Unidad 2: Bacterias Gram Positivas PDF

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Resumen acerca de las bacterias grampostivas y negativas en la microbiologia...

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Nombre: Gerardo Zamora Guevara Matricula: 201916568

1. ¿A qué personaje se le atribuye la invención del microscopio? Existen muchas controversias en relación con quien se le den atribuir la invención del microscopio, ya que en primera instancia se afirma que en el año de 1590 dos constructores holandeses de gafas cuyos nombres eran Hans y su hijo Zacarias Janssen diseñaron un aparato con lentes de aumento el cual les permitía ver objetos sumamente pequeños, el cual fue fabricado a partir de dos lentes convexos en un tubo opaco y obtuvieron de esta manera una mayor perfección en la observación de pequeños objetos con lo cual se fundan los principios del microscopio compuesto y el telescopio. Sin embargo, no fue hasta el siglo XVI cuando otro holandés llamado Antón Van Leeuwenhoek considerado padre del microscopio, tomando como referencia el invento de Hooke, fabricó un microscopio al cual dotó de poderosos lentes de aumentos y empleando técnicas más efectivas, con esto Leeuwenhoek pudo observar y describir microbios, sangre, plumas, pólvora, pelos, insectos, minerales, fibras musculares, peces, espermatozoides, semillas, árboles y plantas. 2. Generalidades del microscopio óptico El microscopio de campo claro o microscopio óptico como también se le conoce nos permite que las muestras se visualicen por las pequeñas diferencias de contraste que existen entre ellas y el medio que las rodea, y estas diferencias son debidas a que las células absorben o dispersan la luz en distinto grado. 3. Partes que integran un microscopio óptico Base o pie Brazo o estativo Componentes mecanicos

Platina

Componentes del microsocpio optico

Revolver o portaobjetos Tornillos macrometrico y micrometrico

Condensador Componentes opticos

Prismas Luz natural Componentes de iluminacion

Luz de iluminacion

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4. ¿Cuál es la resolución en un microscopio? La resolución es una función de la longitud de onda de la luz utilizada, y es una característica de la lente del objetivo conocida como apertura numérica. La mayor resolución posible en un microscopio óptico compuesto es de unos 0,2 μm. 5. ¿Qué es el poder de resolución de un microscopio y como se determina? Se define así la capacidad de un objetivo de poder distinguir la distancia mínima que debe existir entre dos puntos del objeto para que se puedan visualizar como dos puntos separados El poder de resolución (PR) de un objetivo depende de la longitud de onda (λ) del rayo luminoso utilizado y la apertura numérica del sistema óptico del objetivo. 0.61 ∙ 𝜆 𝑅= 𝑁𝐴 Donde 0.61 es la constante Abbe. 6. ¿Cuál es el aumento de los oculares y objetivos? Los objetivos se fabrican para ampliar las imágenes de los objetos observados en diversos aumentos; así se tienen objetivos con aumentos propios de 3.5 x, 4x, 10x, 25x, 40x, 65x y 100x. La imagen del ocular es de mayor tamaño, virtual y derecho. Esta imagen únicamente amplía un número determinado de veces (5x, 8x, 10x, 12x) a la imagen formada por el objetivo. 7. ¿Cómo se calculan los aumentos de la muestra en un microscopio? Se calcula multiplicando el aumento del objetivo por el aumento ocular. 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑑𝑒𝑙 𝑜𝑏𝑗𝑒𝑡𝑖𝑣𝑜 × 𝐴𝑢𝑚𝑒𝑛𝑡𝑜 𝑜𝑐𝑢𝑙𝑎𝑟 40𝑥 × 10𝑥 = 400𝑥 8. Diseñar un cuadro comparativo con los diferentes tipos de microscopía. Cuadro comparativo de los diferentes tipos d microscopia Tipo de microsco pia Contraste de fases

Mecanismo de acción

Funciones

Característica s

Se basa en el principio según el cual las células tienen un

Mejorar el • contraste de la imagen de células sin teñir

Sitios donde es empleado La luz pasa • Áreas de a través de docencia los objetos • Observa y se ción de fusiona en preparac diferentes

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índice de refracción diferente al medio que las rodea

Contraste de campo oscuro

Fluoresce ncia

De contraste por inferencia diferencia l

El sistema de iluminación se ha modifi cado para alcanzar la muestra desde un solo lado. Consiste en el análisis de muestras las cuales son capaces de absorber una pequeña cantidad de luz y emitir luz con una mayor longitud de onda Utilizan un polarizador, para producir luz polarizada, la cual pasa a través de un prisma, generando dos haces de luz

fases dependien do de las propiedade s de los materiales a través de los cuales pasa. Es útil para La resolución la de la observación microscopia de de campo microorgani oscuro es smos como bastante alta Treponema pallidum Se utiliza para observar muestras que emiten fluorescenci a

Se utiliza para la técnica de anticuerpos fluorescentes o inmunofluores cencia

iones vivas

•

Utilizado para observar la motilidad microbia na

•

En el área de diagnósti co clínico microbia no En ecología microbia na

•

Es útil para observar células no teñidas

Estructuras • como esporas, vacuolas y gránulos adquieren un aspecto tridimensional

En el área de diagnósti co clínico microbia no

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Electrónic a de transmisi ón

Electrónic a de barrido

distintos pasando por la muestra, hasta alcanzar el objetivo formando un solo haz Utiliza un haz de electrones proyectados desde una fuente de electrones y se dirige a partir de un condensado r electromag nético hacia una muestra delgada. Los electrones se dirigen por medio de lentes a un punto muy fi no y producen radiación de distintas formas, la cual es captada por medio de un detector especial y amplificado a una pantalla de televisor

Se utiliza • para examinar células y estructuras celulares a muchos aumentos y gran • resolución.

En el área de diagnósti co clínico microbia no

Se utiliza para observar muestras sumamente pequeñas como muestras relativament e grandes

En el área de diagnósti co clínico microbia no

El TEM • permite observar partículas con separación de 0.001 μm. Los virus con diámetros de 0.01 a 0.2 μm pueden observarse con facilidad. Proporciona • imágenes tridimensional es de la superficie de objetos microscópicos.

9. ¿A quién se le atribuye el descubrimiento de la tinción de Gram?

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Al medico danés Hans Christian Gram en la década de 1880 mientras se encontraba trabajando con el microbiólogo Carl Friedländer en su laboratorio ubicado en Berlín, mientras observaba bacterias en tejidos de pulmones de pacientes que morían de neumonía.

10. Concepto de cromóforo y auxocromo Se llama cromóforo a ciertos grupos o arreglos de átomos dentro de la molécula, los cuales absorben energía dentro de la región visible del espectro, los cuales son los responsables del color en un compuesto. Un auxocromo se define como aquellos grupos capaces de donar electrones de pares no compartidos, mediante un mecanismo de resonancia al sistema insaturado del cromóforo. 11. ¿Como se clasifican los colorantes? Los colorantes se clasifican en dos: los colorantes básicos y los colorantes ácidos. Los colorantes básicos consisten en cationes teñidos con un anión incoloro como por ejemplo el cloruro de azul de metileno. En un colorante acido ocurre lo contrario a los colorantes básicos, es decir un anión teñido con un catión incoloro como es el caso del eosinato de sodio. 12. ¿Qué son las tinciones simples y diferenciales, ejemplos de cada una de ellas? Una tinción simple es aquella tinción en la cual el colorante empleado sirve solo para denotar la morfología celular. Una tinción diferencial es aquella tinción en la cual el colorante empleado pone de manifiesto diferencias entre células bacterianas o entre partes de una misma célula. Ejemplos de este tipo de tinciones son: tinción de Gram, tinción de Ziehl-Neelsen. 13. ¿Cuáles son las características de una preparación en fresco y una tinción?

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14. ¿Cuál es fundamento de las siguientes tinciones de Gram, ZiehlNeelsen, negativa, Sheaffer-Fulton, utilizadas de rutina en el laboratorio de Microbiología Tincion Fundamento 1) Fijar el frotis con calor o metanol 2) Cubrir con colorante cristal violeta 3) Lavar con agua y no secar 4) Contratincion con yodo 5) Volver a lavar con agua y no dejar secar Tinción de Gram 6) ) Decolorar con agitación suave en acetona-alcohol al 30% 7) Lavar con agua. No secar. 8) Cubrir con safranina 9) Lavar con agua y secar con aire o papel secante. Tinción de Ziehl-Neelsen 1) Fijar el frotis con calor 2) Cubrir con carbolfucsina, calentar suavemente 5 min sobre la llama directa. 3) Lavar con agua desionizada 4) Decolorar con una mezcla de ácido-alcohol al 3% hasta que persista un color rosa débil 5) Lavar con agua 6) Aplicar azul de metileno de Löffler durante 1 min como tinción de contraste. 7) Lavar con agua desionizada y dejar secar. Tincion negativa Este procedimiento consiste en la atención del entorno con un colorante ácido, dejando a las células incoloras 1. Hacer un extendido fino con una suspensión del microorganismo esporulado en un portaobjeto y fijar al calor. 2. Cubrir el portaobjetos con solución acuosa de verde de malaquita al 5 %. Tinción Sheaffer-Fulton

3. Calentar sobre la llama del mechero de Bunsen hasta causar desprendimiento de

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vapores y retirar la llama. Repetir la operación durante de 6 a 10 minutos. Si durante el procedimiento se evapora demasiado la solución de verde de malaquita, se puede agregar más. 4. Retirar el papel de filtro y lavar con agua. 5. Cubrir el portaobjetos con safranina acuosa al 0,5 % durante 30 segundos.

15. ¿Qué estructuras de las bacterias tiñen las tinciones de Gram, ZiehlNeelsen, negativa, Sheaffer-Fulton? Tinción Estructura de bacterias Tinción de Gram Paredes celulares Tinción de Ziehl-Neelsen Paredes celulares Tinción de Sheaffer-Fulton Paredes celulares de esporas Tinción negativa Capsulas 16. ¿Cómo se observan en el microscopio las bacterias Gram positivas y Gram negativas, ejemplos? Las células grampositivas son teñidas con complejo de violeta de genciana yodo y una vez teñidas adquieren un color azul.

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Por otro lado, las células o bacterias gram negativas al añadir el violeta de genciana se decoloran y se les agrega safranina con lo cual estas adquieren un color rojo

17. ¿Cómo se observan en el microscopio las bacterias acido alcoholes resistentes, ejemplos? En una tinción acido alcohol resistente existen dos tipos de bacterias las cuales serán detectadas: unas resistentes la decoloración de alcohol y otras que no son resistentes al alcohol. Las bacterias que son resistentes al alcohol adquieren un color rojizo, mientras que las acido no resistentes son teñidas de un color azul, debido a la agregación del azul de Ilustración 1. Tinción de Mycobacterium Tuberculosis metileno.

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18. ¿Cómo se observan en el microscopio las bacterias que se tiñen con la tinción negativa, ejemplos? En el caso de las bacterias que son teñidas mediante esta tinción, presentaran un color transparente, pero el fondo de esta se vera de un color negro debido al colorante empleado en esta tinción.

Ilustración 2. Tinción Negativa de Bacilo anthracis

19. ¿Cómo se observan en el microscopio las bacterias que se tiñen con la tinción de Sheaffer-Fulton, ejemplos? En la tinción de Sheaffer-Fulton las esporas se pueden visualizar de color verde, mientras que las células vegetales se observan de color rosa

20. ¿Cómo se llama la tinción para visualizar los flagelos? Se conoce como Tinción de flagelos simplemente o también puede llegar a ser conocida como Tinción de flagelos de Leifson. 21. ¿Cuál es la utilidad de las tinciones en el laboratorio clínico? Una tinción dentro del laboratorio clínico tiene como finalidad la detección del microorganismo que está originando el padecimiento de infección y una vez detectado poder aplicar el antibiótico específico para combatir al microorganismo 22. Clasificación de las bacterias en base a las diferentes tinciones (Gram, Ziehl-Neelsen, Negativa, Sheaffer-Fulton).

Nombre: Gerardo Zamora Guevara Matricula: 201916568 Gram Positivas

Clasificacion de baceterias en base a tinciones

Tincion de Gram Gram Negtivas

Resisitentes a la decoloracion acido-alcohol Tincion de Zieh-Neelsen No resistentes a la decoloracion acido-alcohol

Tincion negativa

Esporas

Bacilos gram positivos del genero Bacillus Tincion de Sheaffer-Fulton Bacilos gram positivos del genero Clostridium

23. Investiga 10 nombres de géneros de bacterias cocos gram positivos y negativos. Cocos Gram Positivos Cocos Gram Negativos Neisseria Streptococcus Moraxella Enterococcus Acinetobacter Peptococcus Peptoestreptococcus Kingella Staphylococcus Eikenella Micrococcus Simonsiella Planococcus Alysiella Gemella Aerococcus Leuconostoc

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24. Investiga 10 nombres de géneros de bacterias bacilos gram positivos y negativos. Bacilos Gram Positivo Bacilo Gram Negativo Bacillus Bordetella Clostridium Campylobacter Erysipelothrix Haemophilus Listeria Francisella Actinomyces Legionella Corynebacterium Pseudomonas Mobiluncus Salmonella Mycobacterium Klebsiella Nocardia Proteus Actinomadura Shigella 25. Investiga 5 nombres de BAAR positivos. • Nocardia brasilieniesis • Nocardia abscessus • Mycobacterium tuberculosis • Nocardia farcinica • Nocardia nova complex 26. Investiga 10 nombres de bacterias capsuladas. ➢ Haemophilus influenzae ➢ Neisseria meningitidis ➢ Streptococcus pneumoniae ➢ Streptococcus pyogenes ➢ Staphylococcus aureus ➢ Bacillus anthracis ➢ Acinetobacter calcoaceticus ➢ S. agalactiae ➢ S.dysgalactiae ➢ Meningococo 27. Investiga 5 nombres de bacterias anaerobias estrictas. ❖ Prevotella ❖ Porphyromonas ❖ Fusobacterium ❖ Clostridium ❖ Bacteroides 28. Investiga 5 nombres de bacterias piogénas. ✓ Streptococcus pyogenes ✓ Neisseria gonorrhoeae ✓ Bordetella pertussis ✓ Prevotella

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✓ Clostridium perfringens. 29. Investiga 5 Nombre de bacterias fluorescentes. • Pseudomonas fluorescens • Vibrio harveyi • Aliivibrio fischeri • Photorhabdus luminescens • Photobacterium phosphoreum 30. Diseña un mapa conceptual correspondiente a la unidad 2.

Microscopia y tecnicas de tincion Tinciones, tecnicas y fundamento

Tipos de microscopia

Microscopia de campo oscuro

Es utilizado para observar la motilidad microbianda

Microscopia de contraste de fases

Se basa en el principio en el cual las celulas poseen un indice de refraccion

Microscopia de fluorescencia

Se utiliza para muestras que emiten fluoresencia

Microscopia de electronica

Utilizado para examinar

Tinciones diferenciales

Tincion es simples

Solo emplea un tipo de colorante para la muestra Tincion de Gram

Celulas y aumentos celulares a muchos aumentos y gran resolucion

las bacterias ueden dividirse en dos

Grampositiva s

El colorante empleado denota diferencias entre bacterias o entre partes de estas

Tincion de ZiehlNeelsen

ciertas bacterias no puden decolorarse tan facilmente (alcohol-acido)

Gramnegativ as Bacterias acido alcohol resistentes

Bacterias no resistentes al alcohol

Tincion negativa

Consiste en l acoloracion con colorante acido, dejndo a la celula incolora

Tincion de ShefferFulton

Se aplica a esporas princilamente agregadno verde malquita para denotar la espora

Nombre: Gerardo Zamora Guevara Matricula: 201916568 Referencia Bibliográfica • •

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