfico

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Nombre

Descripción

Uso

porcelana, piedra y mármol. Es un recipiente de vidrio cilíndrico Vaso de precipitado borosilicatado fino con un fondo plano.

Se utiliza para preparar o calentar sustancias, medir o traspasar líquidos.

Probeta

Es un instrumento de platico o de vidrio. Tubo transparente que incluye una graduación para que el observador pueda saber que volumen ocupa la sustancia albergada en su interior.

Se utiliza para contener y medir un líquido o un gas.

Laminas portaobjetos

Es una placa fina de cristal sobre el cual se disponen objetos para su examen microscópico.

Se coloca sobre un objeto que va ser observado bajo el microscopio.

Laminas cubreobjetos

Es una fina hoja de material transparente de planta cuadrada o rectangular.

Sirve para cubrir los objetos que estén en el portaobjetos.

Gráfico

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Nombre

Descripción

Papel de arroz o papel para limpieza de lentes

Ligero y sin pelusas proporciona la solución ideal para la eliminación de polvo, humedad o grasa presente en las superficies ópticas de microscopia.

Uso

Gráfico

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Se utiliza para limpieza de lentes y cubetas y como papel protector de esmerilados metalográficos.

Análisis Reconocemos que el cumplimiento de normas de seguridad es tan importante en un laboratorio como en la vida cotidiana. Así mismo, que el rigor en la experimentación científica empieza desde el momento en que entramos al laboratorio, y que, en gran medida, tener en cuenta las normas de bioseguridad, garantizan el éxito en los resultados. Es importante resaltar que la vida propia y la de los demás está en juego a cada instante en un laboratorio de biología, eso sustenta la necesidad de practicar las normas de bioseguridad.

UNIDAD 2: CÉLULA:



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PRÁCTICA NO.2: MICROSCOPÍA

OBJETIVOS DE LA PRÁCTICA: Conocer como es el funcionamiento del microscopio. Además de identificar cada uno de los componentes del mismo. PROCEDIMIENTO: 1. IDENTIFICACIÓN DE LAS PARTES DEL MICROSCOPIO 

Tome el microscopio asignado e identifique las partes, escribiéndolas en el recuadro correspondiente. Oculares

Tubo Revolver Brazo Pinzas Tornillo Macrométrico Tornillo Micrométrico Encendido/apagado Base

Objetivos Platina Condensador Diafragma Fuente o foco de luz

1. Funciones del Microscopio Partes del microscopio Fuente de Luz Condensador Diafragma

Función Dirige los rayos luminosos hacia el condensador, puede tener una especie de anillo para colocar filtros que facilitan la visualización. Lente que concentra los rayos luminosos sobre la preparación situado bajo la platina. Cortinilla que regula la cantidad de luz que entra en el condensador, eliminando los rayos demasiado desviados. Se acciona mediante una perilla. Este situado debajo de la platina.

Platina y pinza

Objetivos

Oculares Tornillo Macrométrico Tornillo Micrométrico Revolver

13 Platina: Plataforma horizontal, con un orificio central, sobre el que se coloca la preparación, que permite el paso de los rayos procedentes de la fuente de iluminación situado por debajo. Pinza: Sirven para sostener el portaobjetos o preparación sobre la platina. Lentes que amplían la imagen de la preparación, generan una imagen real, invertida y aumentada. Los más frecuentes son 4, 10, 40 y 100 aumentos. El de 100x o de inmersión utiliza aceite de cedro sobre la preparación para observar láminas coloreadas. Lentes que amplían la imagen del objetivo, se sitúan cerca del ojo. Permite un enfoque aproximado o grueso de la muestra al alejar o acercar el tubo y la platina moviéndola de arriba hacia abajo y viceversa. Sirve para dar claridad a la imagen al lograr un ajuste fino y preciso. Pieza metálica situada en la parte inferior del tubo, inserta los objetivos, al girarla permite el cambio de objetivo.

Cuestionario 1. Elaborar los esquemas correspondientes para cada una de las preparaciones.

2. Cada esquema debe incluir: título, aumento y además señalar las distintas estructuras celulares que se observen. Rta: MONTAJE

4X

10X

40X

100X

Se enfoca directamente una de las partículas vistas en 10x pero aún o se define

Se observa un protozoo que es muy encontrarlos en aguas estancadas

AGUA ESTANCADA

Se observan fibras y partículas contenidas en la gota de agua.

Se observa en más detalle lo que puede ser una especie de

MONTAJE

4X

habitad en el agua ningún micro estancada. organismo. 10X 40X

que contienen materia orgánica en descomposició n y que son ricas en sustancias nutritivas. 100X

Hebra de hilo

Se aprecia que el Se observan hilo las fibras del está hilo y como se conformado encuentran Por unas trenzadas. De fibras aún Textura fibrosa. más delgadas que al entrelazaren forman el hilo inicial.

Se observa los dos hilos Sobrepuestos, se ven los espacios entre las fibras que lo componen y a la vez las microfibras que componen a estas.

Casi no se diferencia el hilo a no ser por el color rojo de uno. Es la microfibra en un tamaño muy amplio.

No aplica

Papel milimetrado

Diámetro aproximado del campo visual 4.5mm.

Diámetro aproximado del campo visual 1.7mm.

Diámetro aproximado del campo visual 0.5mm.

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3. Investigue qué organismos pueden observarse en la gota de agua estancada, incluya nombre, descripción y figura. Rta: Mayormente podemos apreciar los paramecios (género Paramecium) que son protozoos ciliados con forma ovalada, que abundan en aguas dulces estancadas con abundante materia orgánica, como charcos y estanques. “Son probablemente los seres unicelulares mejor conocidos y los protozoos ciliados más estudiados por la Ciencia. El tamaño ordinario de todas las especies de paramecios es de apenas 0.5 milímetros”. (blogs, 2015, párr. 1).

4. ¿Son todos de igual tamaño y forma? Explique su respuesta Rta: No, hay uno en forma ovalado y otros en formas de uvas pasa. 5. ¿Se observan organismos móviles o estáticos? Explique su respuesta. Rta: Móviles, es un organismo vivo llamado protozoo que se mueve hacia todos lados. 6. Para las muestras de la letra, la hebra de hilo observadas determine: 

¿Cómo se manifiesta el poder de resolución?

Rta: Las mejores imágenes para nuestro concepto fueron en la resolución 10x, pues se puede apreciar bien la textura del hilo y de la tinta de las letras. “El poder de resolución del microscopio es la capacidad de los lentes de mantener separado dos puntos que a simple vista parece uno solo”. (Armas, Sf, Capitulo 3). En 40x y 100x la letra se distorsiona y el hilo sigue estando compacto y se observan las fibras en las terminaciones. 

¿Cómo se manifiesta el poder de aumento?

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Rta: En 40x y 100x se distorsiona la tinta y la forma de la letra, mientras en el hilo se pueden

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observar el color de base del hilo, los micro cortes y el color. “Cada sistema de lentes es capaz de producir una imagen aumentada cuyo valor se enuncia con la letra x, así que 10x significa que la imagen está aumentada 10 veces”. (Armas, Sf, Capitulo 3). 

¿Cómo se manifiesta el poder de definición?

Rta: En 40x y 100x la letra ya la letra no tiene forma, mientras el hilo sigue manteniendo la forma y se observa mejor las fibras que lo compone. 

¿Cómo se manifiesta el poder de penetración o profundidad?

Rta: En la letra se observa que traspasa la tinta y se alcanza a ver el papel en la cual fue impresa, y en el hilo no se alcanzan a ver las fibras a profundidad. Podemos decir que la penetración o profundidad es la capacidad que tiene el microscopio de permitir la observación de diversos planos del objeto estudiado de manera simultánea.

7. ¿Cuál es la utilidad del microscopio en el campo de la biología y las ciencias en general? Rta: Es un instrumento que permite ampliar objetos extremadamente pequeños para posibilitar su observación. 8. Fuera de las estructuras u organelas que se observaron, hay otras que no se hicieron visibles, explique ¿Por qué y cómo podrían observarse? Rta: Por el tamaño y el aumento en el cual tengamos nuestro objetivo. 9. Enuncie al menos 5 diferencias generales entre las células animales y vegetales. Rta:

1. Pared celular: en la cél...