Roteiro AULA Métodos EM Virologia ok PDF

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Todos os tipos de métodos diagnósticos em virologia....

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ROTEIRO AULA MÉTODOS EM VIROLOGIA Visualização do vírus: - microscópia óptica: efeito citopático - CPE (alterações na morfologia nas células induzidas pela infecção viral) * vírus que não produzem CPE visível: observação de corpúsculos de inclusão - microscopia eletrônica

Reação de hemaglutinação

Interferência viral: A cultura celular infectada por um vírus pode se tornar resistente à infecção de outro vírus, para o qual esta era originalmente permissiva.

Diagnóstico sorológico: realizado para: - confirmar uma suspeita clínica, - identificar vírus isolado em cultura, - Estudar epidemiologicamente o comportamento de uma virose em uma comunidade, - quando o isolamento viral for difícil ou indisponível, - detecção de infecção aguda prévia, - detecção de IgM: infecção prévia, - detecção de IgG: diagnóstico prévio.  Teste de Neutralização

 Teste de inibição da hemaglutinação

 Fixação do complemento

Imunofluorescência direta

Imunofluorescência indireta

Aglutinação passiva

ELISA

Técnicas moleculares:  reação em cadeia da polimerase (PCR)

Multiplex PCR: utiliza um conjunto de iniciadores, diminui o custo, aumenta a velocidade do diagnóstico.  Real-Time PCR: mais eficiente que o PCR, mais rápido, não necessita de etapa de detecção do produto amplificado, menor chance de contaminação, possibilidade de quantificação.  eletroforese em gel de poliacrilamida (PAGE): Permite análise de variações no genoma viral e ocorrência de infecções mistas.  hibridização “in situ”

 hibridização em microarranjos

 immunoblotting (western blotting, Southern blotting, nothern blotting)

Tipagem e comparação do genoma viral: Importante para estudos epidemiológicos, investigação da patogênese e progressão da doença:  sequenciamento do genoma viral  Southern blotting

 RFLP

SSCP

Vídeos: http://www.youtube.com/watch?v=2KoLnIwoZKU&feature=em-share_video_user http://www.youtube.com/watch?v=QVeVIM1yRMU&feature=em-share_ideo_user http://www.youtube.com/watch?v=TZ-K13Y4ffw&feature=em-share_video_user http://www.youtube.com/watch?v=76eKnmCtCTU&feature=relmfu http://www.youtube.com/watch?v=pRIn3p7x3V8&feature=related http://www.youtube.com/watch?v=1Q-_qgCtk3c http://www.youtube.com/watch?v=3jX_08zdYCE&feature=relmfu...