Practica 1 Determinacion de Glucosa Sanguinea PDF

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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NAYARIT UNIDAD ACADEMICA DE MEDICINA Laboratorio de Bioquímica Medica Responsable del Laboratorio: Q.F. Roberto González Salazar. Practica 1. Determinación de Glucosa Sanguínea. Practica Realizada el: 13/03/18. Diagrama de Flujo Toma de muestra por puncion venosa de 2 ml y re...

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UNIVERSIDAD AUTONOMA DE NAYARIT UNIDAD ACADEMICA DE MEDICINA

Laboratorio de Bioquímica Medica Responsable del Laboratorio: Q.F.B. Roberto González Salazar.

Practica 1. Determinación de Glucosa Sanguínea. Practica Realizada el: 13/03/18.

Diagrama de Flujo Toma de muestra por puncion venosa de 2 ml y reposar la muestra 10 min.

Centrifuga a 2500 rpm. por 5 min.

Con pipeta pasteur se toma una alicuota de suero

Se pasa a otro tubo

Se agrega 2.5 ml de reactivo de glucosa

Colocacion dentro del espectrofotometro por 5 min

Anotar los resultados obtenidos para su posterior calculo

Conc. Glucosa = (A) M / (A) P (Gluc) x Conc. P (Gluc) = mg/100 ml (dl). Factor de conversión: mg/dl x 0.0555 = mmol/L.

Comparacion de parametros con los normales

Introducción

Los niveles de glucosa sanguínea son muy importantes y la glucosa es la principal fuente de energía para el desarrollo de la actividad metabólicas y de correcto equilibrio fisiológico, su principal fuente de obtención es a través de la alimentación y se almacena principalmente en hígado, el cual tiene el papel importantísimo de mantener los niveles de glucosa en sangre estables (Glucemia) , un hormona que ayuda a que los niveles se mantengan en equilibrio es la insulina secretada por páncreas, la deficiencia de esta hormona hace que la glucosa se acumule algo que trae como consecuencia muchas complicaciones clínicas he aquí la importancia de saber la fundamentación y metodología de una correcta realización de toma de muestra de glucosa sanguínea ya que será de gran importancia para la corroboración de diagnósticos de enfermedades o trastornos metabólicos, ejemplo tal es el de la diabetes mellitus la cual incapacita al cuerpo para la óptima metabolización de azucares, proteínas y grasas. Los niveles normales de glucosa en la sangre según la American Diabetes Association (1) un examen de glucemia en ayunas, un nivel entre 70 y 100 mg/dl (3.9 y 5.6 mmol/l) se considera normal. Si se realiza aleatoriamente una prueba de glucemia los niveles diferirán dependiendo el tiempo transcurrido a la última comida la mayoría de las veces, el nivel de glucemia estará por debajo de 125 mg/dl (6.9 mmol/l), La OMS maneja un rango de valores de glucosa normal en estado de ayuno de 70 mg/dl y 110 mg/dl. Cuanto mayor cantidad de glucosa exista en sangre, se tiende a excretar por la orina, pero la determinación en orina es muy inexacta así que el resultado de muestra sanguínea es más concreta y confiable.

Objetivos:  Obtener las aptitudes para identificar los valores normales y alterados de glucosa sanguínea.  Obtener el conocimiento básico para la interpretación de resultados de valores dados por prueba de glucosa sanguínea.  Conocer y aplicar la metodología para la toma de muestra sanguínea por punción venosa.

Resultados:

Fig. 1 Punción Venosa para la obtención de muestra sanguínea.

Fig. 2. Muestra sanguínea en tubo con anticoagulante donde se dejó reposar 10 min.

Fig. 3 Muestra sanguínea después de ser centrifugada a 2500 rpm. Durante 5 min. Lo cual muestra la división de los componentes sanguíneos entre ellos el plasma que nos servirá para la realización de la prueba

Fig. 4 Tubos rotulados para distinguir las muestras

Fig. 5 Muestra de sangre ya agregada Fig. 6 Espectrofotómetro Resultados:  J: 0.324 Abs.  C: 0.306 Abs. Fig. 6 Muestra para  Y:lista 0.292 Abs. meterla al V: 0.307 Abs. espectrómetro

Fórmula para calculo: • Conc. Glucosa = (A) M / (A) P (Gluc) x Conc. • P (Gluc) = mg/100 ml (dl). Factor de conversión: mg/dl x 0.0555 = mmol/L.

Numero de muestra Tubo 1 (Jacky) Tubo 2 (Jose) Tubo 3 (Yessica) Tubo 4 (Victor)

Mesa 1 62.03 mg/dl 71.90 mg/dl 83.02 mg/dl 32.40 mg/dl

Discusión

Concentración mg/dl gluc. Resultado de Espectrofotómetro 0.306 Abs 0.203 Abs 0.292 Abs 0.307 Abs Concentración mg/dl gluc. Mesa 2 Mesa 3 107.71 mg/dl 94.40 mg/dl 115.43 mg/dl 62.65 mg/dl 26.85 mg/dl 90.123 mg/dl 158.64 mg/dl 94.75 mg/dl

Resultado 94.4 mg/dl 62.65 mg/dl 90.123 mg/dl 94.75 mg/dl

Mesa 4 72.83 mg/dl 87.96 mg/dl 83 mg/dl 73.45 mg/dl

Cada paso seguido en la metodología de la prueba de concentración de glucosa sanguínea es importante ya que cualquier variación en esta diferirá en los resultados finales que serán cruciales para determinar o confirmar el diagnóstico final del paciente. La centrifugación ayudo a separar la composición sanguínea para así extraer el plasma necesario para la determinación de glucosa en sangre. Para su posterior evaluación en espectrofotómetro el cual nos dio un dato de absorbancia que posteriormente utilizamos para calcular el valor de glucosa en sangre con la formula dada. Existen tres estados o niveles en los que podemos catalogar el estado de glucosa en sangre dado a los resultados obtenidos por la formula según Vasoudevan (2) se utiliza el termino Normoglucemia cuando los valores se encuentran dentro de los límites normales, Hiperglucemia Cuando los valores se encuentran por encima de los valores normales e Hipoglucemia Cuando los valores encuentran debajo de los niveles normales. Cuando la glucosa en plasma está por debajo de 50 mg/dl es una condición muy seria, la hiperglucemia es muy perjudicial a la larga, mientras que la hipoglucemia por un corto periodo puede llegar a ser fatal. Para ser considerada un no-diabético la Asociación Americana de la Diabetes (1) recomienda un nivel de la glucosa de menos de 180 mg/dl (10 mmol/l) después de una comida y un nivel de glucosa en sangre de 90-130 mg/dl (5 a 7,2 mmol/l) antes de la comida o en ayuno. El paciente de nuestra muestra presento un valor de glucosa en sangre de 90 – 94 uno de los factores que influyo a este resultado es el estado de ayuno en el que se encontraba sin embargo está en los estándares normales (Normoglucemia) por lo cual se descartaría cualquier afección referente a anormalidades metabólicas si se presentara un nivel mayor en un rango de 100 a 125 mg/dl (5.6 a 6.9 mmol/l) representaría una alteración de glucosa en ayunas lo cual podría ser atribuible a una prediabetes esto sería motivo para seguir monitoreando su glucosa en sangre ya que esto nos daría motivos para pensar que existe riesgo a desarrollar diabetes tipo 2. Un nivel de 126 mg/dl (7mmol/l) o mayor casi siempre significa padecimiento de diabetes en el paciente se recomienda la realización de más pruebas para confirmar el diagnóstico como una prueba de tolerancia a la glucosa sin embargo esto ya representa una anomalía grande en los rangos de glucosa. Un nivel superior a 200 mg/dl (11 mmol/l) en un paciente que no se encuentra necesariamente en ayunas significa la presencia de diabetes se hace hincapié que debería ser sometido a otra prueba para la confirmación del diagnóstico preciso. Los cálculos de glucemia presentaron variación, porque fue que se dio esto si se trataba de la misma muestra y el mismo procedimiento, es atribuible a que las concentraciones de cada tubo de ensayo no fueron exactamente iguales, sin embargo los resultados no mostraron variabilidad mayor que pudiera atribuirse a alguna anomalía los rangos estaban en los valores normales solo el que diferido a mayor escala fue el que dio como resultado 62.65 mg/dl pero era notorio que fue debido a la cantidad de concentraciones ya que cualitativamente se podía notar la diferencia, esto a la incorrecta realización de pipeteo. Los resultados dados por las demás mesas objetivamente fueron:

Mesa 1: Los rangos presentan variaciones grandes sin embargo están en los índices normales, la variación se pudo deber a algún error en la metodología, como ya mencionamos esto puede traer como consecuencia estos sesgos que podrían darnos un resultado equivocado Mesa 2: Presentaba rangos muy altos desconocemos si el paciente se encontraba en estado de postprandio a lo cual poder atribuirle esto de no ser así estaríamos sospechando de anomalía. Mesa 4: Los rangos que manejaron en esta mesa se encuentra en un rango normal (Normoglucemia) encontrándose la paciente en estado de ayuno o inanición. Problemas que pueden provocar un nivel de glucosa en sangre superior a lo normal son: hipertiroidismo, cáncer pancreático, pancreatitis, estrés debido a traumatismos, tumores, Niveles de glucosa en sangre inferiores a lo normal (Hipoglucemia): hipopituitarismo, hipotiroidismo, insulinoma, ayuno prolongado, presencia de insulina o medicamentos para la diabetes, ejercicio vigoroso Conclusion La correcta realización de la prueba de glucosa sanguínea es clave para la confirmación de diagnósticos con índole en anomalías metabólicas, existen muchos factores que pueden influir en los resultados de esta prueba hecho que pudimos comprobar. Conocer el nivel de glucosa en sangre correcto puede ser muy eficaz para el diagnóstico de enfermedades, especialmente en el caso de la diabetes Cada vez hay más personas que padecen enfermedades referentes a anomalías metabólicas relacionadas con la glucosa en sangre, y el número de jóvenes afectados por la diabetes también crece por esto es importante la correcta realización de estas pruebas ya que la detección oportuna o temprana de estas será un gran factor para el desarrollo de la enfermedad tomando las medidas adecuadas para su control.

Cuestionario y glosario: 

¿Qué diferencia existe entre la glucosa anormal en ayuno (GAA) y la intolerancia a la glucosa (IG)? Según la OMS 2018:

La glucemia de ayuno anormal es una situación en que la concentración de glucosa en la sangre (o el plasma) es mayor de lo normal en ayunas, pero no llega a alcanzar los límites para considerarla diabetes. La tolerancia anormal a la glucosa es una situación en que la concentración de glucosa en la sangre (o el plasma) a las 2 horas de haber administrado una carga de 75 g de glucosa oral es mayor de lo normal, pero no llega a alcanzar los límites para considerarla diabetes. 

Con respecto a los criterios de glucosa en ayuno y a las 2 hs, ¿cuál de estas pruebas es más sensible y cuál es más específica? La TTOG (Prueba oral de tolerancia a la glucosa) es más sensible que la GSA para el diagnóstico de diabetes, aunque el diagnostico final no deberá basarse en una medición aislada de glucosa >

11,1 mmol/l (>2,00 g/l) 2h después de la

carga, sino que se confirmará en los días sucesivos. La TTOG es más sensible para el diagnóstico de la diabetes que la glucosa plasmática en ayunas. (Diagnostico y Monitorización de la Diabetes Mellitus desde el Laboratorio, OMS).

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Investigue los datos referenciados más recientes sobre la prevalencia de DM2 en nuestro país y en nuestro estado:

La Encuesta Nacional de Salud y Nutrición de Medio Camino 2016 exploró el estado de diversas enfermedades crónicas en México. Entre ellas, la diabetes en la población mexicana mayor de 20 años de edad. Se encontró que la prevalencia de diabetes en el país pasó de 9.2% en 2012 a 9.4% en 2016, esto en base a un diagnóstico previo de la enfermedad. Entre esta población:  

Las mujeres reportan mayores valores de diabetes (10.3%) que los hombres (8.4%). Esta tendencia se observa tanto en localidades urbanas (10.5% en mujeres y 8.2% en hombres) como en rurales (9.5% en mujeres, 8.9% en hombres). La mayor prevalencia de diabetes se observa entre los hombres de 60 a 69 años (27.7%), y las mujeres de este mismo rango de edad (32.7%) y de 70 a 79 años (29.8%). En Nayarit:

La titular del programa Salud del Adulto de la Secretaría de Salud de Nayarit, Mariana Toscano Moya, informó que, en lo que va del año, se han contabilizado nueve mil 200 pacientes con diabetes y al año se diagnostican mil 219 casos nuevos. En entrevista, la funcionaria estatal dijo que la diabetes es la tercera causa de defunción en la entidad, con un promedio de 620 fallecimientos por año. Agregó que 55 por ciento de pacientes son mujeres y los municipios más afectados son Tepic, Bahía de Banderas, Xalisco y Tecuala.

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Además de la DM2, ¿en qué condiciones se producen cuerpos cetónicos susceptibles de ser detectados en la orina? Las cetonas se acumulan cuando el cuerpo necesita descomponer las grasas y los ácidos grasos para usarlos como energía, esto es más probable que ocurra cuando el cuerpo no recibe suficientes carbohidratos. Un resultado anormal también puede deberse a: ayuno o inanición como con la anorexia, dieta con alto contenido proteico o baja de carbohidratos, vómitos durante un periodo prolongado (Embarazo), Fiebres, Hipertiroidismo o durante la lactancia si la madre no ingiere y bebe lo suficiente.

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En un proceso de resistencia a la insulina, ¿Cuáles rutas metabólicas de las grasas son facilitadas y cuáles son bloqueadas? Principalmente se produce una hiperglucemia, la síntesis proteica y de ácidos grasos se vería estimulada, la hiperglucemia se vería producida por la gluconeogénesis hepática sin inhibición ya que esta está dada por la insulina. La sobreproducción de triacilgliceridos llevaría un incremento en liberación de VLDL para así dar un hipertrigliceridemia.

GLOSARIO: 

Diabetes mellitus: Es una enfermedad crónica en la cual el cuerpo no puede regular la cantidad de azúcar en la sangre.

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Intolerancia a la glucosa: Incapacidad de una persona para metabolizar cierta carga de glucosa.

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Glucosa postprandial o 2h postcarga: Se define como glucosa postprandial los niveles de glucosa en sangre a las dos horas de la ingesta de un alimento. La

determinación de este parámetro se utiliza para el diagnóstico de la diabetes y otras enfermedades del metabolismo de la glucosa y para el cálculo del índice glucémico de los alimentos. Algunos autores señalan que la glucosa postprandial es un mejor marcador de la diabetes que la glucosa en ayunas. 

Glucosa anormal en ayuno: Es una situación en que la concentración de glucosa en la sangre (o el plasma) es mayor de lo normal en ayunas, pero no llega a alcanzar los límites para considerarla diabetes.

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Acidosis metabólica: Está producida por la disminución del pH sanguíneo 45 nmol/l), causada por una disminución primaria de la concentración de HCO3−. Es una afección en la cual hay demasiado ácido en los líquidos corporales. Ocurre cuando el cuerpo produce demasiado ácido. También puede ocurrir cuando los riñones no están eliminando suficiente ácido del cuerpo. La acidosis diabética se presenta cuando sustancias ácidas, conocidas como cuerpos cetónicos, se acumulan en el cuerpo. Esto ocurre con mayor frecuencia cuando la diabetes tipo 1 no está controlada. También se conoce como cetoacidosis diabética y CAD. Coma diabético: El coma diabético es la complicación de mayor gravedad en pacientes que padecen de diabetes mellitus y se caracteriza por un estado de pérdida de conciencia y una descompensación orgánica. Existen tres formas de presentación más frecuente de coma diabético: la cetoacidosis (cuya característica principal es la acumulación de cuerpos cetónicos en el plasma sanguíneo), el coma hiperosmolar (que tiene como manifestación más relevante una considerable deshidratación) y el coma hipoglucémico (en el que descienden los niveles de glucosa en la sangre hasta menos de 50 mg/dl).

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Prevalencia: Es la proporción de individuos de una población que presentan un determinado trastorno en un momento dado.

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Incidencia: Número de individuos que enferman durante el período de observación en relación al número de individuos libres de la enfermedad al comienzo del estudio.

Referencias 1. American Diabetes Association. Standards of medical care in diabetes -- 2017: 2. Classificaiton and diagnosis of diabetes. Diabetes Care. 2017;40(Suppl1):S11S24.PMID: 7979889 www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed/27979889. 2. D.M. Vasudevan, S. SreeKuman. “Texto de bioquímica” 6ta, edición. México. Editorial: Cuellar Ayala. 2011.

A Avignon; A Radauceanu; L Monnie. Nonfasting plasma glucose is a better marker of diabetic control than fasting glucose in type II diabetes mellitus. Diabetes Care; Dec 1997; 20, 12 Chernecky CC, Berger BJ. Ketone, semiquantitative - urine. In: Chernecky CC, Berger BJ, eds. Laboratory Tests and Diagnostic Procedures. 6th ed. Philadelphia, PA: Elsevier Saunders; 2013:694. Instituto Nacional de Salud Pública. Encuesta Nacional de Salud y Nutrición de Medio Camino 2016 Informe Final de Resultados. Disponible desde: http://oment.uanl.mx/wpcontent/uploads/2016/12/ensanut_mc_2016-310oct.pdf Krapf R, Seldin DW, Alpern RJ. Clinical syndromes of metabolic acidosis. In: Alpern RJl, Orson WM, Caplan M, eds. Seldin and Giebisch's The Kidney. 5th ed. Philadelphia, PA: Elsevier Saunders; 2013:chap 59 Mollinedo Patzi Marcela Andrea, Huayta Prado Jose Manuel. COMA DIABETICO. Rev. Act. Clin. Med

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