Esterilización y preparación de medios de cultivos ( Reporte) PDF

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UNIVERSIDAD JUAREZ AUTÓNOMA DE TABASCODIVISION ACADEMICA DE CIENCIAS DE LA SALUD(DACS)ASIGNATURA: MICROBIOLOGIANOMBRE DE LA ALUMNA: CINDY YANIRA LÓPEZ DÍAZCARRERA: LIC. EN NUTRICIÓNTEMA: PRÁCTICA DE ESTERILIZACIÓNTURNO: VESPERTINO GRADO: 2° GRUPO: HFECHA DE ENTREGA: 08 DE MAYO DE 2020INTRODUCCIÓNLa ...

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UNIVERSIDAD JUAREZ AUTÓNOMA DE TABASCO DIVISION ACADEMICA DE CIENCIAS DE LA SALUD (DACS)

ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA

NOMBRE DE LA ALUMNA: CINDY YANIRA LÓPEZ DÍAZ

CARRERA: LIC. EN NUTRICIÓN

TEMA: PRÁCTICA DE ESTERILIZACIÓN

TURNO: VESPERTINO

GRADO: 2°

GRUPO: H

FECHA DE ENTREGA: 08 DE MAYO DE 2020

INTRODUCCIÓN

La esterilización implica la destrucción de todos los microorganismos, incluyendo los esporos. La desinfección supone la destrucción de los microorganismos vegetativos que pueden causar enfermedades o en el contexto de las industrias de alimentos, los que pueden producir alteraciones. La desinfección no mata necesariamente a los esporos. Para el estudio de los microorganismos es indispensable contar entre otras cosas con material y medios de cultivo estériles. En Microbiología la esterilización se define como “el proceso mediante el cual se eliminan todos los microorganismos (incluyendo formas de resistencia) de un objeto, medio o superficie” y su aplicación garantiza la ausencia de microorganismos en el material y medios de cultivo a ser empleados. Existen diversos métodos de esterilización, entre ellos: calor (seco o húmedo), filtración (para sustancias termolábiles y aire), radiaciones y aplicación de gas de óxido de etileno (para jeringas y cajas de plástico). A continuación encontraremos el siguiente reporte de la Práctica de Esterilización.

ESTERILIZACIÓN

MATERIALES 

Matraz



Una varilla o clip



Tubos de ensaye y cesto de



Tijeras

alambre



Gaza



Pipetas



Cinta adhesiva



Papel kraft



Cajas de Petri



Torundas (algodón)



Equipo de filtración

METODOS DE PREPARACIÓN DE LOS SIGUIENTES MATERIALES 

Matraces

Matraz con algodón: iniciaremos colocando una torunda a un matraz de 250 ml, para ello necesitamos una porción de algodón de aproximadamente 8x16 cm, ya teniendo hecha la medida del algodón, primero doblamos los lados de la porción del algodón para evitar que se desprendan las fibras, ahora enrollar firmemente el algodón para formar la torunda y la introducimos en el matraz con un movimiento giratorio asegurándonos a que penetre casi en la totalidad del cuello del matraz y que la porción que sobresale sea cómoda para poder sostenerla entre el dedo meñique y la palma de la mano. Para verificar su correcta manufactura tomamos el matraz por la torunda si se mantiene tapado significa que está bien hecha. También podemos envolverla con una gasa, esta ayudara al algodón a mantener su forma y facilitara su manipulación. Debido a que la torunda se humedece durante la esterilización es necesario cubrirla con un capuchón de papel. Matraz con capuchón: será elaborada con un pedazo de papel kraft en forma de rectángulo de aproximadamente 20x14 cm. Iniciamos doblando la hoja por la mitad, marcamos un segundo doblez y abrimos. Llevamos las esquinas hacia las marcas de dobles formando un triángulo, doblamos hacia arriba una de las cejillas. Calculamos el ancho de acuerdo a la torunda y el matraz a cubrir y después doblamos las esquinas hacia atrás y volteamos la figura, doblamos la otra cejilla

hacia arriba para evitar que se deshaga el capuchón y lo colocamos en el matraz con la torunda y así el matraz está listo para su esterilización. 

Tubos de ensaye:

Las torundas del tubo de ensaye se prepara de la misma manera que la del matraz pero cuando debemos tapar una gran cantidad de tubos agilizamos el proceso utilizando una varilla metálica y trozos de algodón de aproximadamente unos 5x7 cm para ello colocamos el algodón sobre la boca del tubo y con una varilla lo introducimos cuidadosamente hasta una profundidad de 2 a 3 cm, luego retiramos la varilla y acomodamos el extremos del algodón que sobresale para que no queden fibras sueltas. La longitud de la porción que sobresale debe de ser adecuada para sujetarla entre el dedo meñique y la palma de la mano, verificamos que la torunda este bien hecha. Igual que en el caso de la torunda para el matraz también la podemos envolver en gaza para ello colocamos la gaza y el algodón sobre la boca del tubo y la introducimos con una varilla, finalmente con unas tijeras emparejamos el extremo que sobresale. Una vez que todos los tubos estén tapados los colocamos dentro de un cesto de alambre y lo cubrimos con un rectángulo de papel kraft de tamaño apropiado y lo sujetamos con un pedazo de cinta adhesiva o con un cordón de caña y a si los tubos estarán listas para su esterilización. Tubos con capucho de polietileno de alta densidad y aluminio o Matraces y tubos con tapón de rosca de baquelita y de polietileno de alta densidad : En estos últimos debemos de tener cuidado de no cerrarlos cermeticamente si no hasta después de su esterilización. 

Pipetas

Estas se esterilizan envueltas de papel de manera individual o en conjunto empaquetadas dentro de cilindros metálicos. Lo primero que tenemos que hacer es colocar un filtro de algodón para ello con el extremo recto de un clip introducimos una pequeña porción de algodón en la

boquilla de la pipeta a una profundidad aproximada de 2cm luego retiramos el clip y acomodamos las fibras que sobresalen de la boquilla. Además debemos de proteger la superficie de las pipetas para que una vez estériles no se contaminen. Para ello envolvemos cada una de las pipetas con tiras de papel kraft de aproximadamente 2x45 cm, la envoltura la iniciamos colocando la punta de la pipeta en posición diagonal sobre un extremos de la tira de papel, doblamos el frente de este sobre la punta de la pipeta luego doblamos la porción lateral de manera que se ajuste al costado de la misma. Con una mano sostenemos firmemente la punta de la pipeta cubierta por papel y con la otra giramos la pipeta para que la envoltura se realice de manera correcta. Al llegar al extremo de la pipeta se enrolla el papel excedente en forma más apretada para evitar que la envoltura se afloje o bien se dobla y se fija con cinta adhesiva. Finalmente anotamos sobre el papel el volumen sobre la pipeta. Para evitar la envoltura individual de numerosos pipetas se utilizan cilindros metálicos. 

Cajas de Petri

Estas se estilizan en conjunto empacadas dentro de cilindros metálicos o envueltos de papel de manera individual. Los cilindros metálicos: contienen una canastilla en la cual se colocan las cajas en posición invertida. Se introduce la canastilla con las cajas y se tapa. Envueltas de papel: para la preparación de cajas de papel individuales necesitamos un rectángulo de papel de aproximadamente 22x32 cm que corresponden a longitudes por dos diámetros de la caja de Petri. Colocamos la caja de Petri en posición invertida en el centro del rectángulo de papel y levantamos los extremos más angostos y los juntamos los doblamos hacia abajo y hacia el centro, ajustando el dobles a la caja. Doblamos las esquinas de los extremos para formar un triángulo, doblamos los extremos hacia debajo de la caja y los fijamos con cinta adhesiva. 

Equipo de filtración

El equipo de filtración debe de estar estéril previo a su uso. El equipo consta de un matraz con un conector para vacío, un embudo con superficie porosa, un vaso y pinzas. El matraz se prepara colocándole una torunda de algodón dentro de la boca y en el tubo de conexión al sistema de vacío, posteriormente cubrimos con un capuchón de papel que abarquen las dos torundas. Para envolver el vaso, cubrimos la parte superior con un cuadro de papel de aproximadamente 16x16 cm, fijando los extremos de papel con una mínima porción de cinta adhesiva. Después

envolvemos

todo

el

vaso

con

un

rectángulo

de

papel

de

aproximadamente 25x35 cm y fijamos con cinta adhesiva. Para preparar el embudo lo recostamos sobre un extremo de papel de aproximadamente 25x30 cm, enrollamos el papel sobre el embudo y fijamos con una cinta adhesiva y a esterilizar. Siguiendo estos pasos nuestro material está listo para ser sometido al proceso de esterilización. Nota: Antes de entrar al laboratorio es necesario ponerse la bata cubre bocas y guantes de látex. BIBLIOGRAFIA: Del video: https://www.youtube.com/watch?v=Nw5DkCnVEWw De la introducción: 

analisisaproductoscarnicos.blogspot./2012/06/practica-numero-2esterilizacion



depa.fquim.unam.mx/archivero/Protocolo2

UNIVERSIDAD JUAREZ AUTÓNOMA DE TABASCO DIVISION ACADEMICA DE CIENCIAS DE LA SALUD (DACS)

ASIGNATURA: MICROBIOLOGIA

NOMBRE DE LA ALUMNA: CINDY YANIRA LÓPEZ DÍAZ

CARRERA: LIC. EN NUTRICIÓN

TEMA: PRÁCTICA DE PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO

TURNO: VESPERTINO

GRADO: 2°

GRUPO: H

FECHA DE ENTREGA: 08 DE MAYO DE 2020

INTRODUCCIÓN

Un medio de cultivo está constituido por una mezcla de agua y sustancias orgánicas e inorgánicas, los que en conjunto proporcionan los requerimientos nutricionales para el desarrollo de los microorganismos. La composición de los medios de cultivo varía en función de: a) grupo microbiano que se pretende estudiar, b) complejidad química, c) estado físico, y d) aplicación. El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el crecimiento de los microorganismos. La composición precisa dependerá de la especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varían considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVOS

MATERIALES 

Bata de laboratorio



Vaso precipitado



Cubre bocas



Algodón



Guantes



Placas estériles



Desinfectante



Mechero



Trapo para limpiar la mesa



Agitador magnético



Probeta graduada



Pipeta



Agua destilada



Propipeta



Agar nutritivo y Biggy



Tubo



Matraz



Autoclave

METODO DE ELABORACIÓN Video no.1 y 2: Medio solido en líquido y medios sólidos en placa. 1. Para ingresar al laboratorio debemos portar la bata cerrada, el uso de guantes, cubre bocas y cabello recogido. 2. Lavarse las manos y hacer una asepsia correcta antes de colocarnos los guantes e iniciar nuestro trabajo. 3. Con el desinfectante y con un poco de cloro limpiar nuestra área de trabajo para una buena desinfección.

4. El agar a utilizar es AGAR BIGGY del cual se utiliza 45 gr por cada 1000 ml, como solo prepararemos 100 ml realizaremos una sencilla regla de tres y a si obtendremos los gramos que debemos pesar. 5. La medida tiene que ser pesada exactamente posible para obtener los resultados deseados. 6. Del mismo modo del disolvente será agua destilada, debe de ser medido con exactitud, por lo que se recomienda el uso de la probeta graduada y el vaso precipitado. 7. Una vez hecho lo anterior procedemos a disolverlo en el matraz. 8. Juntar el agar con el agua destilada y debemos agitar hasta homogenizar la mezcla. 9. El siguiente paso es calentar hasta ebullición por un agitador magnético y esto es importante porque a si estamos esterilizando nuestro medio de cultivo, debemos ser especialmente cuidadosos en este paso y a quitar la mezcla para que no se queme o derrame a causa del sobrecalentamiento y tapar con una torunda. 10.Después esperamos que nuestro medio de cultivo se enfrié un poco de tal manera que no sea peligroso manipular el recipiente. 11. Ya disminuido su temperatura si queremos un medio solido en tubos pasamos a dispensar unos mililitros de medio con ayuda de una pipeta y propipeta que viene ya esterilizados estas son ajustados para ser utilizados y con precaución cogemos unos mililitros y los llenamos en un tubo sellado. Ahora para esterilizar estos medios los llevaremos a la autoclave. 12.Una vez teniendo ya los medios estériles los dejamos enfriar un poquito a temperatura ambiente y dejarlos inclinados hasta que solidifique.

13. Y si queremos el medio en placa pasamos a dosificar el medio en cada una de las placas para ello siempre es necesario trabajar en condiciones estériles muy cerca del mechero encendido. Una vez que el medio este en líquido retiramos el algodón y lo vertimos en la placa, dejamos enfriar hasta que se solidifique el medio. 14.El medio solidificara y estará listo para la siembra de microorganismos. 15.Y luego obtendremos los resultados. BIBLIOGRAFIA: VIDEO 1: https://www.youtube.com/watch?v=vU_0mL5rcek VIDEO 2: https://www.youtube.com/watch?v=YGoPu0cn9ms De la introducción: depa.fquim.unam.mx/archivero/Protocolo2...